肝癌患者血清中sB7-H3、GP73、QSOX-1 的表达水平及临床诊断价值研究

曹晨，陈晓娟，杨琳

（郑州大学第二附属医院，河南 郑州 450014）

原发性肝癌是一种临床上常见的恶性肿瘤且发病率较高[1]，其临床症状一般表现为肝区疼痛，食欲下降、乏力、腹胀等。在临床一般采用手术治疗、化学药物治疗、放射治疗、生物治疗及中医药治疗，其中手术治疗是最有效的治疗方法，然而早期的原发性肝癌患者由于临床症状并不明显，所以大部分患者待到确诊时已是中晚期[2]，导致错过了最佳的手术治疗时期。目前甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体是原发性肝癌主要的早期诊断生物标志物，但是其均存在灵敏度和特异度不高等不足之处[3]。有研究表明血清可溶性B7-H3（Serum soluble B7-H3，sB7-H3）、血清中巯基氧化酶-1（Quiescin sulfhydl oxidase-1，QSOX-1）、高尔基体蛋白73（Golgi protein 73，GP73）在原发性肝癌中表达量显著高于肝硬化组和正常组。因此本研究探讨肝癌患者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 的表达水平及临床诊断价值。现报告如下。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料 选取在2018 年2 月至2020 年2月期间来我院治疗原发性肝癌患者310 例及同期健康体检人员100 例作为研究对象。

纳入标准：（1）观察组患者符合原发性肝癌的诊断标准[6]；（2）经过受试者及其家属同意，签署知情同意书，并上报我院伦理委员会获得批准同意。

排除标准：（1）患者在参加研究前接受过化疗、放疗、手术等治疗；（2）合并其他肿瘤、心肝肾等疾病。

将原发性肝癌患者作为观察组，同期健康体检人员作为对照组。其中观察组310 例，男186例，女124 例；年龄32～70 岁，平均年龄（55.68±5.67）岁；对照组男62 例，女38 例；年龄30～72 岁，平均年龄（55.64±5.65）岁。两组受试者在性别、年龄资料上对比差异不显著，无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 研究方法 所有受试者均在清晨空腹采集静脉血5 mL，在室温下静置10 min，3 000 r/min 离心15 min，吸取上清液，放置在-80℃下保存待检。采用双抗体夹心法检测血清中的sB7-H3、GP73、QSOX-1 的水平，其中sB7-H3 检测试剂盒购自苏州大学生物技术研究所，GD73 检测试剂盒购自美国R＆D 公司，QSOX-1 检测试剂盒购自上海沪震生物科技有限公司，具体操作严格按照试剂盒说明书进行，对溶度超出线性范围样本稀释5～20 倍重新进行检测。

1.3 统计学分析 研究所得数据均采用SPSS 22.0统计软件分析，计数资料以例数［n（%）］的形式表示，采用独立样本χ2检验，计量资料以()的形式表示，采用配对样本t 检验或独立样本t 检验，P＜0.05为差异统计学意义；根据血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 的水平绘制受试工作特征曲线（Receiver operator characteristic curve，ROC），利用ROC 曲线下面积评价血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 对肝癌临床诊断价值，并确定最佳的临界值。

2 结果

2.1 两组受试者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平的比较 由数据结果可知: 观察组受试者的sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组受试者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平的比较()

表1 两组受试者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平的比较()

2.2 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平与肝癌患者临床病理特征的关系 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1水平在患者的性别、年龄上差异不显著，无统计学意义（P＞0.05）；Ⅰ～Ⅱ期组患者的血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平显著低于Ⅲ～Ⅳ期组，而GP73水平却显著高于Ⅲ～Ⅳ期组，差异有统计学意义（P＜0.05）；肿瘤直径≥3 cm 组患者血清GP73、QSOX-1 水平显著高于肿瘤直径＜3 cm 组，差异有统计学意义（P＜0.05）；有远处转移组的肝癌患者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平显著高于无远处转移组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平与肝癌患者临床病理特征的关系()

表2 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平与肝癌患者临床病理特征的关系()

2.3 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 对原发性肝癌患者的临床诊断价值 采用ROC 曲线分析血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 在两组受试者的表达情况，见表3、图1。

图1 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1诊断原发性肝癌患者的ROC 曲线图

表3 血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 对原发性肝癌患者的临床诊断的ROC 曲线参数

3 讨论

原发性肝癌患者生存质量和生存率的提高取决于患者的早期诊断，而由于目前临床肝癌患者辅助诊断的指标主要为甲胎蛋白、癌胚抗原及甲胎蛋白异质体等，但是上述辅助诊断指标的敏感性和特异性皆不理想，并且存在漏诊率较高情况。朱波等[7]在研究中表明甲胎蛋白在诊断肝癌时，其灵敏度仅为34.5%～64.8%，特异度为71.5%～93.6%。因此，发现新的肿瘤标志物对肝癌的早期诊断和改善患者预后具有重要的临床意义。近几年，许多临床工作对肝癌的诊断指标[8-9]进行了大量的研究。

GP73 是一种跨膜蛋白，又称2 型高尔基体膜蛋白，在正常肝脏组织中肝细胞很少表达GP73，其主要在肝胆管上皮细胞表达[10]。当GP73 的增量表达到达饱和后，剩余的GP73 向高尔基体顺面远侧移动，这可能是因为肿瘤细胞主动释放或者在肿瘤细胞坏死后GP73 进入血液从而导入血清中[11]。郑绪斌等[12]认为在原发性肝癌患者血清中GP73高表达，具有一定的临床诊断价值。

B7-H3 是一种共刺激分子免疫球蛋白，其mRNA 在人体机体中广泛表达。目前，B7-H3 分子同时存在膜型和可溶型（sB7-H3）。B7-H3 的蛋白质分子在B 细胞、活化的T 细胞、树突状细胞和单核细胞内表达。康富标等[13]在研究中发现B7-H3在原发性肝癌患者组织中表达水平升高，并且与肾癌、乳腺癌、胃癌等多种肿瘤组织的发生和发展有联系。赵和平等[14]认为sB7-H3 在原发性肝癌患者血清中表达量高于对照组，且能够作为诊断肝癌的指标。

QSOX-1 是一种参与蛋白质折叠的氧化巯基的酶，主要分布在高尔基体和内质网。Knutsvik G等[15]在研究中表明QSOX-1 的高表达是乳腺癌存活率下降的独立影响因素，且QSOX-1 的表达水平可能作为肿瘤疾病的生物标志物。陶智、冯显红[16]的研究表明QSOX-1 对原发性肝癌诊断的截断值为68.75 ng/L，灵敏度为74.3%，特异度为77.1%。

本研究显示：观察组受试者的sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平均显著高于对照组。血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平在患者的性别、年龄上差异无统计学意义；Ⅰ～Ⅱ期组患者的血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平显著低于Ⅲ～Ⅳ期组，而GP73水平却显著高于Ⅲ～Ⅳ期组；肿瘤直径≥3 cm 组患者血清GP73、QSOX-1 水平显著高于肿瘤直径＜3 cm组；有远处转移组的肝癌患者血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 水平显著高于无远处转移组。B7-H3、GP73、QSOX-1 的曲线下面积（AUC）分别为0.930、0.820 及0.817，最佳临界值分别为2 870.58 ng/mL、115.68 ng/mL 及68.715 pg/mL，敏感度分别为74.2%、73.2%、57.1%，特异度分别为93.0%、98.0%、93.0%。若sB7-H3、GP73、QSOX-1 联合诊断，即其中之一为阳性即诊断为肝癌，其敏感度为84.5%，特异度为98.9%。

综上所述，血清sB7-H3、GP73、QSOX-1 在原发性肝癌血清中高表达，表达水平与肿瘤直径、临床分期及是否发生远处转移有关，且sB7-H3、GP73、QSOX-1 可作为原发性肝癌早期诊断的良好指标，sB7-H3、GP73、QSOX-1 联合检测更能提高原发性肝癌的诊断的准确性。