海南省文昌鸡传染性贫血的血清学调查

张庆玲,史慧君,刘光亮,晁 哲,4,刘海隆,4,魏立民,张 艳,*

(1.新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐 830052;2.海南省农业科学院三亚研究院(海南省实验动物研究中心),海南三亚 572025;3.海南省农业科学院畜牧兽医研究所,海南海口 571100;4.海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口 571100)

鸡传染性贫血(Chicken infectious anaemia,CIA)是一种高度传染性、病毒性、免疫抑制性疾病,它是由环状病毒科、环状病毒属中的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anaemia virus,CIAV)感染所引发的疾病,又被称为出血性综合征、贫血性皮炎综合征和蓝翅病[1]。CIAV的主要靶细胞为成血细胞和前体T淋巴细胞,其能通过吸附和穿透进入到靶细胞,并在细胞核内增殖;病毒通过攻击成血细胞,导致成血细胞凋亡,进而引起了机体贫血[2]。CIAV对淋巴细胞具有特异性嗜性;当胸腺成淋巴细胞遭到CIAV攻击后,其CD4+、CD8+T细胞的数量会被特异性地抑制,造成淋巴细胞耗竭,诱发严重的免疫抑制;同时机体对各种细菌和病毒感染的易感性增加,导致死亡率上升、生产性能降低、抵抗力下降[3-5]。

该病的临床症状通常表现为再生障碍性贫血,皮下和肌肉出血,骨髓发育不全,法氏囊、胸腺以及全身的淋巴萎缩,尤其以胸腺萎缩为特征[6]。CIAV可以通过水平传播,也可通过垂直传播的方式传给下一代;所有年龄的鸡均易感,通常以2～4周龄的小鸡最易感。成年鸡感染CIAV后通常会呈现出亚临床症状,不会出现贫血,病死率也不会增加。由于CIAV对化学和物理试剂的灭活表现出较高的抵抗性,因此很难从养殖场彻底根除;而且目前对CIA的治疗没有特效药物,只能通过加强生物安全防控和接种CIA疫苗来预防,一般在13～15周龄对种鸡进行免疫,但是海南的多数鸡场均未采用疫苗预防,整个家禽业依然面临着巨大的挑战。

自1979年Yuasa N等[7]在日本无特定病原体鸡中分离出来鸡传染性贫血致病因子后,我国也于1992年分离到该病毒[8]。近年来,我国广西、江苏、山东、广东等地也陆续报道了此病[9],尽管CIAV的广泛传播给国内家禽业的发展带来了巨大的威胁,但海南却缺乏该疾病的相关报道及信息数据,为此,本研究通过对海南省规模文昌鸡场鸡传染性贫血进行血清学调查,以期为海南省文昌鸡传染性贫血的防控提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 待检样品 分别于2021年12月至2022年9月从海南省文昌鸡主要养殖地区海口市、文昌市、儋州市、琼海市14个不同规模、不同饲养类型的文昌鸡场随机采集不同类型(商品代肉鸡、商品代蛋鸡、种鸡)、不同生长阶段的未经CIA疫苗免疫的鸡全血,共计1 709份。其中,海口市采样1 011份,文昌市采样563份,琼海市采样75份,儋州市采样60份;雏鸡(1～42日龄)采样218份,育成鸡(43～84日龄)采样583份,成年鸡(85～130日龄)采样908份;春季(3-5月)采样383份,夏季采样(6-8月)531份,秋季(9-11月)采样460份,冬季(12月至次年2月)采样335份;大型规模鸡场(≥10万只)采样1 180份,中型规模鸡场(3万～10万只)采样135份,小型规模鸡场(<3万只)采样394份;商品代肉鸡采样266 份,商品代蛋鸡采样107份,种鸡采样1 336份。所有血样室温下自然凝集,3 500 r/min离心8 min后分离血清,样品编号备份,置-40 ℃保存待测。

1.1.2 主要试剂 鸡传染性贫血ELISA抗体检测试剂盒,美国Idexx公司产品。

1.1.3 主要仪器 SpectraMax iD5多功能酶标仪,美国Molecular Devices公司产品;Eppendorf Research微量移液器,德国Eppendorf 公司产品;Hermle Z366K离心机,德国HERMLE公司产品。

1.2 方法

1.2.1 鸡传染性贫血的抗体检测及结果判定 严格依照Idexx公司提供的鸡传染性贫血ELISA抗体检测试剂盒说明书进行操作,并根据说明书中的结果判定标准进行检测结果的判定。

1.2.2 数据分析 所有试验数据采用SPSS19.0软件进行数据分析。

2 结果

2.1 不同地区文昌鸡传染性贫血感染情况

不同地区文昌鸡CIAV血清抗体检测结果见表1。从海南省文昌鸡主要养殖地区海口市、文昌市、儋州市、琼海市的文昌鸡场采集的1 709份血样共检出CIAV抗体阳性样品564份,血清抗体总阳性率达到33%。CIAV感染在4个文昌鸡主要养殖地区普遍存在,但感染程度存在差异。其中,儋州市文昌鸡血清CIAV抗体阳性率最高,为55%;其次是琼海市,文昌鸡CIAV血清抗体阳性率为46.67%;4个市中,文昌市文昌鸡的CIAV血清抗体阳性率最低,为29.31%。

表1 不同地区文昌鸡CIAV血清抗体检测结果Table 1 Detection results of serum antibody against CIAV in Wenchang chickens from different regions

2.2 不同生长阶段文昌鸡传染性贫血的感染情况

不同生长阶段文昌鸡CIAV抗体检测结果见表2。各个生长阶段的文昌鸡均存在不同程度的感染,且文昌鸡的CIAV血清抗体阳性率与其日龄存在一定关系。其中,成年文昌鸡CIAV的感染程度最高,血清抗体阳性率达到53.63%;育成鸡和雏鸡CIAV的感染程度较低,血清抗体阳性率分别为10.29%和7.80%。

表2 不同生长阶段文昌鸡CIAV血清抗体检测结果Table 2 Detection results of serum antibody against CIAV in Wenchang chickens at different growth stages

2.3 不同季节文昌鸡传染性贫血感染情况

不同季节文昌鸡CIAV血清抗体检测结果见表3。CIAV在一年四季均可感染,尤其在冬季鸡群的感染程度最高,血清抗体阳性率达到48.06%,其次是夏、春两季,血清抗体阳性率分别为32.96%、31.85%,秋季CIAV感染程度最低,血清抗体阳性率为23.04%。

表3 不同季节文昌鸡CIAV血清抗体检测结果Table 3 Detection results of serum antibody against CIAV in Wenchang chickens in different seasons

2.4 不同养殖规模文昌鸡场传染性贫血感染情况

不同养殖规模文昌鸡场CIAV的血清抗体检测结果见表4。CIAV的感染情况与文昌鸡场的规模存在一定关系;在中、小规模文昌鸡养殖场CAV的感染程度较为严重,血清抗体阳性率分别达到41.48%和40.10%;而大型规模养殖场 CIAV的血清抗体阳性率最低,为29.66%。

表4 不同规模文昌鸡场CIAV血清抗体检测结果Table 4 Detection results of serum antibody against CIAV in different scale Wenchang chicken farms

2.5 不同类型文昌鸡群传染性贫血感染情况

不同类型文昌鸡群CIAV血清抗体检测结果见表5。CIAV在商品代肉鸡、商品代蛋鸡和种鸡中均有感染。其中,商品代蛋鸡场文昌鸡的CIAV感染情况最为严重,血清抗体阳性率达到62.62%;商品代肉鸡场次之,CIAV的血清抗体阳性率为48.50%;种鸡场文昌鸡CIAV的感染程度最低,血清抗体阳性率为27.54%。

表5 不同类型鸡CIAV抗体检测结果Table 5 Detection results of serum antibody against CIAV in different types of chickens

3 讨论

文昌鸡是海南省优质地方家禽品种,近年来,随着文昌鸡养殖业规模化、集约化的发展,疾病给文昌鸡产业带来的风险越来越大。CIA是危害我国家禽养殖的重要垂直传播疫病之一,虽然CIAV感染引起的直接病死率并不是很高,但因其主要损害免疫器官,能造成机体的免疫机能发生严重障碍,因此不容小觑。国内报道显示[10-12],当前我国鸡群中普遍存在CIAV感染,其中,浙江省宁波市CIAV的血清抗体阳性率达到68.8%,安徽省CIAV血清抗体阳性率为70.63%,云南省地方品种鸡群的CIAV血清抗体阳性率高达98.47%。本研究对海南省文昌鸡主要养殖地区的CIAV感染情况进行了血清学调查,结果发现海南省文昌鸡群中CIAV的感染普遍存在。本次调查共采集文昌鸡血液样品1 709份,CIAV的血清抗体总阳性率达到33%,因此,需要加强对海南省文昌鸡CIA的防控。

调查结果显示,不同地区文昌鸡的感染程度不同。其中,海南省儋州市文昌鸡的CIAV感染程度最高,血清抗体阳性率达到55%;文昌市文昌鸡的CIAV血清抗体阳性率较低,为29.31%。分析原因这可能与各地区文昌鸡的饲养管理模式有关,在海口、文昌的文昌鸡采样场主要以企业自行管理为主,鸡场有专门的兽医,会定期检测一些鸡重要疫病的抗体,有的鸡场还在做一些疫病的净化,因此,整体的饲养管理水平较高;而儋州和琼海的文昌鸡采样场主要采用公司加农户的饲养模式,鸡场主要将鸡只交给农户饲养,待快上市前收回饲养一段时间出售,虽然公司会定期派技术人员上门服务,但农户文昌鸡的饲养水平层次不齐,管理较差,因此,CIAV的感染程度较高。

吕其壮等[13]调查发现,桂东南地区玉林三黄鸡、容县霞烟鸡和北流凉亭鸡的CIAV感染多在秋季和春季发生。但本调查发现,海南省文昌鸡在不同季节均有CIAV感染,以冬季高发,血清抗体阳性率达到48.06%。推测这可能与海南特殊的气候特征及鸡场的饲养环境有关。海南岛虽然“全年无冬”,但海南的冬季气候潮湿,近些年也曾出现过低温冷害的侵害,异常冷冬事件[14]。而低温高湿的环境极易导致鸡群食欲下降,对疾病的整体抵抗力下降,加之鸡场冬季防寒保暖措施不到位,鸡舍内有害气体及鸡群应激等因素的增加,造成鸡群发病。

CIAV感染与鸡的日龄密切相关。解慧梅[15]调查发现,随着鸡日龄的增加,江苏省地区CIAV的感染率明显增加。本调查发现,CIAV在所有阶段的文昌鸡都有感染,但成年鸡的CIAV血清抗体阳性率最高,为53.63%,育成鸡次之,CIAV血清抗体阳性率为10.29%,雏鸡CIAV血清抗体阳性率最低,仅为7.80%,这与解慧梅的调查结果一致。CIAV即能水平传播又可垂直传播,病毒在鸡体内一旦产生中和抗体之后,在很长时间内都难以清除。研究表明,在8～12周龄以后,绝大部分鸡会发生CIAV抗体阴转阳的现象[16],因此,这可能就是成年鸡CIAV血清抗体阳性检出较高的原因。虽然成年鸡感染CIAV后不表现临床症状,但往往呈现出亚临床隐性带毒状态,且成年鸡可通过垂直传播的方式传播疫病,加大了鸡群感染CIAV的风险,因此需要重视对成年鸡CIAV的防控。被CIAV污染的器具、饲料、饮水、鸡的排泄物等经过消化道和呼吸道途径均可作为本病的传染来源,且在相关报道中羽干也可检测到CIAV,表明可能存在其他传播模式[17]。所以,各个文昌鸡养殖场也须注意从根本上杜绝所有可能的CIAV传染源,阻断其可能的传播模式,才可能真正做好文昌鸡CIAV的防控工作。

调查发现,不同规模文昌鸡场均存在CIAV感染,但感染程度存在差异。其中,中小型规模文昌鸡场CIAV的血清抗体阳性率较高,分别为41.48%和40.10%。分析原因这可能与鸡场自身条件和管理水平相关。小规模文昌鸡场饲养环境较差,养殖设备不完善、缺乏有效的排污消毒及防疫程序;中型文昌鸡饲养密度不合理,生物安全防控做的不到位,加之CIAV对化学灭活具有高度的抗性,所以,病原在场中传播较快,感染风险较高。因此,针对中小文昌鸡养殖场,应加强对鸡场自身的管理,合理规划鸡舍鸡只的饲养密度,严格做好消毒和防疫工作,以减少疫病对鸡只健康的影响。

从不同养殖类型文昌鸡CIAV血清抗体的检测结果来看,CIAV在不同类型文昌鸡群中均有感染,尤其在商品代蛋鸡群CIAV的感染程度最高,血清抗体阳性率高达62.62%,种鸡CIAV的感染程度相对较低,血清抗体阳性率为27.54%。这可能是由于种鸡场饲养的是种鸡,其在生物安全防控、消毒免疫、饲养管理等各方面均较商品代场更为严格,而商品代蛋鸡场鸡只饲养周期短,鸡场的消毒免疫没有种鸡严格,因此鸡只感染CIAV的风险加大。由于产蛋期鸡如果感染CIAV,会直接导致病毒垂直传播给子代,而携带病毒的雏鸡又将成为鸡群水平传播的感染源,因此商品代蛋鸡应在开产前增加对CIAV的血清抗体监测,以降低CIAV感染风险,避免垂直传播。此外,商品代蛋鸡场应加强引种管理,严格把关,合理补充鸡只营养,增强蛋鸡免疫力。疫苗接种是防止鸡传染性贫血病传播的最佳选择,商品代场、种鸡场应根据鸡场的饲养目标制定相应的净化方案,逐步开展疫病的净化监测,在引种时严格把关,严禁从疫区引种,杜绝疫病的侵入。

本次调查表明CIAV在海南省文昌鸡主要养殖地区普遍存在,且在冬季和成年文昌鸡中高发,以商品代蛋鸡感染最为严重,因此,应针对性地加强对海南省文昌鸡传染性贫血的防控。