孕早期超声NT联合母体APOC1、TPM4对胎儿心脏畸形的早期诊断价值分析

李国治 郑 红 郑 研 刘 惠 谈艳芳

四川省德阳市人民医院 1 超声科 2 检验科 618000

在所有新生儿中,胎儿患有心脏畸形的概率为1.9%～7.5%,是一种较为常见的先天性畸形,在胎儿孕早期筛查中已愈发受到临床研究者的重视,其发生机制以及产前诊断研究一直是临床研究的热点[1]。在产前发现胎儿心脏畸形并及时进行针对性的干预,能减轻胎儿心脏畸形的情况给原生家庭带来的巨大负担和对社会的不良影响。目前,超声心动图是检测胎儿心脏畸形的主要手段,可作为判断胎儿是否存在心脏畸形的金标准。胎儿超声颈项透明层厚度(NT)检查是指胎儿颈后部皮下组织内积液的厚度,皮下组织内积液越多,NT厚度值越高,可通过检查超声NT来判断胎儿染色体是否异常,胎儿染色体异常会增加胎儿畸形的概率,进而有利于判断胎儿的心脏畸形情况[2]。因此,近年来许多妊娠风险被报道与超声NT存在相关性,进一步掌握NT检查可增加对胎儿心脏畸形的筛查。经研究表明血清载脂蛋白C1(ApolipoproteinC-1,APOC1)是构成血浆载脂蛋白的主要蛋白,其高表达与胎儿心脏畸形发生有关[3]。原肌球蛋白4(Tropomyosin 4,TPM4)属肌节骨架蛋白,可调控肌球蛋白功能,影响胎儿心脏发育,是一种与胎儿心脏畸形相关的蛋白分子标志物,与孕妇胎儿心脏畸形相关[4]。本研究按照超声心动图的检测结果将患者分为两组,分析孕早期超声NT参数结合母体APOC1、TPM4蛋白检测在孕早期诊断胎儿心脏畸形的价值,具体分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2021年1月1日—2022年1月1日入我院生产的孕妇100例作为本次的观察对象,以超声心动图检测胎儿是否存在心脏畸形为标准分为对照组及观察组。对照组为无胎儿心脏畸形44例,孕妇年龄20～37岁,平均年龄(28.51±4.34)岁,孕周11～13周,平均孕周(11.62±0.54)周;观察组则为胎儿心脏畸形56例,孕妇年龄21～37岁,平均年龄(29.43±5.27)岁,孕周11～13周,平均孕周(11.63±0.53)周。两组孕妇一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),达到对比研究标准。

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准:(1)符合胎儿超声心动图[4]诊断标准。(2)单胎妊娠、自然受孕,可探查到胎心。(3)图像清晰,可进行胎儿心脏结构评估。(4)孕妇及家属入院时签署知情同意书。(5)可追踪妊娠结局,新生儿出生后可调阅病例资料或电话访问证实。

1.2.2 排除标准:(1)宫内死胎、妊娠晚期的。(2)孕妇患有心、肾、血液系统严重疾病或合并其他妊娠并发症的。

1.3 检查方法

1.3.1 超声:进行常规的产前检查、测量评估胎儿的生长发育情况并确定具体的怀孕周数,使孕妇呈仰卧位或侧卧位姿势,采用彩色多普勒超声诊断仪(MindrayResona 70B),进行超声NT检查,二维凸阵探头频率为2～5MHz,三维探头频率为4～8.5Hz。将英国胎儿医学基金会(FMF)的标准作为本次对胎儿NT厚度进行超声检查过程中的参照标准。具体步骤:(1)常规扫描,检查胎儿心脏、脑中线、颅骨光环等解剖结构是否存在异常,在确定标准的正中矢状切面后,在胎儿呈自然屈曲的状态下使探头垂直于胎儿的颈背部;(2)观察胎儿的头部与上胸部,并将图片放大,需保证图片的清晰度;(3)采用游标尺对胎儿的NT值进行测量,至少进行3次测量,确保测量的规范性,取其中最大值,精确到0.1mm;(4)如果胎儿出现脐带绕颈的情况,需避开脐带对其分段测量,取其平均值作为NT值,精确到0.1mm。在10min内完成上述的所有数据的准确测量和图像存储。根据超声NT的实际结果对产妇进行产前诊断,继续妊娠的孕妇应于17周左右到院复查,并于24周左右对胎儿进行四维超声检查,排查胎儿心脏畸形,并保证随访到妊娠结束,检查胎儿健康状况。

1.3.2 血清中APOC1、TPM4蛋白表达水平:使用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测,参加实验的孕妇于早起空腹采集血样进行APOC1、TPM4蛋白表达测定,离心(3 000r/min,10min,离心半径20cm),分离上清液。

1.4 观察指标 (1)不同时期胎儿NT值。观察两组孕妇孕不同时期11周、12周及13周时NT值的差异。(2)血清中检测APOC1、TPM4蛋白水平。观察两组孕妇外周血清中APOC1、TPM4蛋白表达水平,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测。(3)NT与APOC1、TPM4相关性分析。采用Pearson方法分为在两组孕妇中NT与APOC1、TPM4的相关性。

(4)ROC诊断。采用ROC分析NT与APOC1、TPM4对胎儿心脏畸形的诊断价值。

2 结果

2.1 两组孕妇不同时期胎儿的NT值比较 与对照组相比,观察组孕11周、12周及13周时期的胎儿的NT值均增加,差异具有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 两组孕妇不同时期胎儿超声NT值比较

2.2 两组孕妇APOC1、TPM4蛋白水平比较 与对照组相比,观察组APOC1水平增加,TPM4水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 两组孕妇APOC1、TPM4蛋白水平比较

2.3 NT水平与、APOC1、TPM4蛋白水平关系分析 NT与APOC1呈现正相关性(r=0.856,P<0.001),NT与TPM4呈现负相关性(r=-0.775,P<0.001)。见图1～2。

图1 NT水平与APOC1水平关系

图2 NT水平与TPM4水平关系

2.4 NT、APOC1、TPM4及三者联合的诊断价值 NT联合APOC1、TPM4诊断胎儿心脏畸形的诊断效能优于单项诊断。见表3和图3。

图3 NT、APOC1、TPM4及NT+APOC1+TPM4对诊断价值ROC曲线

表3 NT、APOC1、TPM4及NT+APOC1+TPM4对胎儿心脏畸形的诊断价值

3 讨论

胎儿心脏畸形是在所有胎儿畸形中比重最高,情况最为严重的一种。约占新生儿比重的1/3 125[5]。常常是由于胎儿父母的遗传基因或孕妇在孕前或孕期生活环境等因素的影响,致使胎儿心脏畸形,也就是在胎儿发育中出现心脏的生理功能和解剖结构异常。作为最常见的生理缺陷,胎儿心脏畸形有较高的死产及新生儿死亡率,即便存活,后续的治疗及康复费用也较高,对于一般家庭来说难以承担,因此,值得社会各界高度重视。胎儿心脏畸形的诊断与发生机制研究一直受到国内外学者普遍关注和重视,近年来,随着社会各界对产前检查的普及推广和孕产妇自身的产前检查意识的提高,以超声作为主要检查方式,在产前准确筛查出胎儿心脏畸形的概率有所提高,且超声的方式有着直观、重复性强且无创伤的优点。

根据研究结果,孕早期超声NT值越高越表明患有胎儿心脏畸形的概率越大[6]。本文结果显示,在进行所有孕妇超声NT检查后,存在胎儿心脏畸形的观察组中,11～13周各孕周的超声NT值都高于无胎儿心脏畸形的对照组中的超声NT值。据刘桂军[7]的研究显示,超声NT增厚的孕妇胎儿心脏畸形的发生概率明显高于NT正常的孕妇。由本文结果可知,NT值在早期胎儿心脏畸形诊断中的敏感性为80.50%,特异性为78.90%,NT增厚是心脏畸形的重要标记。临床表明,有些心脏功能失调以及头部和颈部静脉充血、贫血、低蛋白血症等症状可能与NT增厚有关,胎儿遗传性综合征、严重的心脏发育异常、多种结构异常以及神经发育迟缓等问题也由胎儿的NT增厚导致,更加验证NT增厚会致使胎儿心脏畸形的风险程度增高[8]。由此说明,超声NT可以为胎儿心脏畸形排查中提供客观可靠的数据,能够一定程度提高筛查的准确性。总体而言,孕早期胎儿NT在产前筛查胎儿心脏畸形中具有较高的应用价值,有普及推广意义。

现阶段,被公认为胎儿畸形产前诊断的理想方式是通过孕妇外周血筛查畸形相关标志物,使用蛋白质组学技术,且该技术在先兆子痫、非整倍体畸形的产前诊断中应用广泛,可用于进行诊断、治疗反应检测,靶向治疗和预后评估等生物标志物。在胎儿畸形产前诊断中使用蛋白质组学技术,通过对全蛋白表达水平在病理状态下的定性定量分析,检测出其中的蛋白质哪些与疾病病理及特征相关。陈骊珠等[9]研究显示,APOC1、TPM4蛋白表达水平在早期胎儿心脏畸形的诊断中敏感度和特异性较高。APOC1是血浆载脂蛋白的主要成分,其高表达与胎儿心脏畸形发生有关。TPM4属肌节骨架蛋白,具有调控肌球蛋白的功能,TPM4与心脏发育有着密切的相关性。APOC1、TPM4均为细胞骨架蛋白,本研究显示,心脏畸形的胎儿APOC1蛋白水平高,TPM4蛋白水平低,证明这些骨架蛋白可能在心脏发育过程中发挥着重要作用。

本文结果显示,孕早期超声NT与APOC1、TPM4蛋白表达线性相关,NT值与APOC1表达越高,胎儿心脏畸形的概率越高,TPM4蛋白表达越低,胎儿心脏畸形的概率越高。因此,本文中采用孕早期超声NT参数、APOC1、TPM4表达水平以及三者联合诊断胎儿心脏畸形,ROC曲线分析结果显示,三者联合诊断的胎儿心脏畸形的曲线下面积大于单独诊断,有助于提高胎儿心脏畸形早期检出水平。

综上所述,孕早期超声NT可预测胎儿心脏畸形,且母体APOC1、TPM4蛋白表达与胎儿心脏畸形有关,可作为孕早期筛查胎儿心脏畸形的指标。孕早期超声血NT参数联合母体APOC1、TPM4蛋白表达可大大提高孕妇胎儿心脏畸形的产前诊断价值,具有现实意义。