牛人工授精技术要点探析

何荣奇

（柳州市融安县长安镇农业农村综合服务中心，广西 融安 545400）

为有效提高肉牛群体质量，扩大肉牛良种覆盖率，各地区畜牧兽医技术人员不断学习牛人工授精技术操作规程，掌握牛人工授精技术要点，以此在品种改良、扩繁扩育方面充分发挥人工授精技术优势。但是在基层地区牛人工授精技术操作过程中，仍然存在成功率低、母牛受胎率低等瓶颈问题，基于此，文章展开以下探究，分析牛人工授精工作成功率低的原因，之后总结人工授精技术规程与操作要点，为相关从业者提供可参考性建议。

1 肉牛养殖中使用人工授精技术的原因及优势

牛人工授精技术主要指通过人为操作，采集公牛精液，对精液进行保存与处理，之后在母牛发情期借助相应器具把公牛精液输送到母牛子宫内，以此来达到母牛受孕的目的，通过该种技术方法替代公母牛自然交配，该技术在20世纪50年代就开始推广，如今已经成为各养殖场常见的肉牛妊娠控制技术之一。

与传统自然交配相比，利用人工授精技术可有效提高公牛配种效率和精液利用率[1]。通常情况下，如果利用自然交配，一头公牛每次射精只能使一头母牛怀孕，而为了提高养殖场经济效益，多数养殖户在肉牛饲养过程中，母牛饲养数量远远超过公牛，因此在自然交配情况下，必然出现公牛精液供不应求情况，部分母牛不能受精受孕。而采用人工授精技术可将公牛精液一次性注射到几十头，甚至数百头母牛体内，从而提高配种效率，有效扩大良种公牛（精液）使用率，增加优良家畜数量。其次，在传统自然配种下，要想使得全养殖场母牛得到均匀配种，必然会从外界引入种公牛，而与活畜运输成本相比，精液运输费用更低，可以跨地区、跨省市、跨国流通，具有长远积累性经济效益。

2 牛人工授精工作中成功率低的原因

当前部分基层地区肉牛养殖场户均可意识到人工授精妊娠技术的优势与特点，且该技术在肉牛妊娠、良种繁育过程中应用率较高，已经实现常态化推广，但是从具体人工授精操作技术成功率方面来看，家庭养殖场和规模化养殖基地仍然存在牛受胎率低、人工授精操作成功率低等问题。根据多年肉牛扩繁扩育研究经验，文章将牛人工授精成功率低的原因概括为以下几个方面：

2.1 对母牛发情期判定不准

部分配种员在牛人工授精技术操作中，难以合理掌握母牛发情时间、排卵时间和发情症状[2]。通常情况下，多数配种员认为只要同栏舍内有母牛骑跨其他牛就可认定为母牛发情，之后便通过输精方法，将公牛精液输送到母牛体内，但往往受精成功率较低。产生这一问题的根本原因在于：多数配种员对母牛发情症状的判定存在误区，不能否认的是“骑跨其他母牛”这一表现确实为发情症状的典型表征，但仅此还不够，必须结合正常卵泡发育情况、生殖道变化情况才可综合判定母牛是否发情。

2.2 精液解冻温度不适宜

精子质量是影响牛人工授精操作成功率的重要因素，在输精之前，配种员需将精液进行解冻，通常情况下，解冻方法有无水解冻杯解冻、水介质解冻杯解冻、水浴锅解冻这三种方式，多数农村地区常见解冻方法为无水解冻杯解冻。但是在具体操作中，部分配种员在解冻精子时不能精准判断冻精细管具体位置，取冻精时间过长，均超过10s，或者在解冻过程中解冻时间过短，解冻温度过低或过高，直接影响输精效果和受精成活率，如果操作严重失误可能导致种公牛精子在复苏过程中大量死亡，进而致使牛受胎率下降，增加整个养殖场地产犊间隔时长，加大农村地区养殖户母牛饲养成本。

2.3 精子活力低

在输精之前，部分配种员不能对精子活力进行检查，通常情况下，在采精时，每周采精1～2次最为适宜，如果采精频次过高，将直接导致精子活力不强，或者多数精子未成熟，影响后续母牛受精能力。其次，在采精之后精子储藏温度、冷冻解冻温度，光照与辐射，均可以直接影响精子代谢活动，引起精子内外部变化，甚至如果光照过强，辐射过大，将直接对精子活力产生杀伤作用。此外，如果精子周围液体环境渗透压过高，也将影响精子活力，致使精子膨胀，内部脱水，进而死亡，不利于肉牛人工授精成功率，因此在今后工作中，配种员在采精之后应该做好精子贮藏与存放，输精之前检查精子活力，以此才能提高母牛受胎率。

2.4 输精枪掌握不当，输精太深

通常情况下，母牛的输精部位有三处，分别为子宫角、子宫颈口和子宫体深部[3]。经过多年理论研究和实践探索，认为将精液输到母牛子宫角内最为适宜，不易损伤子宫黏膜，如果将精液输送到子宫颈口，需要输送的精子数量较大，且输精之后精液容易倒流，致使母牛受胎率低，如果采用子宫体深部输精，可能导致输精枪插入太深，损伤子宫黏膜。但是在实际输精过程中，部分配种员输精管插入深度过深或过浅，直肠把握输精方法操作不当，可能导致母牛子宫黏膜损伤或者其他炎症出现，致使母牛妊娠率大大降低。

2.5 存在难孕牛

部分养殖场内存在难孕母牛，即母牛有不孕症或者存在永久性、暂时性繁殖障碍，将直接导致人工授精成功概率低[4]。通常情况下，青年牛20月龄不受孕，高产奶牛120d不受孕，或者母牛产后80d之内，均属于难孕牛，母牛不发情，或发情配种之后受胎率低，妊娠率低，或者在三个情期配种均不孕，或者参与配种70d从受孕，也可以划分到难孕牛范畴。此时配种员应判定难孕母牛是否为先天性不孕症，比如生殖器官发育不完全、存在两性畸形、异性孪生不孕以及其他生殖道疾病问题，如果经科学诊断，母牛不属于先天不孕症，应该从后天发育情况入手，判断母牛是否存在营养性不孕、气候性不孕、繁殖技术性不孕，以此提高母牛受胎率。

3 牛人工授精技术要点

3.1 科学掌握发情期

配种员应该科学掌握母牛排卵时间、发情症状，通常情况下，母牛进入发情期之后，可能存在爬跨其他母牛情况，此时还应该结合母牛外部表现、粘液渗出情况和直肠检查法，判断牛卵泡壁厚度。通常情况下，卵泡发育到1.5～2.0m，即视为发育良好，在进入到发情期之后，卵泡顶端有肿胀感，且卵泡壁较薄，同时阴道处有粘液渗出，粘液较为浓稠，渗出量大，将以上多种检查方法相结合，可以降低母牛发情误诊率，避免造成误配和精液浪费现象。在母牛发情结束后4～16h，视为母牛排卵时间，母牛表现逐渐由亢奋转为安静，臀部阴门肿胀感减退，有褶皱出现，且食欲基本恢复正常，阴道黏膜颜色呈暗红色，粘液渗出量较小，且与发情时相比，浓度更为稀稠，卵泡壁较薄，子宫颈由外向内更有弹性，有一处即破之感，此时为最佳输精时间。

3.2 做好精液冷冻解冻

在种公牛精液采集之后，应该做好精液冷冻与解冻，牛精液冷冻温度最低不能低于零下0.6℃，在细管取出冷冻精液之后，先在空气中停留几秒，如果利用水浴解冻，0.25ml细管停留时间约在15s，解冻温度在32℃左右。在冷冻和解冻过程中，所有与精液直接接触的器具必须经过严格灭菌消毒，尤其是装解冻液和精液的容器，与配种员所需的镊子，以此防止液氮罐内出现污染现象，通常情况下，精子解冻温度在32～38℃，如果低于32℃，将直接影响精子活力恢复，如果高于42℃，将直接使得种公牛精子迅速死亡。解冻后应将精液从水浴中取出，不能长时间保存精液，尤其是细管冷冻精液，保存时间最多不能超过60min，如果是颗粒冷冻精液最高不能超过120min，否则将影响精子活力。如果解冻后需要远距离运输，应将精子进行5℃低温保存和携带，之后将解冻温度调节到10～15℃，以此可以延长精子存活时间（可延长数小时左右）。

3.3 检查精子活力

通常情况下，要想保证母牛受胎率，提高种公牛精液品质，对于冷冻精液，其解冻后必须确保精子活力高于35%，精子畸形率必须小于18%，且前进运动精子数至少大于800万个，细菌总数小于800个，才能保证用于母畜繁殖生产。因此在输精之前配种员需对冷冻精液精子活力进行鉴定，取0.25ml细管冻精，在蒸馏水、载玻片、磷酸二氢钠、显微镜、姬姆萨染料、3.0%氯化钠溶液、磷酸氢二钠等实验材料辅助下，对冷冻精子畸形率、活力、菌落数和密度进行检查。在检查精子密度时，常利用血细胞计数器计数法，来判定1ml精液中所含精子数量，具体操作方法为，首先吸取公牛精液0.5ml，之后取3%氯化钠溶液5ml.摇匀一min左右后将精液稀释到200倍液，将血细胞计数器的计算室盖上盖玻片，利用600倍显微镜观察，可计算出精子数量，为后续精子活力判定打下坚实基础，通过该种方法及时淘汰不良精子，从而提高母牛受胎率。

3.4 规范输精

配种员应该掌握科学化、准确化输精技术，实现规范输精，必要时配种人可将第一次输精法和二次输精法相结合[5]。在母牛发情开始后的18～24h，进行第一次输精，在第一次输精之后约隔12～14h，进行第二次输精，以此可以加大受胎率，受胎率可高达60%左右，对于部分发情时间延长的母牛，可进行第三次输精，以此提高母牛妊娠率。在输精操作之前，戴好长臂手套，按照操作规程，输精器内装好备用精液，将左手伸入母牛直肠内，清洗母牛外阴部并擦干，同时掏出粪便。用手找到子宫颈，隔着直肠壁握住子宫颈，利用中指、食指与大拇指固定，必要时可轻微调控宫颈位置，伸入直肠的手通过子宫颈后，将精液输送至子宫颈内，在输精过程中，不可用力过猛，插入输精管时必须小心谨慎，通常情况下，输精深度不宜过深，以防穿透子宫壁或子宫颈。同时配种员也应该注意到，部分母牛在输精过程中较为紧张，其直肠壁收缩频次过快，且子宫颈也向后移，为有效刺激肠壁，配种员可把手前伸，握住子宫颈向前推，以便输精管插入，如果部分母牛子宫垂入腹腔，可以利用左手握住子宫颈慢慢上提，以便输精管通过。当输精管已经达到子宫颈口时，个别情况下会遇到不好插入问题，产生这一现象的根本原因可能为部分已孕母牛假发情，或者母牛子宫颈张开度不好，颈口有疤痕，子宫内有炎症，此时配种员需停止输精，对不好插入的原因诊断清楚，以防导致母牛子宫壁破损，或者由于强行深部输精引起已孕母牛流产。

3.5 做好难孕牛治疗

对于难孕牛，配种员应在基层畜牧兽医技术指导下，对不孕症进行治疗，其中对于先天性不孕症，其治疗方法主要有按摩卵巢子宫法、激素治疗法和激光穴位照射法，农村地区常用治疗方法为激素治疗法。比如肌肉注射PMSG1500IU，或者静脉注射HCG5000IU，也可以使用苯甲酸雌二醇20mg，配合己烯雌酚20mg进行综合治疗；对于异性孪生不孕母牛，其染色体异常，同时母牛阴道短小，输精器无法插入，在直肠检查时不能判定正常卵巢发育情况和子宫状况，因此对于该类母牛应及时淘汰。如果是后天不孕症母牛，应对其不孕原因进行检查，如果是营养型不孕，养殖户应该在日粮中补充维生素A、维生素D和维E以及矿物质，其中维生素A每日补充20万IU，可采用针剂注射法，每隔7d注射1次，连续注射3次，对于维生素D，每次注射10IU，每隔5d天注射1次，连续注射4次左右，并及时给予母牛室外运动和光照，对于维生素E，每次注射2ml左右，每隔7d使用3次，如果是繁殖技术性不孕，配种员应强化技术操作，避免漏配、错配和误伤等现象发生。

4 结语

综上所述，配种员应该科学掌握母牛排卵时间、发情症状，结合母牛外部表现、粘液渗出情况和直肠检查法，判断牛卵泡壁厚度，做好精液冷冻与解冻，将一次输精法和二次输精法相结合，及时检查精子活力，在基层畜牧兽医技术指导下，对先天不孕症母牛和后天不孕症母牛予以科学治疗，才能进一步提高牛人工授精成功率，加快母牛妊娠，突破母牛受胎率低等瓶颈问题，以此实现育种目的。