山羊口疮病毒和支原体混合感染的诊治与净化效果

宋德荣 王中贵 彭 华 周大荣 郭振刚 程振涛 刘 江张 平 吴蕊汝 吴 瑛 吴 萍

1.贵州省毕节市畜牧兽医科学研究所，贵州 毕节 551700；2.贵州省毕节市牧垦场，贵州 大方 551600；3.贵州大学动物科学学院，贵州 花溪 552200；4.贵州省毕节市动物疫病预防控制中心，贵州 毕节 551700

山羊传染性胸膜肺炎（CCPP），由山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）引起，是世界动物卫生组织（OIE）法定报告动物传染病之一。山羊传染性胸膜肺炎和支原体肺炎同属丝状支原体簇，病原体具有较高的亲缘关系，但前者只有胸膜肺炎一种症状，而后者还有关节炎、结膜炎、乳腺炎和流产等症状[1]。2016年12 月至2017 年3 月，发现毕节市某山羊场1～3月龄羔羊、育成羊、成年羊不同程度感染了羊口疮，怀孕母羊有流产和产死胎的现象，3 月龄内的羔羊死亡率较高等。2017 年5 月活体送检后，实验室诊断为羊口疮与支原体混合感染。通过2017-2020 年的疫病净化，羔羊死亡率已下降到8.14%。

1 材料与方法

1.1 送检动物

来源于海拔2 000 m 左右的毕节市某羊场的贵州黑山羊，此地雨季潮湿，冬季湿冷。

1.2 送检时间

2017 年5 月24 日将4 只病羊送贵州省动物疫病研究室检测。

1.3 检测方法

对4 只病羊进行实验室剖检和病原核酸检测，检测试剂盒来源于北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，试剂批号为20160512P。

2 结果与分析

2.1 剖检观察

经剖检观察，4 只病羊结果显示：3 只病羊口腔生疮，2 只病羊肠系膜淋巴结充血、肿大，2 只病羊胃肠鼓气，1 只病羊肝脏淤血，2 只病羊心包积液，2只病羊肺脏干酪样坏死，1 只气管点状出血，1 只病羊肺脏与胸壁组织粘连。

2.2 病原核酸检测

1）羊口疮PCR 病原核酸检测。取口疮、水泡皮组织充分研磨或咽喉棉拭子，加入PBS 溶液混合均匀，提取基因组DNA，采用特异性引物（目的片段1 137 bp），进行羊口疮PCR 病原核酸检测，结果如图1 所示。由图1 可知，送检样本检出1 137 bp的羊口疮病毒特异性目的基因条带。

2）支原体病原核酸检测。取肺脏组织充分研磨后，加入适量的PBS 溶液混合均匀后，提取基因组DNA，采用世纪元亨支原体检测试剂盒进行PCR 检测，检测结果见图2。由图2 可知，送检样本检出602 bp 的目的条带。

3）口蹄疫病原核酸检测。取水泡皮组织进行充分研磨，加入适量PBS 溶液混匀；提取RNA，采用世纪元亨口蹄疫检测试剂盒进行口蹄疫的RT-PCR检测，检测结果如图3 所示。由图3 可知，送检样本中未检出口蹄疫病毒目的条带。

4）小反刍兽疫病原核酸检测。取肺脏、淋巴结组织充分研磨，加入适量PBS 溶液混匀；提取RNA，采用世纪元亨小反刍兽疫检测试剂盒进行小反刍兽疫的RT-PCR 检测，检测结果如图4 所示。由图4可知，送检样本未检出小反刍兽疫病毒目的条带。

2.3 口疮病毒和支原体混合感染防治与净化

1）羊口疮防治。治疗时，用竹片或摄子去掉患羊痂皮，创面先用0.1%高锰酸钾溶液冲洗，选用2%龙胆紫或3%碘酊甘油涂擦，然后用磺胺类药物和青霉素粉剂撒布创面，2 次/d，1 个疗程7 d，连续治疗7 d 后，隔3 d 再进行下一个疗程，直至痊愈。平时预防，一是不喂干硬和带有芒刺的饲草，二是添加适量食盐以减少羊乱啃食硬物导致皮肤、黏膜损伤。

2）羊支原体肺炎防治。治疗时，选用“氟苯尼考+安乃近”，可取得较好的效果。平时避开怀孕时间段，采用“盐酸多西环素+维生素C”溶于饮水或拌料，每3 个月预防性给药1 次。

3）疫病净化。①加强羊场消毒。羊口疮、支原体对环境不良因素的抵抗力非常弱，绝大多数消毒剂和兽医临床常用的消毒方法都能轻易将其杀灭[2]。选用2%氢氧化钠溶液、10%石灰乳或过氧乙酸等交替使用，对圈舍、饲养器具及周围环境进行消毒。第一阶段3 个月内每周消毒1 次，第二阶段3 个月内每月消毒不低于2 次，半年以后每月消毒不低于1次直至净化彻底。②加强羊群免疫接种。制定免疫程序，加强羊群口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘、羊传染性胸膜肺炎、羊口疮等疫苗的接种，做好羊布病的监测工作。

4）羊场疫病净化。

2017-2020 年，对该场采取消毒、防疫等疫病净化措施，羊口疮发病率、流产和死胎现象、羔羊死亡率发生了明显变化。

①成年羊、育成羊、羔羊的羊口疮发病率分别从2017 年的6.28%、9.38%、27.97%下降到2020 年的3.39%、5.63%、10.48%（表1）。

表1 2017-2020 年羊口疮发病情况

②流产、死胎母羊占比分别从2017 年的12.36%、10.11%下降到2020 年的4.46%、3.18%（表2）。

表2 2017-2020 年母羊流产、死胎情况

③3 月龄内的羔羊死亡率已从2017 年的54.25%下降到8.14%（表3）。

表3 2017-2020 年3 月龄内羔羊死亡情况

3 结 论

3.1 病羊剖检可见具有羊口疮和支原体感染症状

剖检病羊可见，不同程度呈现口腔生疮，肠系膜淋巴结充血、肿大，胃肠鼓气，肝脏表面有病灶，心包积液，肺脏干酪样坏死，肺脏与胸壁组织黏连，气管点状出血等。

3.2 病原核酸检测进一步判断为羊口疮病毒和支原体混合感染

通过对羊口疮、支原体、口蹄疫、小反刍兽疫等4 个病种的PCR 病原核酸检测，检出1 137 bp 的羊口疮病毒特异性目的基因条带和602 bp 的支原体目的基因条带，未检出口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒的目的基因条带。

3.3 对该场开展4 年的疫病净化已取得显著成效

2017-2020 年通过对该场开展疫病净化，成年羊、育成羊、羔羊的羊口疮发病率分别从2017 年的6.28%、9.38%、27.97%下降到2020 年的3.39%、5.63%、10.48%；流产、死胎占比分别从2017 年的12.36%、10.11%下降到2020 年的4.46%、3.18%；3月龄内的羔羊死亡率从54.25%下降到8.14%，疫病净化取得了显著效果。