薏仁米中邻苯二甲酸酯安全性评价

王显贵 吴小毛 杨晓凤

摘 要：采用气相色谱-三重四极杆质谱法对贵州不同产区的123个薏仁米样品进行了18种邻苯二甲酸酯（Phthalic Acid Ester，PAEs）含量检测，结果显示18种PAEs在123个薏仁米样品中均未检出，表明12个薏仁米产区的薏仁米样品均未受到PAEs污染，薏仁米中PAEs健康风险均在可接受范围内。

关键词：薏仁米；邻苯二甲酸酯；安全性评价

Abstract： A gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry method was used to detect the content of 18 phthalic acid ester （PAEs） in 123 samples of coix seeds from different production areas in Guizhou. The results showed that none of the 18 PAEs were detected in the 123 samples， indicating that none of the 12 samples from coix seeds production areas were contaminated with PAEs， and the health risks of PAEs in coix seeds were within an acceptable range.

Keywords： coix seed; phthalic acid ester; safety evaluation

鄰苯二甲酸酯（Phthalic Acid Ester，PAEs）广泛用于塑料制品、食品包装材料、医疗制品等行业，主要作用是增加产品的强度和柔韧度，PAEs使用率占塑化剂市场的88%[1]。目前，在国内外学者研究中发现，土壤、水体、植物和水生生物中都检出了PAEs，农作物根系吸收或吸附残留于土壤中的邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯后到达木质部，累积于植物茎或叶部，会对人体造成危害。薏仁米作为药食两用食物，深受广大消费者喜爱。近年来，农户在种植薏仁米过程中，习惯用薄膜覆盖来保温、保湿，增加薏仁米的产量，地膜的大量使用是否会对薏仁米种植基地造成污染，薏仁米在生长过程中是否吸收了PAEs，关于这方面的研究，暂时没有报道。本文采用气相色谱-三重四极杆质谱法（Gas Chromatography-Triple Quadrupole Mass Spectrometry，GC-MS/MS）首次对薏仁米中18种PAEs残留情况进行了检测，为评估贵州薏仁米安全性提供了实验依据，同时通过检测数据，对判断贵州薏仁米是否受到PAEs污染提供数据支撑。

1 材料与方法

1.1 样品采集与制备

按照梅花点法对贵州薏仁米产区薏仁米进行多点取样，每个样品采样3 kg薏仁谷，每个采样地块5个分点，然后将采集的样品混均成为一个混合样。采样主要在贵州省薏仁米产区盘州市（保田镇上保田村、打碓窝村）、安龙县（普坪镇、龙山镇、洒雨镇、笃山镇和海子镇）、普安县（青山镇、新店镇）、晴隆县（紫马乡、碧痕镇、大厂镇、安谷乡和沙子镇）、兴仁市（17个乡镇街道）、兴义市义龙新区（清水河镇、乌沙镇、威舍镇、新桥镇、雨樟镇和龙广镇）、贞丰县（北盘江镇、龙场镇、小屯镇、长田镇）、紫云县（板当镇）、关岭县（断桥镇、永宁镇）、普定县（化处镇）、遵义市正安县（中观镇晏溪村）等地，采集样品时标明县（市）村，经纬度坐标，经纬度用带小数点经纬度表示，选择WGS2000坐标系，采用十进制，精确到小数点后6位；样品采集后，晒干，用脱壳机将薏仁米去壳，磨细后过40目尼龙筛，分装备用。

1.2 试剂与仪器

正己烷（≥99.9%，色谱纯），赛默飞世尔科技（中国）有限公司；水为二级水；18种PAEs，德国Dr. Ehrenstorfer公司。

TSQ8000气相色谱-串联质谱仪，美国赛默飞世尔科技公司；ATX 224R电子天平，岛津公司；朗赋HT2500多管旋涡混合仪，上海朗赋实业有限公司；CQ-500A-DST超声波清洗仪器，上海跃进医用光学器械厂。

1.3 标准溶液配制

1 000 µg·mL-1邻苯二甲酸二烯丙酯（Diallyl Phthalate，DAP）标准储备液：称取DAP 0.025 g（精确到0.000 1 g）于25 mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容至25 mL。1 000 μg·mL-1邻苯二甲酸二异壬酯（Diisononyl Ortho-Phthalate，DINP）标准储备液：称取DINP 0.025 g（精确到0.000 1 g）于25 mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容至25 mL。

17种PAEs标准中间液（10 µg·mL-1）：分别吸取16种PAEs标准品（1 000 µg·mL-1）和DAP标准储备液（1 000 µg·mL-1）各1 mL于100 mL容量瓶中，用正己烷定容至100 mL。

1.4 样品前处理

样品前处理参照《食品安全国家标准 食品中邻苯二甲酸酯的测定》（GB 5009.271—2016）[2]固态试样5.2.3.1和SPE净化方法进行。

1.5 检测条件

1.5.1 气相色谱条件

色谱柱：HP-5 MS（30 m×0.25 mm，0.25 µm）；进样口温度：60～300 ℃；载气：氦气（纯度99.999%）；采用程序升温，初始温度为60 ℃，以30 ℃·min-1升至200 ℃，再以5 ℃·min-1升至300 ℃，保持5 min；流速：1.0 mL·min-1；进样量：2 µL。

1.5.2 质谱条件

电子轰击离子源；离子源温度：300 ℃；传输线温度：300 ℃；电离能量：70 eV；扫描方式：多反应监测模式。具体质谱检测参数见表1。

1.6 评价方法

采用美国研究委员会（National Research Council，

NRC）推荐的危害指数法（Hazard Index，HI）分析薏仁米中PAEs类化合物的摄入风险[3]。HI数值表示食用风险大小，当HI≥1，表明PAEs暴露可能存在健康风险，数值越大，风险就越大；当HI＜1时，表明PAEs的暴露水平属于相对安全范围内。本研究通过以下公式对摄入薏仁米的健康风险进行分析。

式中：C是薏仁米样品中PAEs的含量，mg·kg-1；M为薏仁米膳食摄入量，g·d-1；bw为成年人的平均体重，kg；RfD为PAEs摄入参考剂量，mg·kg-1·d-1。

美国环境保护署（U.S. Environmental Protection Agency，EPA）提出，按照成年人平均体重60 kg计，每人每天摄入的PAEs不得高于1.2 mg，依据美国环境保护署公布的参考剂量可知，DBP、DEHP、DIBP的RfD值分别为0.1 mg·kg-1·d-1、0.02 mg·kg-1·d-1、0.8 mg·kg-1·d-1 [4-5]。根据中国居民营养与健康状况调查报告，成年人的平均体重按60 kg计，根据对消费者的调查，薏仁米每日平均消费量为31.1 g·d-1，每日最高消费量57.3 g·d-1。

2 结果与分析

2.1 18种PEAs总离子流色谱图

取DNP和DNIP浓度为2.5 µg·mL-1、其余16种浓度为0.25 µg·mL-1的PAEs标准溶液配制成18种PAEs标准溶液，按照检测条件進行全扫描，得到18种PAEs化合物标样总离子流色谱图，见图1；采取同样的检测条件进行全扫描，得到空白样品总离子流色谱图（未添加PAEs标准品），见图2；样品添加PAEs混合加标溶液（0.25 µg·mL-1+2.5 µg·mL-1）总离子流色谱图详见图3。18种PAEs均实现了良好的分离，符合检测条件。

2.2 方法的线性范围、相关系数及定量限

准确吸取17种PAEs标准中间溶液（10 µg·mL-1），用正己烷逐级稀释，配制成浓度为0 µg·mL-1、0.02 µg·mL-1、0.05 µg·mL-1、0.10 µg·mL-1、0.20 µg·mL-1、0.50 µg·mL-1和1.00 µg·mL-1的标准系列溶液；准确吸取DINP标准储备液（1 000 µg·mL-1），用正己烷逐级稀释，配制成浓度为0 µg·mL-1、0.5 µg·mL-1、1.0 µg·mL-1、2.5 µg·mL-1、5.0 µg·mL-1、10.0 µg·mL-1和20.0 µg·mL-1的标准系列溶液。测定相应PAEs的色谱峰面积，以标准工作液的质量浓度为横坐标，以相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。由表2可知，18种PAEs在浓度范围内线性关系好，相关系数均在0.999 0～0.999 8，能够满足薏仁米中PAEs的检测需求。DINP的方法检出限为3 mg·kg-1，DBP的方法检出限为0.1 mg·kg-1，其余化合物的方法检出限为0.18 mg·kg-1；DINP定量限为9.0 mg·kg-1，DBP定量限为0.3 mg·kg-1，其余化合物定量限为0.5 mg·kg-1。

2.3 方法的回收率和精密度

在薏仁米空白样品中添加3个不同浓度水平的PAEs进行添加回收试验，每个添加水平重复5次，从而计算18种PAEs的平均添加回收率及相对标准偏差。由表3、表4可知，DMP等16种PAEs的平均添加回收率在85.6%～110.1%，RSD在1.7%～9.8%；DIBP平均添加回收率在102.7%～109.2%，RSD在2.7%～6.5%；DINP平均添加回收率在95.9%～102.5%，RSD在2.5%～6.3%；该分析方法准确性和精密度满足薏仁米中PAEs残留分析的要求。

2.4 薏仁米中PAEs残留检出情况

对采自贵州12个薏仁米产区的123个薏仁米样品中18种PAEs含量进行检测分析，结果表明，123个薏仁米样品均未检出18种PAEs。

2.5 薏仁米中PAEs膳食暴露风险分析

采用美国环保局公布的PAEs毒理学数据进行分析，由于123个薏仁米样品中18种PAEs均未检出，HI值小于1，表明薏仁米中PAEs健康风险在可接受范围内。

3 结论

通过对气相条件和质谱条件的优化，建立了薏仁米中18种PAEs的GC-MS/MS检测方法。优化条件后，18种PAEs得到了很好的分离，具有良好的线性关系，相关系数大于0.999，回收率在85.6%～110.1%，RSD均小于10%。采用该方法对123个薏仁米样品中PAEs含量进行了测定，并通过暴露风险评估食用当地种植的薏仁米对人体健康的风险。结果表明，123个薏仁米样品中18种PAEs均未检出，贵州省12个薏仁米产区生产的薏仁米均未受到PAEs污染，广大消费者可以安全、放心食用。

参考文献

[1]阿丹，温思达，陈敏玲，等.增塑剂在农业环境中的来源、迁移转化和生物修复研究综述[J].生态科学，2021，40（4）：249-256.

[2]国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局.食品安全国家标准 食品中邻苯二甲酸酯的测定：GB 5009.271—2016[S].北京：中国标准出版社，2016.

[3]DIANA A，DIMITRA V.Alkylphenols and phthalates in bottled waters[J].Journal of Hazardous Materials，2011，185（1）：281-286.

[4]曹国洲，肖道清，朱晓艳.食品接触制品中邻苯二甲酸酯类增塑剂的风险评估[J].食品科学，2010，31（5）：325-327.

[5]BENSON R.Hazard to the developing male reproductive system from cumulative exposure to phthalate esters—dibutyl phthalate， diisobutyl phthalate， butylbenzyl phthalate， diethylhexyl phthalate， dipentyl phthalate， and diisononyl phthalate[J].Regulatory Toxicology and Pharmacology，2009，53（2）：90-101.