钾电压门控通道亚家族C成员3在胃癌组织中的表达及其与腹腔镜胃癌根治术患者预后的关系△

王世成，余进松，李忠

1南阳市第一人民医院西区医院普外科，河南 南阳 473000

2南阳市第一人民医院普外科，河南 南阳 473000

胃癌是常见的、高发病率、高病死率的消化系统恶性肿瘤，起源于胃黏膜上皮，具有早期诊断难、晚期治疗难的特征[1-2]。有研究称，胃癌患者的预后与淋巴结转移情况、TNM 分期、病理类型、肿瘤浸润深度等有关[3-4]，但是无法在疾病早期轻松获取此类信息，因此需要寻找对肿瘤患者预后进行准确评估的新型生物标志物。钾电压门控通道亚 家 族C 成 员3（potassium voltage-gated channel subfamily C member 3，KCNC3）属于通道蛋白的延迟整流子类别，也是介导可刺激膜的电压依赖性钾离子渗透性的完整膜蛋白，目前关于其在肿瘤中作用的研究报道较少[5-7]。本研究检测KCNC3 在腹腔镜胃癌根治术患者胃癌组织中的表达，并分析其与胃癌患者临床特征及预后的关系，为胃癌患者预后的预测提供依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2018年2月至2019年6月南阳市第一人民医院西区医院、南阳市第一人民医院收治的行腹腔镜根治术的胃癌患者的病历资料。纳入标准：①符合《胃癌规范化诊疗指南（试行）》[8]中关于胃癌的诊断标准，且经胃镜以及组织病理学检查确诊为胃癌；②接受腹腔镜胃癌根治术。排除标准：①精神疾病；②合并其他恶性肿瘤；③合并其他器官严重病变；④临床及随访资料不完整。根据纳入、排除标准，共纳入60 例胃癌患者，其中，男性36 例，女性24 例；年龄21～75 岁，平均（53.38±8.23）岁。本研究经医院伦理委员会批准通过，所有患者均知情同意。

1.2 免疫组织化学法检测KCNC3 水平

取胃癌组织，用4%多聚甲醛固定、脱水、包埋成石蜡标本，切成约4 μm 的切片，经常规烤片、脱蜡、水化，微波炉抗原修复15 min，山羊血清白蛋白孵育30 min。分别滴加KCNC3 一抗，4 ℃孵育过夜，次日孵育二抗，二氨基联苯胺（diaminobenzidine，DAB）显色，苏木精复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树脂封片。结果判断标准：①以切片中细胞染色强度进行评分，细胞无着色为0 分，浅黄色为1 分，棕黄色为2 分，棕褐色为3 分；②以阳性细胞百分比进行评分，无阳性细胞为0 分，阳性细胞百分比﹤10%为1 分，10%～50%为2 分，﹥50%为3 分。两项评分的乘积为最终得分，总分≥3 分为阳性，﹤3 分为阴性。

1.3 随访

收集患者年龄、性别、分化程度、肿瘤最大直径等临床资料。采用电话、门诊及住院复查等方式随访2年，随访间隔3 个月，了解患者生存情况。随访时间截至2021年6月，根据随访结果将患者分为死亡组（n=23）和生存组（n=37）。

1.4 统计学分析

采用SPSS 21.0 统计软件进行数据分析，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用χ2检验；多因素分析采用Logistic 回归模型；以P﹤0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同临床特征胃癌患者的胃癌组织中KCNC3表达情况的比较

不同年龄、性别、肿瘤最大直径、分化程度胃癌患者的胃癌组织中KCNC3 表达情况比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）；肿瘤分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结远处转移的胃癌患者的胃癌组织中KCNC3 阳性表达率分别明显高于肿瘤分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结远处转移的胃癌患者，差异均有统计学意义（P﹤0.01）。（表1）

表1 不同临床特征胃癌患者的胃癌组织中KCNC3 表达情况的比较

2.2 腹腔镜胃癌根治术患者预后影响因素的单因素分析

单因素分析结果显示，分化程度、淋巴结远处转移情况、KCNC3 表达均可能是腹腔镜胃癌根治术患者预后的影响因素（P﹤0.01）。（表2）

表2 腹腔镜胃癌根治术患者预后影响因素的单因素分析

2.3 腹腔镜胃癌根治术患者预后影响因素的多因素分析

将腹腔镜胃癌根治术患者是否死亡作为因变量，分化程度、淋巴结远处转移情况和KCNC3 表达情况作为自变量进行多因素分析，结果显示，分化程度为低分化、有淋巴结远处转移、KCNC3 表达阳性均是腹腔镜胃癌根治术患者预后的独立危险因素（P﹤0.01）。（表3）

表3 腹腔镜胃癌根治术患者预后影响因素的多因素分析

3 讨论

胃癌是常见的消化系统恶性肿瘤，发病率与病死率分别居全球第5 位与第3 位[9]。中国胃癌发病率与病死率仅次于肺癌，居第2位，是造成严重社会负担的重要因素，多数患者因中晚期胃癌就诊[10-11]。胃癌主要类型为胃腺癌，是指源于胃黏膜上皮细胞的恶性肿瘤[12]。早期胃癌无明显症状，患者会随着病情进展逐渐出现消化不良等胃部不适症状[13]。晚期胃癌主要表现为疼痛、呕吐，甚至呕血、黑便，也可能会出现腹部肿块、上腹压痛、脾肿大和黄疸，以及远处淋巴结转移、盆腔转移等体征，患者具有临床治疗效果差、生存期短、易复发、易转移的特点[14-16]。腹腔镜胃癌根治术相比传统开腹手术，具有创伤小、术后恢复快等优势[17]。尽管近年来晚期胃癌手术及放化疗方案不断发展，但是患者5年生存率仍然较低[18]。因此针对胃癌寻找新的预后预测指标是目前临床研究亟待解决的问题。

KCNC3 最直接的下游信号通路可能是电压门控钾离子通道，该通道的开合受控于细胞膜内外的电位改变，在多种恶性肿瘤细胞中有不同程度的失调，例如在头颈部癌、乳腺癌、肠癌中表达异常，且与患者临床特征和肿瘤细胞生物学行为有关[19-20]。基因集富集分析（gene set enrichment analysis，GSEA）显示，KCNC3 可能通过多个信号通路促进肿瘤发生发展，包括Notch 信号通路、氧化磷酸化通路、γ氨基丁酸转运或电子运输链通路，不同程度地促进淋巴结转移[21-22]。同时，KCNC3 参与细胞增殖，影响细胞周期变化、细胞凋亡和肿瘤进展，可作为肿瘤诊疗的标志物以及肿瘤增殖和转移的潜在靶标[23-24]。本研究中，胃癌组织中KCNC3的表达与肿瘤分期、淋巴结远处转移情况有关，提示KCNC3 与胃癌临床特征有关，参与胃癌的发生发展进程。本研究结果显示，分化程度为低分化、有淋巴结远处转移、KCNC3 阳性表达均是腹腔镜胃癌根治术患者预后的独立危险因素，提示KCNC3 可作为预测腹腔镜胃癌根治术患者预后的生物标志物。

综上所述，胃癌组织中KCNC3 表达与临床特征有关，KCNC3 表达可作为预测腹腔镜胃癌根治术患者预后的生物标志物。但本研究纳入的样本量较小，未进行深入研究，KCNC3 是否能成为胃癌预后的生物标志物，还需要在今后的研究中扩大样本量以及研究范围，完善研究结果，确保其准确性，为新的肿瘤标志物应用于临床提供参考依据。