妊娠合并慢性乙型肝炎患者乙肝标志物、前S1抗原与HBV-DNA的相关性*

赵薇, 刘小慧△, 于秀芳, 王新华, 李丹丹, 王丽丽

1解放军总医院第五医学中心妇产科(北京 100071) ; 2首都医科大学附属宣武医院妇产科(北京 100053)

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引发的一种传染性疾病,我国是乙肝的高发国家,乙肝病毒感染者或携带者占8%～15%[1]。妊娠合并慢性乙肝在临床上较为常见,该类患者肝脏负担较重,重型肝炎、肝性脑病、感染、肝肾综合征等发生率较正常妊娠女性更高,病情发生、发展对分娩和母婴垂直传播也有直接影响,因此病情的定期监测和评估极为重要。HBV-DNA检测是评估HBV复制和传染性的金标准[2],但检测设备和操作方法的研究使其难以在基层医院开展,因此,血清标志物检测为仍为评估乙肝患者传染性和病程的主要手段和依据。近年来,有研究发现Pre-S1可在一定程度上反映HBV的复制状况和传染性,其对乙肝的诊断价值日益受到关注[3-4]。但目前关于乙肝五项、Pre-S1及HBV-DNA之间的关系尚未明确。本次研究对妊娠合并慢性乙型肝炎患者乙肝标志物(乙肝五项、乙肝前S1抗原)与HBV-DNA载量的相关性进行了研究,以期为妊娠合并慢性乙肝患者诊断提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2015年3月1号至2018年5月30号我科室收治的120例妊娠合并慢性乙型肝炎患者作为研究对象,年龄22～42岁,平均(25.7±6.2)岁,孕周27～39周,平均(32.1±4.6)周,HBV感染时间1～11年,平均(5.2±2.5)年。纳入标准:(1)患者均签署我院伦理委员会编写的知情同意书;(2)诊断依据《慢性乙型肝炎诊治指南》(2005)相关诊断标准。排除标准:(1)合并严重心肺功能障碍者;(2)合并恶性肿瘤者;(3)合并免疫系统、血液系统严重疾病者;(4)HBV外因素引起的肝功能异常和急慢性感染疾病者。

研究经解放军总医院第五医学中心医学伦理委员会审查通过。

1.2 研究方法

1.2.1 仪器与试剂 HBV-DNA检测采用7500型实时荧光定量聚合酶链反应扩增仪(美国ABI公司),乙型肝炎病毒核算定量检测试剂盒由上海克隆生物高技术有限公司提供;乙肝五项和Pre-S1检测采用全自动酶免分析仪及配套洗板机(北京普朗新技术公司),对应试剂盒由上海科华生物有限公司提供。

1.2.2 检测方法 详细记录基本信息和相关病史,于清晨抽取肘正中空腹静脉血5 mL,静置30 min后3 000 r/min离心10 min,于-30℃储存,行酶联免疫吸附法和定量法检测乙肝五项及Pre-S1采用荧光定量PCR检测HBV-DNA。操作严格按照说明书进行,所有设备和仪器均在正常状况内,试剂保证在有效期内。

1.3 评价标准 (1)乙肝五项:HBsAg>0.5 ng/mL、HBeAg>0.03NCU/mL、HBsAb>10 MIU/mL、HBeAb>0.14 NCU/mL判定为阳性;(2)HBV-DNA>40 IU/ML判断为阳性(3)Pre-S1:Pre-S1检测S/OD>1.0判定为阳性。

1.4 统计学方法 用SPSS 13.0统计软件进行分析,计量资料以均数±标准差表示,对正态分布数据行两两LSD-t检验。计数资料转换为率,行2检验,相关性分析采用Pearson相关性分析,显著性水平α=0.05。

2 结果

2.1 HBV-M不同模式下Pre-S1与HBV-DNA检测结果比较 HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性模式下(大三阳)HBV-DNA阳性率为80.49%,Pre-S1阳性率为75.61%,组间差异无统计学意义(P>0.05);HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性模式下(小三阳)HBV-DNA阳性率为42.50%,Pre-S1阳性率为35.00%,组间差异无统计学意义(P>0.05);在其他5种模式下,HBV-DNA阳性率和Pre-S1阳性率差异均无统计学意义(P>0.05),详见表1。

表1 HBV-M不同模式下Pre-S1与HBV-DNA检测结果比较 例(%)

2.2 Pre-S1与乙肝标志物相关性 120例患者中,HBsAg阳性组中Pre-S1阳性率为56.41%,HBsAg阴性组中Pre-S1阳性率为33.33%;差异有统计学意义(P<0.05);HBsAb阳性组中Pre-S1阳性率为33.33%,HBsAb阴性组中Pre-S1阳性率为43.59%;差异有统计学意义(P<0.05);HBeAg阳性组中Pre-S1阳性率为75.00%,HBeAg阴性组中Pre-S1阳性率为39.06%;差异有统计学意义(P<0.05);HBeAb阳性组中Pre-S1阳性率为34.88%,HBeAb阴性组中Pre-S1阳性率为67.53%;差异有统计学意义(P<0.05);HBcAb阳性组中Pre-S1阳性率为52.88%,HBcAb阴性组中Pre-S1阳性率为75.00%;差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 Pre-S1与乙肝标志物相关性分析 例(%)

2.3 HBsAg阳性模式中Pre-S1与HBV-DNA相关性 117例HBsAg阳性中,HBV-DNA阳性组中Pre-S1阳性率为92.13%,HBV-DNA阴性组中Pre-S1阳性率为82.14%,差异有统计学意义。详见表3。

表3 HBsAg阳性血清标本中Pre-S1与HBV-DNA相关性 例(%)

2.4 乙肝五项定量、Pre-S1与HBV-DNA的Pearson相关性 经过Pearson相关性分析,HBeAg与Pre-S1呈显著正相关关系(r=0.408,P=0.022);HBcAb与Pre-S1相关关系不显著(r=-0.237,P=0.120);HBeAb与Pre-S1呈显著负相关关系(r=-0.507,P=0.014);HBsAg与Pre-S1呈显著正相关关系(r=0.582,P=0.011)。HBV-DNA与Pre-S1呈显著正相关关系(r=0.561,P=0.013)。

3 讨论

我国妊娠合并慢性乙型肝炎的发病率约为0.2‰～18‰[5]。慢性乙肝和妊娠互为不良影响因素,孕期妇女新陈代谢增长、雌激素水平增高,营养消耗快,此时肝脏负担加重,因此较易感染病毒性肝炎并转变为慢性肝炎[6]。慢性乙肝的患病可加重孕妇妊娠反应、甚至导致母婴不良结果,如死胎、流产、新生儿垂直感染等[7]。因此,如何提高妊娠合并慢性乙肝的诊断准确性及合理预测乙肝病情发生发展状况,对于减少母婴垂直传播、改善母婴结局是医学界亟待解决的重要问题。

HBV-DNA是HBV复制的金标准,但其检测具有一定设备要求,因此HBV-DNA尚未作为常规检测方法。HBV的衣壳蛋白主要为S蛋白和前S蛋白,前S1抗原在HBV侵入肝细胞的过程中发挥了关键作用[8],并在HBV复制时大量表达,因此可作为HBV复制的标志之一,而从本次研究结果来看,Pre-S1与HBV-DNA具有显著正相关关系,但Pre-S1在各乙肝血清标志物模式中阳性率均低于HBV-DNA阳性检出率,因此单独依靠Pre-S1判断病情可能存在一定偏差,仅可作为乙肝病毒复制和传染性的参考依据之一。

乙肝五项检测是临床上乙肝传染性最常规的检测指标,具有灵敏性高、成本相对较低等优点[9],但是该检测方法的固有缺陷和HBV的变异性使得其检测具有一定的误差,本研究120例患者中乙肝血清标志物模式共有7种,其中HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性模式(大三阳)和HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性模式(小三阳)最为常见。根据相关性分析,HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性模式和HBsAg、HBeAg阳性模式具有最高的Pre-S1和HBV-DNA阳性检出率,且经过Pearson相关性分析,HBeAg和HBsAg与Pre-S1均呈显著正相关关系。提示HBeAg和HBsAg阳性能够很好地反映HBV的复制情况,且具有较好的一致性。与杨菲菲等[10]研究基本相符,杨菲菲等研究发现,HBsAg阳性患者中HBV-DNA和Pre-S1阳性率分别为75.82%和74.65%。

临床实践中,HBeAg和HBeAb常作为乙肝病毒复制和活跃性的指标,HBeAg检测阳性代表其传染性越强,而HBeAb出现则通常判定为HBV复制和传染性降低[11],与本次研究基本一致,HBeAb与Pre-S1呈显著负相关关系。但是值得注意的是,本次研究中,在HBeAg阴性的乙肝血清标志物4种模式中,Pre-S1阳性率为39.06%,HBV-DNA阳性率为46.88%,表明了在HBeAg检出阴性的情况下HBV依然可能存在较强的复制情况,可能和检测方法局限性、感染窗口期及病毒S区变异等因素有关[12],提示需尽量避免仅依靠HBeAg来判断HBC复制性。研究指出对慢性乙型肝炎患者和急性乙型肝炎患者进行血清Pre-S1蛋白检测发现,Pre-S1蛋白能够敏感地反映乙型肝炎病毒复制情况,急性乙型肝炎患者Pre-S1蛋白先于HBV-DNA转阴,Pre-S1蛋白可用于急性乙型肝炎的诊断治疗和预后判断。本次研究结果显示,HBcAb与Pre-S1为负相关关系,但是相关性不显著,而Brown等[13]研究显示HBcAb与HBV-DNA为显著负相关关系,可能的原因是样本量限制,因此有待进一步研究检验。

综上所述,乙肝五项检测指标能较好地反映机体的免疫状态,但是无法确切反映HBV病毒复制情况,因此需结合HBV-DNA定量检测。但HBV-DNA由于价格相对较贵、器械要求较高因此尚未普及,而Pre-S1检测与HBV-DNA检测一致性好,既可以较好地反映HBV复制情况,又能弥补因病毒变异、感染窗口期等原因造成的乙肝五项检测误诊和漏诊,可以较全面地反映患者的病情。

利益相关声明:本研究所有作者均无利益冲突。

作者贡献说明:赵薇负责搜集数据,撰写论文;刘小慧负责统计学数据分析;于秀芳,王新华负责统计数据,搜集数据;李丹丹,王立丽负责文献和其他支持。