超声弹性成像应变率比值在乳腺肿块鉴别中的应用及其与乳腺癌相关分子标记物的相关性

陶鹏，侯岩，赵妩媚

（安徽省淮北市人民医院 B超室，安徽 淮北 235000）

乳腺癌是当前社会的重大公共卫生问题，近年来，我国乳腺癌疾病的患病率呈现上升态势，严重影响了人们的身心健康[1-2]。乳腺肿块是乳腺癌的前驱病变，实现对肿块的良恶性鉴别对于乳腺癌的早期诊断、治疗及预后改善发挥关键作用。尽管当下影像学技术飞速发展，在良恶性乳腺肿块鉴别中取得明确效果。但要实现精准鉴别仍需继续努力[3-4]。超声弹性成像（ultrasonic elastography，UE）是较先进的组织定征技术手段之一，能够依据乳腺肿块的硬度显示出特有的征象特征，进而对乳腺实质性肿块的良恶性做出评估，目前采取的主要是5 分评分法[5-6]。有报道[7]显示，应变率比值（strain ratio，SR）测量方法可以更客观地评价乳腺肿块的硬度。本研究选取在我院治疗的乳腺肿块型病变患者为调查对象，主要探讨SR 测量在乳腺肿块型病变良恶性鉴别诊断中的价值及与细胞增殖相关抗原（Ki-67）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）、雌激素受体（estrogen receptor，ER）、人类上皮因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）因子的相关性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2020 年1 月—2021 年12 月在安徽省淮北市人民医院收治的98 例乳腺肿块患者作为调查对象。纳入标准：⑴ 年龄≥18 岁；⑵ 常规超声提示边界尚清，且具备空间占位效应，符合肿块定义；⑶ 经免疫组化染色获得ER、PR、HER-2、Ki-67的表达状态；⑷ 患者或家属签署知情同意书。排除标准：⑴ 以往明确诊断为乳腺癌或其他恶性肿瘤者；⑵ 有乳腺疾病手术治疗史者；⑶ 精神、听力异常者。本研究98 例患者，年龄20～86 岁，平均（58.71±6.02）岁；体质量指数22.05～30.57 kg/m2，平均（24.25±1.65）kg/m2；病程5～29 个月，平均（15.76±3.36）个月。

1.2 检查方法

使用西门子红杉树ACUSON Sequoia 彩色多普勒超声诊断仪，探头频率为4～10 MHz。平躺于检测床上，完全暴露患者两侧腋窝及乳腺。将乳头作为中心，依据乳管直向，保持探头长轴与乳管长轴呈水平状态。沿逆时针方向连续旋转探头进行扫查，扫查过程中保证整个乳腺、乳房内部结构均清晰可见；然后探头长轴垂直于乳管横切以扫查乳管间质及断面图像；实质性肿物在常规二维超声检查确定后，取最优的声像图切面，查阅肿物的方位、边界、后方回声的特征以及类型等，测量结节的长短径、形态；在彩色多普勒模式下分析肿块的血流情况，观察血液供应。

1.3 诊断标准

SR 参考许东峰等[8]报道，将3.08 作为临界点值，≥3.08 诊断为恶性肿瘤，<3.08 诊断为良性肿瘤。全部病灶均进行2 个切面（水平切面、矢状切面）以上的扫描检查，选择2 个切面的最大值作为肿物病灶的SR。以手术病理结果为金标准，计算两种评判方法对乳腺肿块型病变良恶性的诊断敏感度。

1.4 免疫组化染色法

取标本，应用甲醛（福尔马林Formalin）进行固定处理，选取石蜡包埋，3 μm 厚的石蜡切片；选取常规的免疫组化染色方法（streptavidinperosidase，SP），试剂由福州迈新生物技术开发有限公司提供；全部切片均在奥林巴斯CX43 光学显微镜下仔细观察，由本院2 名病理科经验丰富的医师对乳腺癌生物学预后评价因子Ki-67、PR、ER 及HER-2 的染色情况进行测量、观察与读片[9]。仅对恶性病灶进行上述指标检测。

1.5 染色结果的评价标准

Ki-67 阳性：CX43 下可观察到细胞核内存在棕黄色的颗粒，在高倍物镜下可发现500 个细胞，逐一记录显阳性的细胞数，并计算阳性细胞数占比（10%～90%）。PR、ER 阳性：细胞核内有棕黄色的颗粒存在，染色后记录PR、ER 阳性细胞数占比均≥10%；PR、ER 阴性：经染色后记录PR、ER 阳性细胞占比均<10%。HER-2 阳性：显微镜下显示1/4的阳性细胞膜染色完整。全部HER-2 阳性患者均行荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization，FISH）方法检测，以确定HER-2 基因是否存在扩增。

1.6 统计学处理

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析。计量资料采用均数±标准差（±s）表示，采用两独立样本t检验进行组间比较。计数资料采用例（百分比）[n（%）]表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 手术病理结果

98 例患者合计106 个病灶，术后病理诊断，良性病灶58 个，包括纤维腺瘤48 个，乳腺囊肿2 个，导管内乳头状瘤2 个，腺病瘤4 个，乳腺腺病2 个；恶性病灶48 个，包括浸润性导管癌42 个，导管内癌4 个，黏液癌2 个。

2.2 UE诊断乳腺肿块的灵敏度和特异度

与病理结果（良性58 个，恶性48 个）对比，UE 诊断恶性肿块的敏感度为87.50%（42/48）、特异度82.76%（48/58）、准确率90.57%（96/106）。

2.3 良恶性病灶SR比较

恶性病灶SR 明显高于良性病灶（3.66±0.81vs.2.95±0.93），差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。

表1 良恶性病灶SR比较（±s）

表1 良恶性病灶SR比较（±s）

2.4 恶性病灶ER、PR、HER-2 及Ki-67 阴性组与阳性组SR比较

ER 阳性35 例，阴性13 例，PR 阳性28 例，阴性20 例，HER-2 阳性28 例，阴性20 例，Ki-67 阳性43 例，阴性5 例。ER、PR、HER-2、Ki-67 阳性病灶SR 均高于阴性病灶，差异均有统计学意义（均P<0.05）（表2）。

表2 恶性病灶ER、PR、HER-2 及Ki-67 阴性组与阳性组SR比较（±s）

表2 恶性病灶ER、PR、HER-2 及Ki-67 阴性组与阳性组SR比较（±s）

2.5 ER、PR、HER-2及Ki-67与SR相关性分析

相关性分析结果显示，ER、PR、HER-2 及Ki-67 与SR 均呈正相关（均P<0.05）（表3）。

表3 ER、PR、HER-2及Ki-67与SR相关性分析

3 讨 论

乳腺肿块临床患病率在不断上升，尽早明确诊断乳腺肿块的良恶特性，可快速发现乳腺癌，为患者争取最佳的救治时机，提高远期生存率[10-11]。超声技术是临床上普遍应用的乳腺肿块无创性的鉴别手段，主要是根据乳腺肿块的内部回声的不同以判定其良恶性质，但对于特异性差或重叠性肿块难以做出准确的评价，局限性较为明显，容易漏诊及误诊，延误治疗时机[12-13]。

UE 检测重要的是根据乳腺肿块存在组织弹性的差异，通过对弹性系数的检测，将弹性系数偏低、硬度大的肿块评价为恶性，反之则归为良性。与常规二维超声相比，UE 不受影像医师的主观判断影响，还可以确定肿块的范围，为之后的治疗方法的选择提供有利的参考[14-15]。但值得学者关注的是，在肿块内部钙化和部分机化的作用下，可能会导致UE 检查时肿块硬度增高，导致诊断结果不准确，影响治疗方法的选择及预后。为此，仅靠UE 也会出现误诊、漏诊情况[16-17]。本研究中，与常规二维超声比较，仅进行UE 检查不能明确乳腺肿块的良恶性的比例更低，诊断恶性乳腺肿块的灵敏度、特异度、准确率均更高，但无显著差异。丰波等[18]证实，SR 对乳腺恶性病变有较高的诊断敏感度及特异度，且诊断结果更为客观。由此得出，UE 对乳腺肿块的良恶性鉴别效果较常规二维超声更佳，但两者间差异并不明显，后续需大量研究进一步证实。

报道[19]显示，ER 可以通过影响血管内皮生长因子的表达来阻止肿瘤新生血管的生成，进而切断肿瘤细胞繁殖的途径。本研究中，PR、ER、HER-2 阳性组的SR 均显著大于各自的阴性组。表明PR、ER、HER-2 阳性者的肿瘤新生血管生成偏少，毛细血管的通透性偏低，故影响了血流动力学各项参数水平，导致其下降。Ki-67 是常见的核抗原因子，最早发现于快速增长繁殖的细胞中，可刺激细胞增殖[20]。有文献[21]指出，若肿瘤中有1/2 以上的癌细胞呈现Ki-67 表达增高的现象，则癌症具有更高的复发率。乳腺癌细胞中Ki-67 表达水平低的患者早期强化率亦低。靳凤梅等[22]研究显示，乳腺全容积成像（ABVS）征象，尤其是冠状面“汇聚征”与PR、ER、HER-2、Ki-67 有一定的相关性。本研究通过Pearson 相关性分析结果发现，SR 与PR、ER、HER-2、Ki-67 的表达呈显著正相关。结果表明，乳腺癌PR、ER、HER-2、Ki-67 阳性表达水平越高，其SR 越大，故此疾病复发的概率较高。除此之外，SR 有可能成为评价Ki-67 表达程度的关键指标之一。

综上所述，UE 的SR 不仅可用于乳腺良、恶性肿瘤的鉴别诊断，在临床上具有较好的实用价值。但本研究仍有一定的不足，如样本量偏少，且本研究虽证实SR 与ER、PR、HER-2 及Ki-67 正相关，但也不能完全证明SR 可以预测乳腺癌的生物性行为，未来还需要更多深入的研究来证实这一点。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。