慢性阻塞性肺疾病合并初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变分析

蒋学峰,杨继黎,吕菊芬,焦 晓,高小娜,张冰美,魏建华

慢阻肺现已成为继心脏病和脑卒中后,全球人类死亡的第三大原因,我国40岁以上人群慢阻肺患病率已达到13.7%,是我国第三大慢性疾病[1]。肺结核仍然是严重危害人们生命健康的呼吸道传染性疾病,也是我国发病和死亡人数最多的传染病之一[2]。耐药结核中耐多药结核(MDR-TB)易造成 MDR-TB 传染[2]。2017年,全世界利福平耐药结核病患者55.8 万人,其中 82%为耐多药结核病[3],尤其对于老年COPD患者来说这使其结核病治愈更加困难[4]。因此,结核分枝杆菌感染患者的耐药监测显得尤为关键[5]。本研究通过对两组患者利福平耐药情况进行分析,找出其特点,为在一线的临床医生提供诊断及治疗的依据,更好地帮助患者治疗疾病,遏制结核传播。

1 资料与方法

1.1 一般资料:选择2022年1月1日至2023年6月30日在我院住院,经结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测为阳性患者221例,其中慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者共[6-7]94例,其中男性48例,女性46例,平均年龄(65.93±12.71)岁; 单纯初治菌阳肺结核患者127例,男性61例,女性66例,平均年龄(52.62±20.68)岁。本研究已通过宁夏回族自治区第四人民医院医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法

1.2.1 结核分枝杆菌rpoB基因和其突变的检测方法:采用GeneXpert MTB/RIF,它是一种MTB的新型检测方法,也是世界卫生组织推荐用于结核病早期诊断和利福平耐药检测的分子诊断技术[8],集样品准备、定量PCR扩增和荧光检测集于一身并可自动进行核酸分析。

1.2.2 操作方法:采集患者的晨痰作为检测标本,经过处理后放入GeneXpert MTB/RIF仪检测口开始检测。检测结核分枝杆菌rpoB基因为阳性时,即分子生物学确诊肺结核,同时做结核分枝杆菌rpoB基因突变检测,结果分为基因突变型和野生型菌株,即分为利福平耐药和利福平敏感菌株。

1.3 统计学方法:应用SPSS 26.0统计软件,计数资料比较采用χ2检验、Fisher确切概率法,以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因和其突变检测结果:突变(利福平耐药)21例(22.3%),野生型(利福平敏感)73例(77.7%);单纯初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变(利福平耐药)15例(11.8%),野生型(利福平敏感)112例(88.2%),2组比较差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 慢阻肺合并初治菌阳肺结核与初治菌阳肺结核的两组患者结核分枝杆菌rpoB基因和突变[n(%)]

2.2 不同性别慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变比较:不同性别慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变比较差异无统计学意义(P>0.05);单纯初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变在性别方面进行对比,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。

表2 两组不同患者结核分枝杆菌rpoB基因突变性别比较

2.3 不同年龄慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变比较:不同年龄慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变比较差异无统计学意义(P>0.05),在50～59岁及年龄≥70岁年龄段,耐利福平率偏高,分别占比33.3%、28.9%,见表3。

表3 不同年龄组慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变[n(%)]

2.4 不同年龄单纯初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变比较:不同年龄单纯初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变对比差异无统计学意义(P>0.05),在年龄<20岁年龄段利福平耐药率偏高,占比28.6%,见表4。

表4 不同年龄单纯初治菌阳肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变分析[n(%)]

3 讨论

根据相关报道,慢阻肺合并初治肺结核患者结核分枝杆菌rpoB基因突变(利福平耐药)率为17.42%,初治肺结核利福平耐药率为13.04%[9]。本研究结果显示,对慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者94 例菌株经基因测序,15例发生rpoB 基因突变,突变率(利福平耐药率)为22.3%,单纯初治菌阳肺结核127例,127例菌株经基因测序,21 例发生 rpoB 基因突变,突变率(利福平耐药率)为11.8%,与报道基本一致。本研究中两组患者利福平耐药率与性别无关。慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者利福平耐药率以中老年较高,单纯初治菌阳肺结核患者利福平耐药率以青年较高。

慢性阻塞性肺疾病患者同时在并发肺结核时,其肺结核的早期症状容易被其他症状掩盖,因此很容易被患者忽视,并且容易导致发生漏诊和误诊,从而延误其治疗[9]。耐多药结核病是结核分枝杆菌对异烟肼和利福平同时耐药,这两种药物目前是较为有效的抗结核药物[9]。之所以选择利福平耐药监测是因为它是治疗结核病最为关键的药物,对生长缓慢和处于静止期的结核杆菌均有杀灭作用。有学者报道,90%以上的利福平耐药株同时对异烟肼耐药,结核分枝杆菌的利福平耐药性与RNA聚合酶β亚基的rpoB基因相关,rpoB 基因突变与结核分枝杆菌对利福平耐药相关性达90%以上[10-12]。因此,对慢阻肺合并初治菌阳肺结核患者进行结核分枝杆菌rpoB基因突变(即利福平耐药)检测,有利于及时发现、快速诊断其是否为利福平耐药病例,且有利于更好地实施治疗,达到有效控制疾病的目的。