饲料中添加不同硒源对细鳞鲑幼鱼生长性能、血清生化指标和肝脏抗氧化能力的影响研究

2023-10-09魏凯马龙李小龙刘鑫

中国水产 2023年9期

◎ 文/魏凯马龙李小龙刘鑫

通过在饲料中添加不同硒源，研究其对细鳞鲑幼鱼生长性能、血清生化指标和肝脏抗氧化能力的影响，结果显示，在饲料中添加适量硒元素后，细鳞鲑幼鱼的生长性能和肝脏抗氧化性能有显著提升，并对其脂肪代谢有一定促进作用。这对降低细鳞鲑幼鱼阶段死亡率、发展细鳞鲑生态健康养殖模式、加快恢复其野外种群规模具有一定参考价值。

细鳞鲑（Brachymystax lenok），属鲑形目，鲑科，细鳞鲑属，在我国主要分布于黑龙江流域、绥芬河、图们江、潮河、滦河、额尔齐斯河，以及秦岭山区渭河及其支流上游、汉水支流湑水河和太白河等。由于环境变化和人类活动干扰等原因，细鳞鲑的自然资源量急剧下降，分布区域缩小，目前已被列入《国家重点保护野生动物名录》。细鳞鲑是我国名贵的冷水性鱼类，其肉质营养价值高，具有重要的经济价值，国内很早就开展了相关人工繁育技术研究。但由于细鳞鲑在人工养殖开口期存活率偏低，生长速度较慢，影响了其规模化生产。

硒（Selenium，Se）在1817年被瑞典化学家Berzlius发现，作为鱼类必需的微量元素之一，在适量的范围内添加可以提高鱼体抗氧化功能，增强机体免疫力，调节机体代谢，还具有一定的解毒功能。目前，国内学者开展了一些在饲料中添加不同硒源对鱼类生长和免疫水平的研究。本实验将12000尾细鳞鲑幼鱼随机分为4组，分别投喂3种等氮等能饲料和一款商品化开口料，每组设3个重复，每个重复1000尾鱼，开展了不同硒源对细鳞鲑幼鱼生长性能、血清生化指标和肝脏抗氧化性影响的研究。

一、材料与方法

（一）实验用鱼和饲养管理

细鳞鲑幼鱼是由吉林省延边朝鲜族自治州珲春市细鳞水产良种场进行细鳞鲑亲鱼人工繁育后，将受精卵运回至北京市水生野生动植物救护中心进行培育后得到。实验鱼均选取无病无伤、体质健壮的个体，平均体长（2.303±0.116）cm，平均体重（0.055±0.011）g。本实验分4组，每组3个重复，每个重复1000尾鱼，置于长1.5m、宽0.5m、深0.8m的玻璃钢水槽内，流水养殖，养殖周期30d。实验采用曝气后的地下水，水温（12.2±1.1）℃，溶解氧（7.8±0.5）mg/L，pH值7.5～7.8。

（二）实验饲料

本实验设计3种等氮等能饲料，分别为基础料对照组（命名为G1-NON）、酵母硒组（命名为G2-SeY）和无机硒组（命名为G3-SeI），3种饲料均做成微胶囊颗粒（0.4mm），保存于-20℃环境中备用，饲料组成及营养成分见表1，并添加一组正规饲料厂家生产的商品化开口料（命名为G4）进行对比。

表1 实验饲料组成及营养水平（%）

（三）指标测定

生长实验结束后，分别统计各组实验鱼存活数，每组随机取30尾鱼，测量体长、体重、内脏重等指标。

各指标计算公式如下：

增重率（WGR %）=（Wf-Wi）/Wi×100

特定生长率（S G R %/d）=（lnWf-lnWi）/t×100

存活率（SR %）=Nf/Ni×100

肥满度（CF g/cm3）=W/L3×100

脏体比（VSI %）=Wv/W×100

式中Nf代表试验终末鱼尾数，Ni代表实验初始鱼尾数，Wf代表末体重（g），Wi代表初体重（g），t为试验天数（d），Wv为鱼体内脏质量（g），W代表鱼体体重（g），L代表鱼体体长（cm）。

（四）血清采集和生化指标测定

每组随机取10尾鱼，麻醉（MS-222）后在超净台内使用1mL注射器采集尾静脉血液，采集的血样于4℃下静置2h，于3000r/min离心15min（4℃），取上层血清分装后放入-80℃冰箱保存，用于分析血清生化指标。血清样品中的总胆固醇（Total Cholesterol，TC）、甘油三酯（Triglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（High Density Lipoprotein Cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（Low Density Lipoprotein Choles terol，LDL-C）、葡萄糖（Glucose，GLU）、总蛋白（Total Protein，TP）、谷丙转氨酶（Alanine Transaminase，ALT）、谷草转氨酶（Aspartate Transaminase，AST）活性均按照试剂盒说明书测定。

每组再随机取10尾鱼，取出肝脏后保存于-80℃冰箱中。待测抗氧化指标有丙二醛（Malonaldehyde，MDA）、过氧化氢酶（Catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GPX）等。

（五）数据处理

所有实验数据用平均值±标准差（Mean±SD）表示，采用Excel2007进行数据处理，SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，采用Duncan氏多重比较分析组间的差异显著性，显著水平为P<0.05。图形由GraphPad Prism9.0绘制。

二、结果

（一）不同硒源细鳞鲑的生长性能

由表2可知，G2-SeY组和G3-SeI组细鳞鲑的终末体长和终末体重均显著高于其他两组（P<0.05），而G2-SeY组细鳞鲑终末体长显著高于G3-SeI组，终末体重差异不明显。在细鳞鲑幼鱼存活率方面，G3-SeI和G4组的细鳞鲑幼鱼开口期存活率显著低于其他两组（P<0.05），与G3-SeI组相比，G2-SeY组细鳞鲑存活率可以提高约5%。细鳞鲑幼鱼的增重率在G2-SeY组和G3-SeI组显著高于G1-NON组和G4组（P<0.05）（见图1），特定生长率在G2-SeY组和G3-SeI组显著高于G1-NON组，且G2-SeY组显著高于G4组（P<0.05）（见图2），肥满度在G3-SeI组最高，显著高于G1-NON组和G2-SeY组（P<0.05），与G4组无显著差异（P>0.05）（见图3），而脏体比在G1-NON组显著高于G3-SeI组和G4组（P<0.05），与G2-SeY组无显著差异（P>0.05）（见图4）。

图1 各组细鳞鲑增重率的差异

图2 各组细鳞鲑特定生长率的差异

图3 各组细鳞鲑肥满度的差异

图4 各组细鳞鲑脏体比的差异

表2 不同硒元素组细鳞鲑的生长性能指标

（二）不同硒源对细鳞鲑幼鱼血清生化指标的影响

由表3可知，G2-SeY组的TC、TG、HDL/C、TPRO显著高于G1-NON组（P＜0.05），略高于G3-SeI和G4组；LDL/C、GLU、ALT、AST在各组中无显著差异（P＞0.05）。

（三）不同硒源对细鳞鲑幼鱼肝脏抗氧化指标的影响

由表4可知，G2-SeY组的SOD、CAT、GPX显著高于G1-NON组（P＜0.05），G3-SeI和G4组之间无显著差异，略高于G1-NON组。G2-SeY组的MDA显著低于其他三组，G3-SeI和G4组之间无显著差异（P＞0.05），略低于G1-NON组。

表4 不同硒源对细鳞鲑幼鱼肝脏抗氧化能力的影响

三、讨论

（一）不同硒源对细鳞鲑幼鱼生长性能的影响

1957年，美国人Schwarz和Flotz首次证明动物需要硒元素营养，世界卫生组织也已确认硒是动物必需的营养元素。目前，在水产养殖中多以饲料添加剂形式添加不同形态硒，主要包括无机硒、有机硒、纳米硒等。硒元素对维持鱼体正常生长发育至关重要，是一种生长所需的微量元素，长期缺硒会导致鱼体生长缓慢，机体抗氧化性能下降，死亡率上升。因此，国内外学者开展了很多对饲料中添加适量的硒，从而来判断其是否会提高鱼类生长性能的研究。

本实验中，酵母硒的添加能显著提高细鳞鲑幼鱼的增重率和特定生长率，这与很多学者的研究结果一致，例如广西大学水产科学研究所许友卿等研究表明，0.6mg/kg的酵母硒能显著提高鳡鱼的增重率和特定生长率，提高饲料转化效率；上海海洋大学王亭亭等研究发现0.5mg/kg的酵母硒对鳖的生长性能具有显著促进作用；中国海洋大学梁萌青等发现饲料中硒的水平达到0.4mg/kg时，鲈鱼的生长性能达到最大。西南大学动物科技学院水产系苏传福等研究发现，日粮中硒含量0.66mg/kg能显著提高草鱼的增重率、特定生长率、饲料效率、蛋白质效率和饲料蛋白沉积效率，降低饲料系数。

（二）不同硒源对细鳞鲑幼鱼血清生化指标的影响

鱼类的血清生化指标可以在一定程度上反映鱼类的营养水平、代谢能力和疾病情况，是衡量鱼体健康状况的重要依据。血清中的总蛋白（TPRO）不仅反映了饲料中蛋白质的营养水平，还体现了机体蛋白质合成与代谢的强弱程度。由本实验结果可知，饲料中添加不同硒源均能够显著提高TPRO，说明硒元素的添加对鱼体生长中蛋白质的组织沉积有促进作用，有助于提升生长性能。总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）反映了动物体内脂类的吸收与代谢状况，而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的作用促进了胆固醇进行代谢。

本实验中，添加不同硒源的各组在TC、TG、HDL-C含量方面均有不同程度的上升，但TC和TG仍处于参考范围内，HDL-C含量的增加说明适量的添加硒元素能改善细鳞鲑幼鱼血液中脂肪的转运和代谢，有利于维持鱼体健康状态，这与在其它动物中的得出的结果相似。谷草转氨酶（AST）与谷丙转氨酶（ALT）是动物体内发挥氨基酸转运功能的两种重要的氨基酸转移酶，在肝脏中含量较高，能够衡量肝细胞是否正常，血清转氨酶升高表明肝细胞有损伤。本实验中各组的ALT和AST均无显著差异，说明在饲料中适当添加硒元素不会造成鱼体肝脏受损。

血清中葡萄糖（GLU）水平直接关系着鱼类的生长速度，可作为机体营养状况的衡量指标。GLU含量高，则鱼类摄食积极，蛋白质合成代谢旺盛，鱼体生长迅速，健康状况良好。本实验中各组细鳞鲑幼鱼血清中的GLU水平无显著差异。综上所述，硒元素确实能够调节细鳞鲑机体脂肪代谢并改善其血清生化指标，但最适宜的硒元素添加量还没有明确，有待于今后进一步研究。

（三）不同硒源对细鳞鲑幼鱼肝脏抗氧化能力的影响

超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）是动物体内主要的抗氧化酶，而丙二醛（MDA）含量被认为是脂类和蛋白质氧化损伤的生物标志物。本实验中，通过添加不同硒源，均可以使细鳞鲑幼鱼肝脏的SOD、CAT、GPX活性升高，而MDA含量下降，说明硒元素的适量添加提高了肝脏的抗氧化能力，可保护肝脏免受损伤，这与在其它动物中的试验得出的结果相似。综上所述，饲料中添加硒元素可以改善细鳞鲑幼鱼机体的抗氧化能力，也是提高器官抗氧化能力的有效方法，但最适宜的硒元素添加量还没有明确，有待于今后进一步研究。