急性胰腺炎继发器官功能衰竭患者凝血功能及外周血TIM-3 TAT ACE2水平变化分析

李 军, 魏国峰, 蔡兆辉, 李海山

(安徽省合肥市第二人民医院急诊科, 安徽 合肥 230011)

急性胰腺炎(Acute Pancreatitis,AP)是一种常见的急腹症,可由多种原因引起,包括胆结石、酒精摄入过量等[1]。该疾病主要特征是胰腺的急性炎症,可能伴随着局部或全身的炎症反应,严重时会导致多器官功能衰竭。研究表明,AP患者的凝血功能会发生显著变化,这可能与炎症过程有关[2]。因此,了解AP患者凝血功能的变化,对于早期诊断、风险评估和治疗策略的制定具有重要意义。此外,T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(T-cell Immunoglobulin and Mucin-domain containing-3,TIM-3)是调节免疫反应的重要分子,而凝血酶-抗凝血酶复合物(Thrombin-Antithrombin Complex,TAT)是凝血和纤溶系统活性的标志物,血管紧张素转换酶2(Angiotensin-Converting Enzyme 2,ACE2)则与炎症和血压调节密切相关[3-4]。这些分子的水平变化可反映急性胰腺炎的病理生理过程,尤其是在继发器官功能衰竭的情况下其相关性可能更大。因此,本研究旨在通过分析AP患者凝血功能的变化以及TIM-3、TAT、ACE2等生物标志物的水平,探讨这些指标与疾病严重程度及继发器官功能衰竭的关系,为临床诊断和治疗提供新的视角。

1 资料与方法

1.1一般资料:本研究开展时间为2020年8月至2022年8月,研究对象为在我院接受诊疗的118例急性胰腺炎患者,根据亚特兰大分级标准[5]对患者的病情严重程度进行评价,并据此进行分组:轻度组(n=72)和重度组(n=46),对两组患者的一般资料情况进行分析,各方面差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。纳入标准:① 入组患者均符合《中国急性胰腺炎诊治指南》[6]中对急性胰腺炎的诊断标准:上腹部存在持续疼痛;患者的血清淀粉酶、脂肪酶浓度高于正常值3倍;经影像学检查,腹部病变符合相关急性胰腺炎特征病变。上述诊断标准符合至少两项即可诊断为急性胰腺炎;② 经亚特兰大分级标准对患者病情进行评估:患者无器官功能衰竭(基于改良Marshall评分[7]进行评价,评分高于2分即可诊断)及局部或全身并发症,如急性胰周液体积聚、胰腺坏死性积聚、包裹性坏死或假性囊肿情况为轻症急性胰腺炎,纳入轻度组,如发生器官衰竭或其他局部、全身并发症为中重症急性胰腺炎,纳入重度组;③ 患者发病至入院时间在24h内;④ 患者神志清楚,可进行沟通交流;⑤ 均为首次发病。排除标准:① 入组前接受大量激素或者抗生素药物治疗患者;② 近期存在抗凝或溶栓治疗史;③ 存在多发创伤或大量出血患者;④ 患有血液系统传播疾病,如艾滋病、梅毒等;⑤ 患者临床资料不完整。

表1 两组一般资料比较

1.2方法:标本采集:收集所有患者的空腹静脉血7mL,然后以3800r/min的速度离心15min,然后收集上清液,随后立即放入-80℃冰箱内待检。凝血功能指标:使用德国西门子公司生产的CA510型全自动凝血分析仪检测凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原浓度(FIB)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间国际标准化指数(INR)。使用贝克曼库尔特生产的LH-750型血细胞分析仪检测血细胞计数水平,然后根据NLR=中心粒细胞计数/淋巴细胞计数,计算NLR数值。外周血TIM-3、TAT、ACE2水平:使用德国Sysmex公司生产的HISCL-5000型化学发光分析仪检测TAT水平。TIM-3、ACE2使用酶联免疫吸附法检测,试剂盒购自上海恒远生物科技有限公司。

1.3患者结局及判定标准:根据患者是否继发器官功能衰竭进行分组:继发组(n=31)和未继发组(n=87)。继发器官功能衰竭诊断标准:患者临床表现为血压降低、应激性溃疡出血、呼吸窘迫、全身出血、心率增快、血尿或无尿症状,同时经影像学检查证实存在肝、肾、胃肠道、心脏及肺部等重要脏器的严重功能障碍情况。

2 结 果

2.1轻度组和重度组凝血功能比较:重度组患者的凝血功能指标(PT、INR、APTT和FIB)均高于轻度组(P<0.05)。见表2。

表2 轻度组和重度组凝血功能比较

2.2轻度组和重度组外周血TIM-3、TAT、ACE2水平比较:重度组患者的外周血中TIM-3和TAT水平高于轻度组,ACE2水平低于轻度组(P<0.05)。见表3。

表3 轻度组和重度组外周血TIM-3 TAT ACE2水平比较

2.3继发组和未继发组凝血功能指标比较:继发组患者的凝血功能指标(PT、INR、APTT和FIB)均高于未继发组(P<0.05)。见表4。

表4 继发组和未继发组凝血功能指标比较

2.4继发组和未继发组外周血TIM-3、TAT、ACE2水平比较:继发组患者的外周血中TIM-3和TAT水平高于未继发组,而ACE2水平则低于未继发组(P<0.05)。见表5。

表5 继发组和未继发组外周血TIM-3 TAT ACE2水平比较

2.5影响患者继发器官功能衰竭的多因素分析:根据上述结果,以患者是否继发器官功能衰竭(继发=1,未继发=0)为因变量,以上述结果中存在差异的指标为自变量(均为实测值)进行多因素分析。经多因素分析可知,PT、INR、APTT、FIB、TIM-3、TAT、ACE2均会影响患者继发器官功能衰竭。见表6。

表6 影响患者继发器官功能衰竭的多因素分析

2.6凝血指标、TIM-3、TAT、ACE2水平对患者继发器官功能衰竭的预测价值:ROC曲线分析结果显示,PT、INR、APTT、FIB、TIM-3、TAT、ACE2均对患者继发器官功能衰竭具有一定预测价值,其AUC值分别为0.846、0.926、0.819、0.862、0.751、0.847、0.858。见表7,见图1。

图1 凝血指标、TIM-3、TAT、ACE2水平对患者继发器官功能衰竭的预测价值曲线

表7 凝血指标 TIM-3 TAT ACE2水平对患者继发器官功能衰竭的预测价值

3 讨 论

器官功能衰竭是AP的一种严重并发症,通常涉及多个系统,包括呼吸衰竭、肾衰竭和循环衰竭等,会加重患者的病情,显著增加死亡风险[8]。因此,在临床实践中,早期识别出可能发展为重症胰腺炎的患者是至关重要的,这需要依赖于有效的风险评估工具和生物标志物。目前使用的预测工具,如Ranson评分、APACHE II评分等,虽然在一定程度上有助于评估疾病严重程度,但在早期准确预测器官功能衰竭方面存在局限。因此,研究者转向了探究凝血功能的变化,以及外周血中特定生物标志物的水平变化,如TIM-3、TAT和ACE2。相关研究指出,这些指标的改变不仅可反映急性胰腺炎的严重程度,而且可能与继发器官功能衰竭的风险相关联[9]。

本研究发现,重度AP患者以及继发器官功能衰竭的患者在凝血功能指标(PT、INR、APTT和FIB)以及外周血中TIM-3和TAT水平方面表现出显著的异常,同时这些患者的ACE2水平低于轻度组和未继发组患者。这些结果提示,凝血功能的异常和特定生物标志物的水平变化与AP的严重程度和继发器官功能衰竭的风险密切相关。分析原因为,AP的病理生理过程中,胰腺组织释放的组织因子和多种炎症介质触发了凝血系统的内源性和外源性路径,导致微血管内大量血栓形成[10]。这种过程不仅会消耗大量凝血因子,还会加剧胰腺组织的局部缺血,形成一种恶性循环。黄鑫[11]的研究表明,AP患者的凝血功能指标普遍高于健康人群,反映出其体内凝血系统的异常激活,在重症AP 的早期阶段,采用抗凝治疗可以有效减少坏死性胰腺炎的发生率,缩短住院时间,并显著改善患者的预后。

TAT能够有效显示体内凝血酶的生成量,从而成为衡量凝血激活水平的重要生物标志物。与纤维蛋白原和纤维蛋白原降解产物等其他生物分子标志物相比,TAT能更准确地揭示早期机体的高凝血状态[12]。因此,该指标水平与凝血指标机制大致相同,在急性胰腺炎患者中,会明显上升,且与疾病严重程度和继发器官功能衰竭相关。

Tim-3,作为Tim蛋白家族的一员,在多种细胞类型中,包括CD4+、Th1、Th17、CD8+ T细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞中,发挥着关键作用。ZHANG Y等[13]的研究发现,s-Tim-3与炎症反应有着紧密的联系。REN等[14]的研究显示s-Tim-3在脓毒症的发展中扮演重要角色,它在脓毒症期间对单核细胞表现出免疫抑制作用。s-Tim-3的出现导致了Tim-3内部平衡的失调,并加剧了患者的脓毒血症状况。另有研究表明,在AP的发展中,从轻症向重症转变的关键因素之一是凝血功能的障碍和微血栓的形成以及炎症反应的加剧,这些因素导致胰腺组织的血液供应不足,进而引发组织坏死,由此引发的自胰酶活化导致二次损伤[15]。

ACE2是一种存在于多种组织细胞内的跨膜糖蛋白,尤其在胃肠和肝脾等部位表达,它能够对抗ACE的效果,起到平衡组织内信号肽的作用。ACE2通过抑制促进血管生成的信号途径,限制内皮细胞血管的形成。此外,它还能够通过水解作用产生ACE-血管紧张素,抑制内皮细胞激活血小板,减少血小板的黏附、聚集和释放,发挥抗血栓形成的作用。同时,ACE2还能促进AngⅡ的降解,帮助血管舒张、降低血压,从而改善微循环状态。因此,ACE2在急性胰腺炎患者中,其水平会随着病情的加重而逐渐减低。

进一步将上述指标进行多因素及预测价值分析,结果显示,PT、INR、APTT、FIB、TIM-3、TAT、ACE2均会影响急性胰腺炎患者继发器官功能衰竭,且具有一定的预测价值,提示它们可以作为评估急性胰腺炎患者风险和病情进展的重要工具。

综上所述,急性胰腺炎患者中,凝血功能异常以及外周血中TIM-3、TAT的升高和ACE2的降低与疾病的严重程度密切相关,对急性胰腺炎继发器官功能衰竭风险有潜在的预测价值。