Unit-700阴道微生态检测仪在阴道分泌物检查中的应用价值分析

谢文华 福建省邵武市立医院检验科 （福建 邵武 354000）

内容提要： 目的：探究Unit-700阴道微生态检测仪在阴道分泌物检查中的应用价值。方法：回顾性分析2023年1月～2023年7月本院收治的疑似阴道分泌物异常者362例，上述研究对象均接受阴道分泌物采集，并通过Unit-700阴道微生态检测仪上机检测，记录样本pH值、过氧化氢定性、白细胞酯酶定性、唾液酸酐酶定性、β-葡萄糖醛酸苷酶定性以及凝固酶定性的检测结果。将其同传统的湿片法常规镜检结合革兰氏染色法镜检结果进行比较，计算Unit-700阴道微生态检测仪应用于诊断细菌性阴道病（Bacterial vaginosis，BV）、需氧菌性阴道炎（Aerobic bacterial vaginitis，AV）的灵敏度、特异度以及准确率。结果：在362例研究对象中，正常菌群组共有134例；菌群失调组共有228例，菌群失调组患者的阴道分泌物样本pH值阳性、过氧化氢阳性、白细胞酯酶阳性、唾液酸酐酶阳性、β-葡萄糖醛酸苷酶阳性、凝固酶阳性的病例数占比显著高于正常菌群组，差异存在统计学意义（P＜0.05）；对比结果显示，采用常规镜检以及阴道微生态镜检应用于评估阴道分泌物白细胞、念珠菌、滴虫、乳酸杆菌的阳性病例数占比差异无统计学意义；然而采用阴道微生态检测检出致病菌的病例数占比显著高于常规镜检，差异存在统计学意义（P＜0.05）。在全部362例研究对象中，最终确诊为BV108例、AV54例。统计结果显示，单独使用Unit-700阴道微生态检测仪诊断BV的灵敏度为90.74%；特异度为88.51%；准确率为90.88%；单独使用阴道微生态检测仪诊断AV的灵敏度为83.33%；特异度为89.94%；准确率为88.95%。结论：Unit-700阴道微生态检测仪对于评价菌群失调有较高的参考价值，然而将其单独应用于阴道炎症性疾病诊断的准确率有待进一步提升。

在人体体表与外界相通的腔道中，寄居着大量无致病性微生物群或生理性菌群，其对人体有益无害，且部分菌株对人体健康是必须的存在[1]。在生物体的长期净化过程中，通过自然选择以及不断适应的过程，此类正常菌群同宿主、环境之间保持着一种动态平衡的状态。女性下生殖道属人体开放性腔道，是重要的微生态区。阴道分泌物俗称白带，其正常形态多表现为稀糊样或者蛋清样，但患者出现生殖道炎症、宫颈炎症以及癌变后，白带量常常出现增多，且伴随显著的病理性改变，即所谓的病理性白带[2,3]。阴道微生态检查专注于阴道分泌物的微生物群、正常菌群形成的微生态系统，并通过过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、pH值等多种客观数值，进而对患者的阴道生理病理状态进行判断。一般情况下，健康女性的阴道微生物菌群以乳酸杆菌为主，其余部分由杂菌构成，整体环境呈现弱酸性[4]，当阴道微生态的平衡失调时，会有阴道菌群的异常生长以及阴道pH值的改变，部分条件致病菌乘虚而入即导致疾病[5]。微生态指标的监测在白带常规以及涂片镜检的基础之上，为疑似存在阴道疾病的患者提供了客观数据的支持。本研究主要探讨Unit-700阴道微生态检测仪应用于阴道分泌物监测的应用价值，以期对阴道感染以及相关疾病辅助诊断方案的选取发挥参考价值，现报告如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

回顾性分析2023年1月～2023年7月本院收治的疑似阴道分泌物异常患者共计362例。本研究内容经本院医学伦理委员会审议并批准通过，研究过程尊重每位患者隐私并对相关资料保密。根据患者阴道分泌物标本最终诊断结果是否存在菌群失调，将上述研究对象划分为正常菌群组（n=134）、菌群失调组（n=228）。其中正常菌群组年龄25～56岁，平均（40.56±7.65）岁；体质量指数17.39～23.59kg/m2，平均（20.49±1.58）kg/m2；就诊原因：外阴瘙痒45例；分泌物外观异常31例；分泌物异常增多28例；性生活出现不适23例；其他原因7例。菌群失调组年龄27～55岁，平均（41.09±7.14）岁；体质量指数17.74～23.38kg/m2，平均（20.56±1.44）kg/m2；就诊原因：外阴瘙痒78例；分泌物外观异常52例；分泌物异常增多46例；性生活出现不适34例；其他原因18例。两组一般资料无显著差异（P＞0.05）。

纳入标准：①有性生活史的女性；②年龄≥18 周岁；③在进行本次样本采集前禁止性生活3d；④非月经期采样。

排除标准：①合并泌尿系统疾病；②在进行样本采集前7d的时间内进行过阴道灌洗或局部上药；③在采集样本前14d的时间内服用消炎类药物；④临床资料不齐全、诊断结果存疑者。

1.2 方法

①采用无菌拭子或棉签采集阴道分泌物样本，在阴道深部、穹窿后部或宫颈口旋转10～15s，清楚看到分泌物附着后，置于无菌试管中。送医院检验科进行检测，检查在30min内完成。使用Unit-700阴道微生态检测仪配套的预处理液对样本进行预处理，将拭子浸泡在处理液中轻轻捏压管壁，使得分泌物充分溶解在液体中，随后上机进行自动化检测。使用仪器为Unit-700阴道微生态检测仪，搭配Comet600显微镜检分析系统（生产厂家：山东仕达思生物产业有限公司），试剂为仪器配套试剂。检验过程严格遵循仪器说明书以及实验室标准化操作规程（SOP文件）。

②通过仪器测出六项功能学微生态指标。与此同时，对全部样本进行湿片镜检以及革兰氏染色，染色试剂为上海太阳生物有限公司生产，镜检分析基于徕卡相差显微镜。湿片镜检对样本中的上皮细胞、白细胞、阴道滴虫、清洁度、真菌、线索细胞等形态学指标进行记录；革兰氏染色镜检对菌群多样性、优势菌分布情况、菌群密度以及炎症状态进行检查。上述操作流程均遵循《全国临床检验操作规范》[6]。

③油镜下对阴道分泌物进行形态学指标评价分级，并进行Nugent评分和Donders评分。需氧菌性阴道炎（Aerobic bacterial vaginitis，AV）评判标准，Donders评分＜3分正常，AV评分记为阴性，AV评分＞2分，AV评分记为阳性。Nugent评分＞3则记为细菌性阴道病（Bacterial vaginosis，BV）阳性。白细胞判断标准，每高倍镜0～5个为阴性，反之为阳性。念珠菌判断标准，高倍镜下见到孢子或菌丝，记为阳性。低倍镜下10个视野见到滴虫即为阳性。乳酸杆菌：高倍镜下少或无为阳性。菌群正常标准：密集度是Ⅱ～Ⅲ级，多样性为Ⅱ～Ⅲ级，优势菌为乳杆菌、阴道pH 3.8～4.5，白细胞为阴性，清洁度为1～2度。

1.3 统计学分析

2.结果

2.1 正常菌群与菌群失调样本的微生态指标比较

在362例研究对象中，经革兰氏染色涂片镜检结果显示，正常菌群组共有134例；菌群失调组共有228例。对上述两组分泌物样本的微生态检测结果显示，菌群失调组患者的阴道分泌物样本pH值阳性、过氧化氢阳性、白细胞酯酶阳性、唾液酸酐酶阳性、β-葡萄糖醛酸苷酶阳性、凝固酶阳性的病例数占比显著高于正常菌群组，差异存在统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1.正常菌群与菌群失调样本的微生态指标比较[n(%)]

2.2 白细胞、念珠菌、滴虫、致病菌检出的微生态结果比较

对比结果显示，采用常规镜检以及阴道微生态镜检应用于评估阴道分泌物白细胞、念珠菌、滴虫、乳酸杆菌的阳性病例数占比差异无统计学意义；然而采用阴道微生态监测检出致病菌的病例数占比显著高于常规镜检，差异存在统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2.白细胞、念珠菌、滴虫、致病菌检出的微生态结果比较[n(%)]

2.3 阴道微生态指标应用于BV、AV的诊断结果分析

在全部362例研究对象中，最终确诊为细菌性阴道病（Bacterial vaginosis，BV）108例、需氧菌性阴道炎（Aerobic bacterial vaginitis，AV）54例。统计结果显示，单独使用Unit-700阴道微生态检测仪诊断BV的灵敏度为90.74%；特异度为88.51%；准确率为90.88%；阳性预测值为0.810；阴性预测值为0.959；Kappa值为0.790；单独使用阴道微生态检测仪诊断AV的灵敏度为83.33%；特异度为89.94%；准确率为88.95%；阳性预测值为0.592；阴性预测值为0.969；Kappa值为0.627，见表3。

表3.阴道微生态指标应用于BV、AV的诊断结果分析

3.讨论

女性下生殖道是一个相对开放的生态环境，以乳酸杆菌为主的生理性正常菌群在同宿主之间相互协调、相互制约，并共同维持阴道微环境的动态平衡。当机体收到多种因素影响时，上述平衡状态被打破，原本作为优势菌群的乳酸杆菌呈现下降趋势，阴道内部的pH值继而出现升高。伴随着酸性环境的减弱，部分机会致病菌大量繁殖，继而造成炎症和感染。目前，白带常规检测是临床辅助科室应用最为广泛的检查方式。该检测主要通过湿片镜检或染色镜检对白带样本进行形态学观察，并对白细胞、念珠菌、滴虫等致病性成分进行计数。阴道微生态联合检测不依赖临床检验人员的经验和主观判断能力，具有一定的推广意义。本研究旨在探讨Unit-700阴道微生态检测仪在阴道分泌物检查中的应用价值。微生态检测结果显示，菌群失调组患者的阴道分泌物样本pH值阳性、过氧化氢阳性、白细胞酯酶阳性、唾液酸苷酶阳性、β-葡萄糖醛酸苷酶阳性、凝固酶阳性的病例数占比显著高于正常菌群组，表示阴道微生态检测对于评价菌群失调具有很高的应用价值。另外，采用微生态检测指标对于评估白细胞、念珠菌、滴虫的检查同革兰氏染色常规镜检具有较高的一致性。分析其原因，pH值反映阴道环境的酸碱度，偏酸性的环境提示以乳酸杆菌为代表的正常菌群处于优势状态；过氧化氢是乳酸杆菌的代谢产物；白细胞酯酶间接反应分泌物中白细胞数量，可提示阴道黏膜的炎症情况；唾液酸苷酶是由厌氧菌释放的，呈现阳性提示厌氧菌感染；凝固酶、β-葡萄糖醛酸苷酶阳性主要来源于需氧菌的释放，上述2个指标是评估BV以及AV的主要参考标准。然而研究结果显示，单独使用Unit-700阴道微生态检测评估阴道炎症疾病的准确度尚待提高。分析其原因，通过代谢产物评估致病微生物的类型与分布本质上属于间接诊断策略，且由于阴道分泌物样本中细菌种类繁多，不排除一种代谢产物由不同微生物产生，或同种微生物产生多种代谢产物的情形[7]，这也解释了为什么在本研究结果中，采用Unit-700阴道微生态检测应用于致病菌的阳性占比同常规湿片镜检联合革兰氏染色镜检存在显著差异。上述情况均可能导致微生态检测结果的假阳性、假阴性。由此可见，虽然阴道微生态检测技术应用于阴道分泌物的检测具有较高的应用价值，但单独应用于阴道炎的诊断准确率尚且偏低，还应当联合镜检以及多种检查手段进行综合评估。

综上所述，Unit-700阴道微生态检测仪对于评价菌群失调有较高的参考价值，同时对于白细胞、真菌、滴虫以及乳酸杆菌的检测结果同传统镜检结果具有较高的一致性，然而将其单独应用于细菌炎性疾病诊断的准确率有待进一步提升。