子痫前期孕妇血清FGF5、TF水平与妊娠不良结局的关系

崔张霞，张娜

子痫前期是妊娠期常见的妊娠疾病，临床特征为高血压、蛋白尿等，如不尽早治疗，将发展为子痫，严重影响产妇及胎儿的生命[1]。相关研究报道，初产妇子痫前期发病率为3%～8%，存在子痫前期病史的经产妇子痫前期再发生率为10%～65%[2]。子痫前期会导致孕妇血压上升，引起孕妇发生抽搐、全身痉挛，甚至导致胎盘早剥、胎儿生长受限等，造成围产期胎儿死亡[3]。因此，发现与子痫前期孕妇妊娠结局相关的指标是临床研究要点。子痫前期发病机制尚不清楚，有学者认为子痫前期与胎盘灌注不足、血管内皮功能障碍、凝血功能异常等密切相关[4]。成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor 5，FGF5)是成纤维细胞生长因子之一，Ren等[5]研究报道，原发性高血压患者外周血中FGF5表达水平显著上升。组织因子(tissue factor，TF)是血管内皮下层及周围组织的组成成分，在降低血管损伤后出血反应中发挥关键作用[6]。赵会荣等[7]研究报道，TF在妊娠期高血压患者血清中表达水平显著上升。基于此，本研究探究子痫前期孕妇血清FGF5、TF水平与妊娠不良结局相关性，早期分析孕妇妊娠结局，有利于早期对孕妇行干预措施，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月—2022年3月在陕西中医药大学第二附属医院产检及分娩的子痫前期孕妇72例作为观察组，均为单胎妊娠，参照“妊娠期高血压疾病诊治指南(2015)”[8]中对子痫前期病情严重程度判断标准，将患者分为轻度亚组(n=40)和重度亚组(n=32)。另选择同期医院产科健康的单胎妊娠孕妇78例作为健康对照组，2组年龄、孕周、BMI、孕次、产次比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。本研究通过医院伦理委员会批准(2016-01205)，受试者及其家属对本研究均知情同意并自愿签署知情同意书。

表1 健康对照组与观察组孕妇基本资料比较

1.2 病例选择标准 纳入标准：(1)符合第8版《妇产科学》关于子痫前期诊断标准[9]；(2)孕前月经周期规律；(3)在本院分娩。排除标准：(1)有先兆流产史；(2)妊娠期糖尿病、原发性高血压患者；(3)免疫性疾病、肝肾功能严重不全者；(4)人工授精或试管婴儿的孕妇。

1.3 观测指标与方法

1.3.1 实时定量PCR法检测血清中FGF5表达水平：子痫前期患者在入组次日，健康对照组孕妇在产检当日早上抽取空腹静脉血4 ml，4 000 r/min离心，取血清保存于-80℃备测。用RNA提取试剂盒(日本Takara公司)提取总RNA，依据PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser(日本Takara公司)指导书反转录得到cDNA。采用StepOne Plus实时荧光定量PCR仪(美国ABI公司)对血清中FGF5及内参GAPDH进行扩增反应。FGF5引物序列：上游引物5’-CCCACGAAGCCAGTGTGTTA-3’，下游引物5’-ATCGCGGACGCATAGGTATT-3’。GAPDH引物序列：上游引物5’-AAGGTCATCCCAGAGCTGAA-3’，下游引物5’-CTGCTTCACCACCTTCTTGA-3’。反应条件：95℃ 5 min，95℃ 30 s，56℃ 30 s，72℃ 30 s，36个循环。FGF5相对表达量用2-△△CT法计算。

1.3.2 血清TF水平检测：上述血清，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TF水平，试剂盒购于英国abcam公司，利用酶标仪(美国Thermo Scientific公司)于450 nm处测定吸光度，计算血清TF水平。

1.3.3 凝血功能指标检测：收集子痫前期患者在入组次日清晨空腹静脉血3 ml。采用全自动血凝仪(美国Beckman Coulter公司)检测血浆中活化部分凝血酶原时间(activated partial thromboplastin time，APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen，Fib)、凝血酶原时间(prothrombin time，PT)、血小板(platelets，PLT)水平。

1.3.4 随访情况：随访所有子痫前期患者至妊娠结束，记录围生儿预后情况，不良妊娠结局包括孕妇不良结局及胎儿、新生儿不良结局。孕妇不良结局：发展为子痫、重要器官衰竭、胎盘早剥、死亡等；胎儿不良结局：生长受限、羊水过少、死胎等；新生儿不良结局：新生儿窒息、死亡等。

2 结 果

2.1 2组血清FGF5、TF水平比较 与健康对照组比较，观察组血清FGF5、TF水平升高，差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 健康对照组与观察组血清FGF5、TF水平比较

2.2 轻度亚组与重度亚组血清FGF5、TF水平比较 与轻症亚组比较，重症亚组血清FGF5、TF水平升高，差异有统计学意义(P<0.01)，见表3。

表3 轻度亚组与重度亚组血清FGF5、TF水平比较

2.3 不良妊娠结局亚组和妊娠结局良好亚组临床资料比较 本组子痫患者中，不良妊娠结局22例，妊娠结局良好50例。与妊娠结局良好亚组比较，不良妊娠结局亚组APTT、PT、PLT水平降低(P<0.01)，Fib、FGF5、TF表达水平升高(P<0.01)，见表4。

表4 妊娠结局良好亚组和不良妊娠结局亚组临床资料比较

2.4 子痫前期孕妇血清FGF5、TF与血浆凝血指标相关性分析 Pearson分析显示，子痫前期患者血清中FGF5、TF与APTT、PT、PLT呈负相关(P<0.01)，与Fib呈正相关(P<0.01)，见表5。

表5 血清FGF5、TF与血浆凝血指标相关性分析

2.5 Logistic回归分析影响不良妊娠结局的独立危险因素 将子痫前期患者妊娠结局作为因变量(妊娠结局良好=0，不良妊娠结局=1)，将FGF5、TF、APTT、PT、Fib、PLT作为自变量，Logistic回归分析显示，FGF5高、TF高、Fib高、PLT低是子痫前期孕妇不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)，见表6。

表6 Logistic回归分析影响不良妊娠结局的独立危险因素

3 讨 论

子痫前期早期表现为全身血管痉挛，血管阻力和血压迅速上升，随时可能危害孕妇生命安全，若病情严重时未立即终止妊娠，易导致不良妊娠结局，如胎儿生长受限、死产等[10]。子痫前期孕妇由于体内血管内皮损伤及小血管痉挛引起凝血功能发生显著变化，机体处于高凝状态[11-12]。孕妇凝血系统异常最直接的表现是凝血指标异常，凝血系统异常易引起整个循环系统出现不同程度的供血障碍，机体组织器官也发生供血障碍，组织血氧供应不足，给孕妇带来较大的危险[13]。因此，寻找可靠的检测指标预测子痫前期孕妇妊娠结局，有利于早期对孕妇行干预措施。

目前，大部分学者认为子痫前期发病的基础是妊娠期孕妇凝血功能的改变[14]。APTT、PT水平低表示子痫前期孕妇处于高凝状态，易发生微血栓、微血管堵塞。Fib直接参与凝血过程，其水平升高说明机体纤溶活性降低，形成血栓的风险增加；另外，Fib可促进血小板聚集﹑黏附，导致血管内皮细胞损伤[13]。妊娠合并血小板减少通常会引起患者贫血、胎儿早产、新生儿贫血等不良后果，严重时威胁母婴生命[15]。本研究显示，与妊娠结局良好亚组相比，不良妊娠结局亚组血浆APTT、PT、PLT水平降低，血浆Fib水平升高，提示子痫前期患者存在凝血功能亢进、抗凝血功能降低，患者处于血管内凝血的高凝期[16]。

本研究显示，观察组血清FGF5、TF水平显著高于健康对照组，重度亚组血清FGF5、TF水平明显高于轻度亚组，提示血清FGF5、TF可能影响子痫前期发生及发展。本研究显示，不良妊娠结局亚组血清FGF5、TF水平显著高于妊娠结局良好亚组，提示血清FGF5、TF可能影响子痫前期妊娠结局。TF是组织凝血活酶或凝血因子Ⅰ，是生理性凝血级联反应的主要启动因子，血管内皮损伤时可大量释放入血，启动凝血过程，促使血栓形成[17]。TF在生理和病理性止血过程中作为机体内最强的促凝物质之一，在外源性凝血途径中，与凝血因子Ⅵ、凝血因子Ⅹ结合并使其激活，促进凝血酶原生成凝血酶，进而启动血液凝固级联反应[18]。赵会荣等[7]研究显示，妊娠高血压患者血清中TF与APTT、PT呈密切负相关。FGF5属于成纤维细胞生长因子(FGF)家族，FGF5由268个氨基酸组成，具有28个高度保守的氨基酸残基，其中10个高度保守的氨基酸残基可与FGF受体结合[19]。全基因组关联分析报告显示，FGF5基因内部是原发性高血压的易感区域[20]。另外有研究报道，FGF5可促进人主动脉内皮细胞(HAEC)的血管生成，且HAEC中的血管内皮生长因子(VEGF)-A可刺激FGF5表达水平显著升高[21]。本研究进一步发现，子痫前期患者FGF5、TF与APTT、PT、PLT、Fib密切相关，提示血清FGF5、TF可能通过影响子痫前期患者体内凝血功能进而影响子痫前期孕妇妊娠结局。Logistic回归分析显示，FGF5高、TF高、Fib高、PLT低是子痫前期孕妇不良妊娠结局的独立危险因素，提示除Fib、PLT外，FGF5、TF也是子痫前期孕妇不良妊娠结局的独立危险因素。

综上所述，子痫前期孕妇血清FGF5、TF水平显著升高，是子痫前期孕妇不良妊娠结局的独立危险因素。

利益冲突：所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明

崔张霞：研究设计，论文撰写；张娜：资料收集，数据分析，论文修改