冠心病合并2型糖尿病患者血清中miR-92a、HbA1c及内皮抑素水平评估预后的临床意义
2023-05-05杜银苹董国华李菲耿猛
杜银苹，董国华，李菲，耿猛
徐州市第一人民医院全科医学科，江苏徐州 221000
冠心病（coronary heart disease, CHD）在临床具有较高的发病率，且近年该病的患病率不断上涨[1-2]。糖尿病是一种发生率较高的代谢性疾病，以高血糖为主要特征，持续发展会引起血管内皮功能损伤，累及肾、心脏等多个器官[3-4]。2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM）为糖尿病的常见类型，约占据90%以上，也是引发心血管疾病的高危因素，故CHD合并T2DM发生率较高[5-6]。CHD与T2DM两种疾病相互影响，形成恶性循环，继而加剧患者病情，对生命安全造成众多威胁。因此，于早期及时诊断CHD合并T2DM，并指导临床制定科学规范化的治疗措施，对于保障患者身心健康意义重大。随着临床对分子生物标志物研究的不断深入，发现CHD合并T2DM疾病的发生、发展与分子生物标志物联系紧密。基于此，本研究以2020年5月—2021年5月徐州市第一人民医院收治的84例CHD合并T2DM患者为研究对象，分析微小RNA-92a（Micro RNA-92a, miR-92a）、糖化血红蛋白（gly⁃cated hemoglobin, HbA1c）与内皮抑素（endostatin,ES）在此类患者中的表达水平，探讨三项指标与患者预后之间的联系。现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
将本院收治的84例CHD合并T2DM患者纳入观察组，本院同期收治的65例单纯CHD患者纳入单纯CHD组，同期于本院行体检的70名健康体检者设为对照组。对照组中男39名，女31名；年龄43~76岁，平均（60.89±7.17）岁。单纯CHD组中男33例，女32例；年龄39~78岁，平均（59.95±7.78）岁。观察组中男44例，女40例；年龄43~77岁，平均（61.46±6.51）岁。3组一般资料对比，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。研究经医学伦理委员会批准。同时，随访1年，观察起点为出院日，终点为心血管不良事件发生，主要为全因死亡、靶病变血运重建、复发心绞痛等，把出现上述事件的观察组患者纳入预后不良组，反之为预后良好组。
1.2 纳入与排除标准
纳入标准：CHD经冠脉造影检查证实病情；T2DM临床诊断符合《中国2型糖尿病防治指南（2020年版）》[7]中有关标准；所有研究对象纳入均遵照自愿原则，依从性较高，签署知情同意书；对照组均身体健康，无重大疾病。排除标准：存在精神疾病、认知、视听或语言沟通障碍，难以配合研究者；合并严重肝肾功能不全者；为过敏体质者；合并血液系统疾病者；存在酒精、药物依赖史者；合并免疫系统与凝血功能紊乱者。
1.3 方法
标本采集：所有研究对象于入组后第2天清晨，采集其5 mL静脉血于无菌试管内，以3 000 r/min的速率离心10 min，获取上层清液后，于-80℃环境下留存待检。检测方法：①miR-92a采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（real-time fluorescence gnan⁃titative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测，首先运用Trizol法提取血清样品内总RNA，经反转录获得cDNA；之后对miR-92a予以扩增，反应体系共20 μL，反应条件为95℃预变性90 s，95℃变性30 s，62℃退火延伸30 s，72℃延伸15 s，共进行40个循环，最后以2-ΔΔCt法计算血清miR-92a相对表达量。②HbA1c、ES：两项指标均采用酶联免疫吸附法检测。
1.4 观察指标
①3组miR-92a、HbA1c与ES表达对比。②预后良好组与预后不良组miR-92a、HbA1c、ES对比：随访1年，对比两组miR-92a、HbA1c、ES表达水平。③miR-92a、HbA1c、ES单独与联合预测CHD合并T2DM预后的效能：绘制受试者工作曲线（receiver operating characteristic, ROC），分析3项指标单独或联合在预测患者预后中的临床价值。
1.5 统计方法
采用SPSS 20.0统计学软件处理数据，计量资料符合正态分布，以(±s)表示，组间差异比较采用t检验，多组间比较以F检验；绘制ROC，以曲线下面积（AUC）评价：AUC≤0.5表明无预测价值；0.5
2 结果
2.1 3组人群miR-92a、HbA1c、ES表达对比
观察组 miR-92a、HbA1c、ES高于单纯 CHD 组与对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。
表1 3组人群miR-92a、HbA1c、ES表达对比(±s)
表1 3组人群miR-92a、HbA1c、ES表达对比(±s)
组别对照组（n=70）单纯CHD组（n=65）观察组（n=84）F值P值miR-92a 0.84±0.13 1.23±0.26 1.89±0.45 211.262<0.001 HbA1c（%）4.29±0.78 5.35±1.01 11.78±2.12 575.725<0.001 ES（ng/mL）25.48±2.25 30.36±3.37 44.59±4.35 626.294<0.001
2.2 预后良好组与预后不良组患者miR-92a、HbA1c、ES对比
预后不良组的miR-92a、HbA1c、ES高于预后良好组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。
表2 预后良好组与预后不良组患者miR-92a、HbA1c、ES对比(±s)
表2 预后良好组与预后不良组患者miR-92a、HbA1c、ES对比(±s)
组别预后良好组（n=58）预后不良组（n=26）t值P值miR-92a 1.45±0.36 1.95±0.51 5.147<0.001 HbA1c（%）9.87±1.28 13.75±3.03 8.284<0.001 ES（ng/mL）40.26±4.62 45.63±5.17 4.746<0.001
2.3 miR-92a、HbA1c、ES单独与联合预测CHD合并T2DM预后的效能比较
ROC结果显示miR-92a、HbA1c、ES联合预测患者预后的AUC高于3项指标单独检测。见表3、图1。
表3 miR-92a、HbA1c、ES单独与联合预测CHD合并T2DM预后的效能比较
图1 miR-92a、HbA1c、ES单独与联合预测CHD合并T2DM预后的ROC曲线图
3 讨论
T2DM属临床常见的慢性代谢类病症，是引发心血管疾病的重要危险因素之一，可通过脂肪毒性、炎症介质等通路对机体的心血管功能构成损伤[8-9]。CHD为T2DM的常见并发症之一，伴随人们生活压力的上涨及饮食习惯的转变，使得我国CHD合并T2DM患者数量持续增加[10-11]。CHD合并T2DM患者病情更为复杂，两种疾病相互影响，并增加病死率[12]。近些由于临床医学技术的持续发展，使得CHD合并T2DM的治疗手段取得长足进步，而探寻与CHD合并T2DM患者有关的分子生物标志物，明晰患者的病情与预后，对于指导临床采取针对性治疗至关重要。
miRNA是一类进化保守的短序列小RNA，存在多种生物学功能[13]。miR-92a是一类可以参与血管生成、细胞增殖分化等生理过程的非编码单链RNA分子，在促进血管生长与损伤组织功能恢复方面具有一定的调节作用，在冠心病等心血管病症的发生发展中亦至关重要。HbA1c为葡萄糖与血红蛋白游离氨基之间产生的非酶促-糖化反应的产物，其水平变化不受血糖浓度影响，且在血液内浓度较为稳定，可反映过去8~12周机体平均血糖值[14-15]。CHD合并T2DM患者心脏细胞的变化主要是患者代谢能力的反映，而T2DM患者葡萄糖摄取、氧化能力降低，继而影响心肌收缩功能，造成心脏能量的利用效能下降[16]。同时，葡萄糖吸收水平的降低会加剧心肌缺血表现，对心肌缺血恢复进程造成一定影响，进一步加剧脂质代谢紊乱情况，可见HbA1c在CHD合并T2DM患者表达水平相对较高。ES为机体内部生成的一种强效血管生成抑制剂，为血管壁弹力纤维的重要组成，会阻碍内皮细胞的迁移，诱导内皮细胞凋亡，在内皮细胞的粘附中发挥重要作用。ES与CHD关系密切，且作用复杂，CHD合并T2DM患者的冠脉钙化、狭窄程度较为严重，故血清ES表达水平亦较高[17]。本研究结果显示，观察组miR-92a（1.89±0.45）、HbA1c、ES高于单纯 CHD 组（1.23±0.26）与对照组（0.84±0.13）（P<0.05），表明在 CHD 合并T2DM患者机体内miR-92a、HbA1c、ES呈高表达。张威等[18]研究显示，CHD合并T2DM组患者的miR-92a（1.88±0.51）高于 CHD 组（1.25±0.31）与对照组（0.98±0.25）（P<0.05），与本研究结果类似。本研究结果显示，预后不良组的miR-92a、HbA1c、ES高于预后良好组（P<0.05），表明预后不良患者miR-92a、HbA1c、ES表达水平更高。本研究 ROC 结果显示：miR-92a、HbA1c、ES联合预测患者预后的 AUC 0.909（95%CI：0.848~0.971）高于 3项指标的单独检测[0.776（95%CI：0.659~0.892）、0.860（95%CI：0.740~0.980）、0.795（95%CI：0.697~0.893）]，表明 miR-92a、HbA1c、ES联合可有效预测CHD合并T2DM患者预后，从而指导临床制定规范的治疗方案，以增强病情控制效果，促使患者获得良好预后。
综上所述，miR-92a、HbA1c、ES在 CHD 合并T2DM患者血清内呈高表达，且表达越高，患者预后越差，3项指标联合检测可为明确患者病情与预后提供更为可靠的参考依据，临床应用价值较高。
