血清α-L-岩藻糖苷酶、单胺氧化酶、5-核苷酸酶联合检测对原发性肝癌的诊断价值

赵鹏，王龙龙，林小平，孙艺娟，党浩男

商洛市中心医院医学检验科，陕西 商洛 726000

原发性肝癌是指起源于肝细胞和肝内胆管细胞的恶性肿瘤，临床将其分为肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌和混合性肝癌[1]。原发性肝癌的发生主要与饮酒、病毒性肝炎、食用霉变食物以及遗传因素有关，具有较高的侵袭性，病死率仅次于胃癌和肺癌，具有病情进展快、预后差、恶性程度高等特点[2]。原发性肝癌的潜伏期较长，临床确诊时多数患者已处于中晚期，因此需尽早作出明确诊断，以改善患者预后。目前甲胎蛋白是临床常用于诊断原发性肝癌的肿瘤标志物，85%以上的肝细胞肝癌中可发现甲胎蛋白升高，而肝内胆管细胞癌早期甲胎蛋白水平正常，因此其诊断及筛查价值并不高[3]。α-L-岩藻糖苷酶（α-L-fucosidase，AFU）是一种溶酶体酸性水解酶，是原发性肝癌的标志物[4]。单胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）的活性改变与原发性肝癌细胞增殖、浸润有关。5-核苷酸酶（5-nucleotidase，5-NT）是新发现的肝癌标志物，其水平升高主要见于肝胆系统疾病[5]。但目前临床上缺乏以上指标联合检测诊断原发性肝癌的报道。本研究探讨血清AFU、MAO、5-NT 联合检测对原发性肝癌的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年5月至2021年5月商洛市中心医院收治的原发性肝癌患者。纳入标准：①符合《原发性肝癌规范化病理诊断指南（2015年版）》[6]中原发性肝癌的诊断标准；②经病理检查确诊为原发性肝癌；③无淋巴结或肝外转移，无大血管侵犯；④临床资料完整；⑤语言表达能力、智力、听力均正常。排除标准：①凝血功能异常；②合并梗阻性黄疸；③妊娠期、哺乳期女性；④合并活动性肝病；⑤合并严重心、脑、肾等脏器功能不全；⑥合并严重感染。依据纳入和排除标准，本研究共纳入150例原发性肝癌患者，作为原发性肝癌组。另选取同期商洛市中心医院收治的150 例良性肝病患者和150 例健康体检者，分别作为良性肝病组和对照组。原发性肝癌组中，男90 例，女60 例；年龄28～75 岁，平均（48.22±4.12）岁；体重指数16～26 kg/m2，平均（22.35±2.25）kg/m2；肿瘤直径2～8 cm，平均（4.01±1.43）cm。良性肝病组中，男85 例，女65 例；年龄30～74 岁，平均（48.12±4.10）岁；体重指数17～25 kg/m2，平均（22.28±2.22）kg/m2；肝硬化95 例，慢性乙型肝炎55 例。对照组中，男82 例，女68 例；年龄28～75 岁，平均（48.25±4.14）岁；体重指数17～26 kg/m2，平均（22.31±2.21）kg/m2。3 组研究对象的性别、年龄、体重指数比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会审批通过，所有患者均知情同意。

1.2 检测方法

采集所有研究对象的空腹静脉血5 ml，3000 r/min离心5 min，离心半径为5 cm，分离血清，将上清液保存于-80 ℃低温环境中备用。采用贝克曼库尔特AU5800 全自动生化分析仪检测血清AFU、MAO、5-NT 水平。阳性标准：AFU﹥25.63 U/ml，MAO﹥8.12 U/L，5-NT﹥5.87 U/L。

1.3 观察指标和评价标准

比较3 组研究对象血清AFU、MAO、5-NT 水平。分析血清AFU、MAO、5-NT 单独及联合检测对原发性肝癌的诊断价值。联合检测时3 项指标中任2 项为阳性即判断为阳性。灵敏度=真阳性例数/（真阳性+假阴性）例数×100%，特异度=真阴性例数/（真阴性+假阳性）例数×100%，准确度=（真阳性+真阴性）例数/总例数×100%，阴性预测值=真阴性例数/（真阴性+假阴性）例数×100%，阳性预测值=真阳性例数/（真阳性+假阳性）例数×100%。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（）表示，多组间比较采用方差分析，多组间两两比较采用LSD-t检验，两组比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P﹤0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清AFU、MAO、5-NT 水平的比较

原发性肝癌组患者的血清AFU、MAO、5-NT水平均高于良性肝病组和对照组，良性肝病组患者的血清AFU、MAO、5-NT 水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P﹤0.05）。（表1）

表1 3组研究对象血清AFU、MAO、5-NT水平的比较（）

表1 3组研究对象血清AFU、MAO、5-NT水平的比较（）

注：a与对照组比较，P<0.05；b与良性肝病组比较，P<0.05

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2.2 血清AFU、MAO、5-NT 单独及联合检测对原发性肝癌的诊断价值

血清AFU、MAO、5-NT 联合检测诊断原发性肝癌的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值均高于各指标单独检测。（表2）

表2 血清AFU、MAO、5-NT 单独及联合检测对原发性肝癌的诊断价值

3 讨论

原发性肝癌的病因尚不清楚，可能是多因素协同作用的结果，流行病学调查显示，原发性肝癌的发生多与肝硬化、病毒性肝炎、酒精性肝病、家族史及遗传因素等有关[7]。原发性肝癌起病隐匿，早期症状不明显，临床对其筛查的重视程度不高，患者出现典型的临床症状和体征时一般已处于中晚期，错过了最佳的治疗时机[8]。对肝癌高危人群进行筛查，有助于肝癌的早发现、早诊断、早治疗，是提高肝癌治疗效果的关键。因此，非介入性、操作简便且重复性高的检查方法备受临床关注。如何在早期诊断原发性肝癌是临床医师和检验科医师面临的巨大挑战[9]。近年来的相关研究显示，多种血液生物标志物对恶性肿瘤的预测价值较高[10]。

AFU、MAO、5-NT 等血清学指标对原发性肝癌的诊断具有重要意义。AFU 是一种催化含岩藻糖基的生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶，广泛存在于人体组织细胞、血液及体液中，在肝肾组织中的表达水平较高，参与体内糖蛋白、糖脂及寡糖的代谢[11-12]。MAO 广泛分布于肝肾等器官的结缔组织和线粒体内，参与胶原成熟最后阶段的架桥形成，纤维形成后，其浓度会显著升高，人体肝细胞受损后会出现肝内慢性炎症刺激，增加胶原合成，MAO 水平与肝纤维化程度呈正相关[13]。5-NT 是一种对底物特异性不高的水解酶，广泛存在于肝、胆、脑、心等脏器的组织中，其活性升高主要见于影响胆汁分泌的肝胆疾病中，一般可升高至正常水平的2～6 倍。临床上若患者的碱性磷酸酶和5-NT 同时升高，需进一步检查肝功能，必要时检测肿瘤标志物水平，分析是否有肝脏原发性肿瘤[14-15]。本研究结果显示，原发性肝癌组患者的血清AFU、MAO、5-NT 水平均高于良性肝病组和对照组，良性肝病组患者的血清AFU、MAO、5-NT 水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P﹤0.05）；血清AFU、MAO、5-NT 联合检测诊断原发性肝癌的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值均高于各指标单独检测。表明原发性肝癌患者的血清AFU、MAO、5-NT 水平均较高，上述指标联合检测可为原发性肝癌的诊断提供可靠依据。研究表明，肝细胞出现癌变时，酶的合成增加，AFU大量释放入血，进而导致血清AFU 水平升高[16]。本研究中，良性肝病组和原发性肺癌组患者的血清AFU 水平出现不同程度的升高，后者的血清AFU 水平升高更明显，提示血清AFU 水平能较好地反映肝脏损伤程度和肝脏疾病进展程度。但血清AFU 检测结果容易与其他肝脏疾病重叠，因此单独检测血清AFU 水平诊断原发性肝癌的价值不高[17]。临床诊断指标需满足高灵敏度、高特异度的条件，但临床实践中的多数诊断指标灵敏度和特异度较低，因此需联合多项指标进行诊断[18]。原发性肝癌发生后会损伤肝细胞，破坏线粒体，导致MAO 释放入血，增加MAO 的活性，进而导致血清MAO 水平升高[19]。有研究发现，原发性肝癌患者的肝脏损伤显著，会破坏肝细胞内质网膜结构，使线粒体出现退变，明显增加5-NT 水平[20]。定期检测血清5-NT 水平有利于监测病情、评估治疗效果及预后。然而本研究仍存在以下不足：①样本量较小；②样本来自单中心；③纳入的研究时间间隔较短，未进行多时间段的研究。因此，需要后续学者进行多中心、大样本及较长时间跨度或多时间段的进一步深入研究。

综上所述，原发性肝癌患者的血清AFU、MAO、5-NT 水平均较高，上述指标联合检测可为原发性肝癌的诊断提供依据。