第3、4 代丙型肝炎病毒抗体ELISA 检测试剂在血站血液检测中的作用分析

朱晓晨

丙型病毒性肝炎可以通过血液进行传播,且传染性较强,HCV 慢性感染能引发肝脏慢性炎症坏死与纤维化,少部分患者会发生肝硬化以及肝细胞癌(HCC),对患者的身体健康以及生命安全造成了严重影响,随着当下社会逐渐对疾病的认知,丙型病毒性肝炎已经列为严重的社会与公共卫生问题。HCV 1989 年发现,后经过深入研究发现了多种检测方式［1,2］。国内外HCV ELISA 试剂已经逐渐完善并广泛应用于临床诊断,但上述试剂属于检查试剂范畴,当下国内多数选择3 代ELISA 试剂对丙型病毒性肝炎进行诊断,尽管第3 代试剂较之第4 代价格较低,但是可能发生更高的假阳性率以及漏诊情况。本研究选择2 种国产ELISA 试剂对标本检出HCV 阳性样本采用RIBA 检测诊断结果,现报告如下。

1 材料与方法

1.1材料来源 选取2019 年7 月～2020 年7 月本血站无偿献血者中经过2 种HCV ELISA 检测后至少1 种试剂检测结果为阳性的样本150 份。

1.2方法 选择第3 代(北京万泰生物药业股份有限公司)以及第4 代(珠海丽珠试剂股份有限公司)ELISA 试剂。RIBA 由MP 生物医学公司提供,使用RIBA 对150 份阳性标本进行检测。

2 结果

2.1HCV ELISA 试剂检测结果分析 150 份标本中,2 种ELISA 试剂检测结果均为阳性的标本125 份,1 种试剂检测结果阳性的标本25 份,其中第3 代ELISA 试剂检测结果阳性150 份,第4 代ELISA 试剂检测结果阳性125 份。125 份2 种ELISA 试剂检测结果均为阳性的样本经过RIBA 验证,确定阳性样本120 份,阳性率为96%；20 份第3 代ELISA 试剂单独检测结果阳性的标本经RIBA 验证,确定阳性1 份,阳性率为5%(1/20)；5 份第4 代ELISA 试剂单独检测结果阳性的标本经RIBA 验证,确定阳性2 份,阳性率为40%(2/5)。说明2 种ELISA 试剂对HCV 检测均为阳性的检测准确率较高。

2.2假阳性与真阳性标本的S/CO 值对比 150 份标本经RIBA 验证,假阳性标本25 份,真阳性标本125 份。真阳性标本S/CO 值(＞1.0 且≤10.0)高于假阳性标本(＞1.0 且≤2.0)。说明对于HCV ELISA 试剂应当确定S/CO 界限值,小于界限值的标本应当选择RIBA验证。

2.3假阳性标本的RIBA 条带分析 影响假阳性结果出现的RIBA 条带中,Core 条带16 条,占比为64%；NS3-1 条带5 条,占比为20%；NS3-2 条带2 条,占比为8%；NS4 条带2 条,占比为8%,无NS5 条带。说明Core 条带使ELISA 试验结果呈现假阳性的几率很高,NS5 条带不会影响ELISA 试验结果。

3 讨论

HCV 的传播途径为血液传播,并且感染性较强,所以,需要关注的是如何快速准确的诊断,其对于患者的治疗意义较大［3,4］。关于引发肝损害的机制,当下认定与激活病毒特异性细胞毒性T 细胞有关,也有可能是通过非特异性炎性反应细胞产出细胞因子,尤其是γ 干扰素所导致。丙型肝炎主要的传播途径为血液和血制品,导致慢性肝炎或者病情发展为肝硬化以及肝癌,所以,有必要建立一种对HCV 具有高灵敏度、高特异性以及高稳定性的检测措施,对丙型肝炎感染的早期诊断以及治疗意义重大［5］。随着医学研究的不断深入,医疗技术也随之更新,检测方式呈现多元化［6］。在临床应用中,会发生不同试剂对同一项目的检查此类情况,但是,其检测功能和效果并不稳定,所以进行对比测试的同时,需要明确和结果是否一致［7］。在常规结果对比当中,需要采取确认与验证实验,还需要对精密度情况进行判定。血液作为珍惜资源,抗-HCV阳性是成品作废的主要因素,根据相关要求,献血者的血液检测需要高灵敏度,以此来保证血液的安全性,同时还要有低假阳性率,降低血液浪费量［8,9］。ELISA 是检测抗-HCV 的主要方法,其优势在于高灵敏度、强特异性以及高自动化程度,并且检测成本较低［10,11］。但是其缺陷在于可能发生假阳性结果,主要原因为标本溶血、细菌感染、长期保存等。在本研究中,在使用第3、4 代ELISA 试剂中,任何一种试剂结果呈现阳性血液都无法利用于临床,使得血液报废,同时献血者也会被列入黑名单中,无法进行献血,此类方式尽管可以保证血液安全,同时有浪费资源的缺陷。根据相关研究表明,相对于第3 代试剂,第4 代抗-HCV ELISA试剂的优点在于有足够高的灵敏度,能确保血液安全性,同时出现的假阳性更少,能有效提升检出率,也减少了血液浪费,降低献血者的流失［12,13］。

综上所述,HCV ELISA 检测试剂均存在一定假阳性,尤其是S/CO 值较低的,或者2 种试剂中有1 种试剂呈现阴性结果,需要考虑是否为HCV 假阳性,同时针对于RIBA 条带分析发现,Core 条带会使得ELISA结果呈现假阳性,为减少不确定结果,是否将带条带Core 报告作为阴性,还需要深入研究。