贵州八种林果木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长的影响

陈翠翠 巩玉辉 宋 雕 刘亚雯

（贵州金蟾大山生物科技有限责任公司，贵州毕节 553300）

红托竹荪Dictyophora rubrovolvata属竹荪属Dictyophora，是一种珍贵食用菌[1-2]，被称为“菌中皇后”[3]。红托竹荪是贵州特有的一种清香型竹荪[4]，其子实体洁白，具有裙伞，不仅外形优美且味道鲜美，营养丰富，含有大量的氨基酸、蛋白质、维生素和多糖等营养物质[5]，深受消费者青睐，而且也是目前国内外市场上价格比较高的一类食用真菌。红托竹荪全株由菌托、菌柄、菌盖构成[6]，菌托约占全株鲜重的25%～30%，含有多糖、氨基酸、蛋白质等营养成分[7-8]。红托竹荪不仅食用价值高，还具有极高的经济价值和潜在的药用价值[9]。

红托竹荪由于生长速度慢，因此，比其他食用菌更容易被杂菌侵染。林果木木屑浸出液含有多种营养物质，利用其浸出液培养食用菌，往往能促进其菌丝生长[10]。贵州省栽培红托竹荪已有30 多年的历史，同时也有较为丰富的林果木木屑资源。为此，试验在PDA 培养基中分别加入贵州地区比较容易获得的8 种林果木屑浸出液，考察其对红托竹荪菌丝生长的影响，以期能够找到比较适合红托竹荪菌丝生长的木屑，为红托竹荪的生产和栽培提供理论支持。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试木屑选择贵州省比较常见的林果木：樱桃木、核桃木、构树木、杜仲木、青冈木、桦槁木、白杨木，对照木屑选择金蟾大山生物科技有限责任公司发酵用的硬杂木屑。

供试菌株：红托竹荪菌株为金蟾大山生物科技有限责任公司自主驯化选育的14-33（图1）。

图1 供试红托竹荪菌株子实体（右）及PDA培养菌种（左）

1.2 试验方法

PDA 培养基：土豆200 g，葡萄糖20 g，琼脂粉18 g，水1 000 mL。将土豆切片注水后，加入葡萄糖和琼脂粉，待全部溶解后定容至1 000 mL备用。

将供试木屑于50 ℃烘箱中烘干至恒重，称取20.0 g，加入1 L 水煮沸20 min，用纱布过滤，浓缩滤液至100 mL 备用[11]。取8 mL、32 mL、54 mL 木屑浸出液加入PDA 培养基中，定容至200 mL，其体积分数分别为4%、16%、27%，空白组为0%。

用蠕动泵分装培养基，每个培养皿分装22 mL，每个木屑处理组9个平皿。装好培养基平皿用报纸包好后，于121 ℃灭菌30 min，待灭菌结束趁热置超净工作台，冷却后接种。用直径5 mm打孔器取供试菌株菌龄一致的菌丝块接种至培养皿中央，于22 ℃培养。分别在接种后的10 d、17 d、20 d、24 d 采用画线法测定菌落直径并计算菌丝生长速度。

菌丝平均生长速度(mm/d) =[（第2 次测量直径-第1次测量直径）（mm）÷2]÷菌丝生长天数（d）。

2 结果与分析

2.1 供试林果木屑浸出液pH

按照1.2 的试验方法获得林果木屑浸出液，用pH 测定剂、糖度计等检测浸出液的理化指标，结果详见表1。

表1 供试木屑浸出液理化指标

由表1、图2 可知，桦槁木、白杨木、硬杂木木屑浸出液无沉淀物或较少，颜色清澈，可以透光，而构树木、青冈木、杜仲木、樱桃木、核桃木木屑浸出液颜色深浅不一且沉淀物较多；不同种类木屑的浸出液pH 也有差异，青冈木、构树木、杜仲木木屑浸出液的糖度要高于其他木屑。

图2 供试木屑浸出液

2.2 供试木屑浸出液对红托竹荪菌丝长势的影响

含不同木屑浸出液培养基中红托竹荪菌丝生长状态见表2、图3。

表2 含有供试木屑浸出液培养基中红托竹荪菌丝生长状态

图3 各处理培养基上红托竹荪菌丝生长状态

培养10 d、24 d，测定各木屑浸出液处理组红托竹荪菌丝菌落直径（表4）。

由表3、图3 可知，培养基添加4%樱桃木木屑浸出液、4%白杨木木屑浸出液、16%白杨木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长没有促进作用，其他添加量有一定的促进作用。未添加木屑浸出液的菌丝均匀度较差，菌丝较稀疏，添加木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长具有不同程度的促进作用。由表3可知，菌丝培养24 d，供试木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长促进作用排序为桦槁木木屑＞杜仲木木屑＞青冈木木屑＞构树木木屑＞樱桃木木屑＞硬杂木木屑＞白杨木木屑＞核桃木木屑＞空白对照组。桦槁木木屑浸出液对红托竹荪生长具有明显促进作用，且随着添加量的上升，菌丝越浓密。杜仲木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长具有较好的促进作用，且随着添加量的上升，效果更明显。青冈木木屑浸出液添加量不可超过16%，否则对菌丝生长促进作用减弱，且菌落不规则，其最适宜添加量为4%。构树木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长有促进作用，菌丝浓密，生长均匀，均一性好，但菌丝生长速度稍慢。添加16%樱桃木木屑浸出液有明显促进作用，菌丝生长快，且比较均匀，添加量为4%的菌丝生长状态很差，生长慢，添加量超过16%，菌丝生长旺盛，但菌丝生长速度要比添加量16%时略慢。添加27%硬杂木（CK）木屑浸出液，菌丝生长状态较好，菌丝洁白浓密，添加量为4%、16%促进菌丝生长作用弱，菌丝一致性较差。添加4%、16%白杨木木屑浸出液，对菌丝生长促进作用较弱，菌丝较浓密，但其均匀性、一致性差，与硬杂木木屑浸出液差异不明显，添加27%白杨木木屑浸出液，比空白组菌丝生长稍快。添加核桃木木屑浸出液，菌丝培养前期（10 d）对菌丝生长促进作用较好，后期（24 d）促进作用减弱，菌丝生长仅比空白组稍快，但菌落致密洁白。

表3 各处理培养10 d、24 d红托竹荪菌落直径

2.3 供试林果木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长速度的影响

分别在红托竹荪菌丝培养10 d、20 d 时测定菌落直径，计算菌丝平均生长速度。

由表4 可知，红托竹荪菌丝培养前期（10 d）主要为红托竹荪菌丝适应培养基的过程，是其适应性生长的过程[12]，菌丝平均生长速度较慢，空白对照组为0.7 225 mm/d，添加4%樱桃木木屑浸出液菌丝生长速度为0.5 811 mm/d，慢于空白组，差异显著，表明其对红托竹荪菌丝生长没有促进作用；菌丝培养20 d，添加27%核桃木木屑浸出液菌丝平均长速最慢，为1.421 1 mm/d，与空白组（1.8 231 mm/d）差异显著。菌丝培养20 d，对菌丝生长有明显促进作用的分别为添加16%樱桃木木屑浸出液、16%桦槁木木屑浸出液、16%杜仲木木屑浸出液，菌丝平均生长速度均快于空白组，且差异显著，可见上述处理对红托竹荪菌丝生长具有明显促进作用。

表4 供试木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长速度的影响

由表4、图3 可知，添加构树木木屑浸出液菌丝培养10 d 内对其生长具有促进作用，与空白组差异显著，培养20 d 内，菌丝平均生长速度与空白组差异不显著，但菌落浓密、均匀。

3 小结与讨论

生产实践中发现经红托竹荪菌丝分解后的木屑会变得非常软，说明其对木质素的分解能力非常强。张晶等[13]研究表明，加入天然物质浸出液可以促进白腐真菌产酶，促进其菌丝生长，与笔者试验结果相符合。ROBBINS 等[14]研究表明，木材浸出液对羊肚菌菌丝生长的刺激作用明显。向世华[15]认为大多数食用菌如用其自然发生的基质浸出汁能促进其菌丝生长，说明基质浸出液中含多种营养物质或者生长调节物质，但是生长调节物质并不能被同化为真菌自身组成物，而只是参与一些代谢反应，这些刺激物质具有热稳定性，不易挥发，但这些物质对真菌生长、发育至关重要。

试验结果表明，贵州省桦槁木、青冈木、杜仲木、构树木木屑浸出液对红托竹荪菌丝生长具有比较好的促进作用，其适宜添加量分别为27%桦槁木木屑浸出液、4%青冈木木屑浸出液、27 杜仲木木屑浸出液%、27%构树木木屑浸出液。