全血细胞计数在新生儿疾病诊断中的应用研究现状

罗晓斐 张炼

新生儿疾病具有症状不典型、发展迅速等特点，如果缺乏快速、准确的实验室指标协助早期诊断，将不能进行及时有效的治疗，这会导致较高的发病率和死亡率。快速、客观的辅助诊断指标对于新生儿疾病的诊断、病因的探究以及治疗方案的制定尤为重要。全血细胞计数是一项筛选性试验，是通过手工血细胞计数或血液分析仪检测血细胞的数量和类型，是新生儿科常用的实验室诊断指标。自动化计数等新的应用以及荧光流式细胞术检测技术的发展，提高了检测速度及精确度，节省了时间和人力[1]。文章就网织红细胞参数、未成熟中性粒细胞及未成熟血小板在新生儿疾病诊断中的应用的最新研究现状综述如下。

1 网织红细胞

网织红细胞是晚幼红细胞脱核后的未成熟阶段，在周围血液中的数值可以反应骨髓红细胞的生成功能。网织红细胞参数通过自动血液分析仪可以报告为网织红细胞百分比（percentage of reticulocytes，RET%）、网织红细胞绝对值（absolute count of reticulocytes，RET#）、未成熟网织红细胞分数（immature fraction of reticulocytes，IRF%）和网织红细胞血红蛋白含量（hemoglobin content of reticulocytes，Ret-He）[2]。国 外 的 研 究 报 导 了 健 康足月新生儿生后24 h内网织红细胞参数的参考区间：RET#为（0.16～0.29）×1012/L；RET%为3.2%～6.0%；IRF%为35.7%～52.8%；Ret-He为31.7～38.4 pg[3]。国内有研究报导了武汉地区健康足月新生儿0～3 d网织红细胞参考区间：RET#为（0.124～0.400）×1012/L；RET%为2.06%～6.35%；Ret-He为27.49～37.3 pg[4]。还有研究报导了不同胎龄新生儿出生24 h内Ret-He的参考区间：＜30周为（30.88±4.55）pg，30～33周为（32.19±3.16）pg，33～36周为（33.66±2.50）pg；出生2～3 d的Ret-He参考区间：＜30周为（25.32±3.31）pg，30～33周为（28.66±3.32）pg，33～36周为（30.49±3.13）pg；同时，该研究通过对比不同胎龄新生儿生后24 h内及出生2～3 d的Re-He，发现不同胎龄新生儿生后24 h内的Ret-He均高于出生2～3 d[5]。

网织红细胞参数主要应用于新生儿溶血病的诊断。当新生儿出现黄疸时，病理性黄疸患儿的RET%、RET#和IRF均比正常患儿高，并且RET%与血红蛋白（hemoglobin，Hb）同时异常比单一总胆红素（total bilirubin，TBil）异常更能有效预测患儿是否为ABO溶血[6]。近年，国内多个研究均得出新生儿溶血患儿的RET%显著升高的结论[7-11]。国内的研究还表明IRF在新生儿溶血患儿中也会明显升高[9，10，12]。在治疗效果评价方面，国内有学者报导了RET%明显下降提示新生儿溶血病治疗有效[13]。

网织红细胞相关参数还用在其他疾病诊断方面，国内外学者有以下观点：新生儿贫血患儿RET%高于健康新生儿[14]；Ret-He可以直接反映骨髓中可用铁的水平，表明实时Hb合成状态，并且转铁蛋白饱和度和Ret-He之间有良好的相关性，所以，Re-He或可用于新生儿贫血的诊断[15-16]；当发生新生儿窒息时，患儿的RET#和RET%会明显高于正常值，并且RET#还与窒息程度有关，RET#越高，窒息程度越重[17]；当发生新生儿缺氧缺血性脑病时，患儿的RET#和IRF会升高[18]。另外，在儿童中，有研究报导儿童急性病毒性感染时IRF下降，因此，IRF与白细胞相关计数联用可协助鉴别儿童早期感染性疾病是病毒性感染还是细菌性感染[19]，但当新生儿发生感染性疾病时，IRF是否有变化，尚无相关研究。

2 未成熟中性粒细胞

中性粒细胞自原始细胞，经原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞、带状核粒细胞、多形核粒细胞等阶段，其中早幼粒细胞、中幼粒细胞及晚幼粒细胞为未成熟中性粒细胞。未成熟中性粒细胞的计数方法也包括了人工计数及自动化计数。未成熟中细粒细胞与中性粒细胞（immature-to-total neutrophil，I/T）比值需要技术人员人工计数[20]，可能因技术人员的主观差异而产生误差，且需耗费较多人力。自动血液分析仪可将未成熟中性粒细胞（immature granulocyte，IG）报告为未成熟粒细胞百分比（immature granulocyte percent，IG%）以及未成熟粒细胞绝对值（absolute immature granulocyte count，IG#）。国外研究报导健康足月新生儿脐血的IG#参考值为（0.026 5～0.112 3）×103/μL[21]，生后24 hIG#及IG%的参考范围分别为（0.080～1.700）×103/μL以及0.6%～6.1%[3]。国外另外有一研究[22]报导了日龄＜7 d及＞7 d新生儿IG#和IG%的参考范围：日龄＜7 d IG#和IG%分别为（0.08～0.47）×103/μL和（0.90～3.10）%；日龄＞7 d IG#和IG%分别为（0.08～0.47）×103/μL和0.40%～2.33%。

新生儿败血症是新生儿期病原体侵入血液后引起的全身性炎症反应[23]，早期可无特异性临床表现，容易被误诊和漏诊，但该病起病急，进展快，容易错失最佳治疗时机。在败血症诊断方面，国外有研究表明I/T比值可预测母亲患有绒毛膜炎时新生儿是否会患败血症，但是该研究因样本量小而具有局限性，尚需大样本量的研究证实[24]。国外另一个研究表明，对于极低出生体质量儿，将I/T比值与白细胞计数以及C反应蛋白联合进行分析，具有较高的灵敏度，可用于预测是否会发生晚发型败血症[25]。I/T比值需人工计数，会因技术人员的主观因素产生误差，而IG#和IG%通过自动血液分析仪报告，可消除这一误差。

在感染性疾病诊断方面，国内有研究发现新生儿发生细菌感染时IG#、IG%会明显升高[26]。国外的研究则报导血培养阳性新生儿的IG#比血培养阴性新生儿高，并且血培养阳性患儿中，革兰染色阴性组患儿IG#比革兰染色阳性组患儿高[27]。

除此之外，在非感染性疾病诊断方面，国外有学者发现IG#与新生儿先天性膈疝的疾病严重程度相关，提出IG#或许可以作为先天性膈疝患儿体外肺膜氧合（extracorporeal membrane oxygenation，ECMO）支持的预测指标[28]。然而，该研究样本量小，尚需大规模研究证实。

3 未成熟血小板

血小板由巨核细胞系分化而来，经过原巨核细胞系、幼巨核细胞、巨核细胞等阶段，其中原巨核细胞、幼巨核细胞及巨核细胞为未成熟血小板。未成熟血小板通过自动分析仪可以报告为未成熟血小板绝对计数（immature platelet count，IPC）和未成熟血小板分数（immature platelet fraction percent，IPF%）。国外的研究报导了健康足月新生儿生后24 h内IPC和IPF%的参考范围：IPC为（4.73～19.72）×103/μL，IPF%为1.7%～9.8%[3]。国外另有一研究报导了不同胎龄新生儿的IPF参考范围：28～32周早产儿为3.95%～7.07%，32～34周早产儿为3.46%～4.82%，34周～不足37周早产儿为3.95%～7.07%，足月新生儿为3.29%～5.87%[29]。

国内文献[30]提出，IPF%能反映血小板的生成能力，可用于血小板减少性疾病病因的鉴别：原发免疫性血小板减少症（primary immune thrombocytopenia，ITP）组的IPF%高于健康对照组、再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）组、化疗组（chemotherapy，CT）及慢性肝病（chronic liver diseases，CLD）组，而AA组、CT组、CLD组及健康对照组之间的IPF%无差异。国外一研究证实了IPF%在免疫性血小板减少症和其他血小板减少症鉴别方面具有临床价值：ITP患者的IPF%升高，当ITP治愈后IPF%恢复正常[31]。ITP患者恢复时，IPC升高比成熟血小板计数的变化要早3 d[32]。与消耗性血小板减少症新生儿包括免疫介导的血小板减少、感染后继发的血小板减少、弥散性血管内凝血以及坏死性小肠结肠炎等相比，低再生性血小板减少症新生儿包括小于胎龄儿、出生窒息以及一些综合征等的IPC和IPF%较低[33]。

在感染性疾病诊断及病情评估方面，IPF%及IPC也有临床价值：国内学者报道脓毒症患者的IPF%显著上升，并且IPF%与脓毒症严重程度有关[34]；国外有文献提出IPC或可作为脓毒症严重程度的预测指标之一[34-35]。但是新生儿脓毒症患者IPF%、IPC如何改变尚未见报道。

4 小结

自动化计数以及荧光流式细胞术检测技术的发展，提高了全血细胞计数的检测速度及精确度，使全血细胞计数在新生儿科的应用越来越广泛。网织红细胞计数可评估新生儿红细胞生成及机体铁水平，可应用于新生儿溶血病的诊断及疗效评价；未成熟中性粒细胞可更准确协助诊断感染性疾病，也可用于先天性膈疝患儿ECMO支持的预测指标；未成熟血小板可协助诊断血小板减少症的潜在病因，可用于血小板减少性疾病病因的鉴别。一些自动血细胞计数新生儿参考值的丰富，极大促进了其在新生儿领域的应用。但是还有一些全血细胞计数的参数在新生儿科的应用有待探究：（1）未成熟网织红细胞分数协助判断感染性疾病是病毒性感染还是细菌性感染；（2）未成熟中性粒细胞在感染性疾病的应用；（3）未成熟血小板百分比在血小板减少症病因识别、脓毒症的诊断及判断严重程度方面的应用等。新生儿全血细胞计数研究的丰富，将为新生儿科的临床工作提供很大的帮助。