淮北市人乳头状瘤病毒感染及其亚型分布特点

木朝宇，张晓梅，徐 珍，范德胜，刘培明,姚慧琳

人乳头状瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是一种诱发女性宫颈癌及生殖器病变的主要病原体,临床HPV基因亚型检测对发现宫颈癌高危病人及其早期防治有重要意义。不同国家或地区HPV的感染型别分布均存在差异性[1]。本研究利用PCR-反向点杂交技术,对3 536例临床样本进行了检测,以了解淮北地区HPV感染情况及其年龄和亚型分布情况,为本地区HPV疫苗接种计划提供参考,同时也为HPV病毒感染及宫颈癌的临床治疗提供依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象 2017年3月至2018年6月淮北矿工总医院妇科就诊、筛查和体检并接受HPV分型检测的女性3 536例，年龄18～94岁,共分为6组。其中≤30岁342 例,31～40岁 677例，41～50岁1 340例，51～60岁706例，≥61岁275例，年龄不详者196例。

1.2 试剂与仪器 人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒、核酸分子快速杂交仪，为中山大学达安基因股份有限公司配套仪器和试剂；核酸扩增仪为美国ABI 7500型PCR仪。

1.3 方法

1.3.1 样本采集 采集宫颈上皮脱落细胞标本置于样本保存液中，4 ℃冰箱储存备用。

1.3.2 核酸抽提 吸取500 μL细胞混悬液，12 000 r/min离心10 min后弃上清，余下操作参照试剂盒说明书进行。

1.3.3 PCR-反向点杂交技术 PCR核酸分子杂交及HPV基因分型的显色结果判定分析等过程均参考试剂盒说明书。试剂盒检测的亚型中包括18种高危亚型(HPV 16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73和82)以及10种低危亚型(HPV 6、11、40、42、43、44、54、61、81和83)。

1.4 统计学方法 采用χ2检验。

2 结果

2.1 HPV感染类型及阳性率 在受检的3 536例样本中，HPV阳性655例，阳性率18.52%。HPV阳性感染以单一亚型居多,占66.41%；单一亚型的感染率12.30%(435/3 536),高于多重感染率的6.22%(220/3 536)(χ2=77.72，P<0.01)；高危亚型的感染率11.59%(410/3 536),明显高于低危亚型的3.62%(128/3 536)和高低危混合型的3.31%(117/3 536)(χ2=160.00，P<0.01)(见表1)。多重感染的病例中，以二重感染为主，随着合并感染亚型数的增多，感染比例逐渐下降(见表2)。

表1 不同类型HPV感染的分布情况

表2 多重HPV感染的分布情况(n)

表3 不同年龄段的HPV感染分布情况[n；百分率(%)]

表4 不同年龄段HPV单一亚型的感染率比较[n；百分率(%)]

表5 不同年龄段HPV多重感染分布[n;百分率(%)]

2.3 HPV感染亚型的分布 28种亚型均被检出，总感染比例排前五位的亚型依次为HPV52、16、58、44、40型(见表6)。

表6HPV感染的各亚型分布情况[n;百分率(%)]

3 讨论

HPV属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属，是双链闭合环状 DNA 病毒，主要通过性传播以及接触感染。HPV的感染很普遍，有20%～46%的女性感染，大部分为一过性感染，约在6个月左右被机体免疫清除。仅有少数高危型HPV持续感染者，可导致宫颈癌的发生。因此，明确我国各地区HPV感染的基因型以及年龄分布特点，于我国HPV疫苗的研发和宫颈癌的早期防治具有重要意义。

HPV感染具有地域性以及种族差异[1]，在世界范围内，HPV感染均有其特定的优势亚型[2]，如在亚洲地区感染型别前3位依次为HPV16、33、56，东南亚地区的主要感染型别为HPV52、16、58、18[3-4]。在中国最常见的5种亚型为HPV16、18、52、58和39型[5]。我国不同的省份也有不同的流行趋势[6]。在安徽省内，各地区的流行也有差异[7]。本研究数据显示淮北地区女性HPV感染最常见的高危亚型感染依次为 HPV52、16、58、51和53型，其中52型的感染率最高(18.93%)，16型感染率次之(15.88%)，与国内的报道情况有所差异[8]。最常见的低危型依次为 HPV44、40、54、42 型，以44型的感染率最高(9.92%)。文献[6]报道我国很多地区低危亚型以HPV6和11型居多，这一结果与国内其他地区[6，9-12]的文献报道差异较大。

2005年我国一项有关妇女HPV感染与宫颈癌流行病学调查[13]显示，15～54岁女性HPV的平均感染率为15.0%，感染的年龄分布呈现两个高峰期，分别为20～25岁和40～45岁。本研究数据显示HPV感染率18.52%，51～60岁人群感染率最高，为20.39%，与国内的报道不一致。可能是本研究的人群均集中于医院，检测的范围受局限的影响。51～60岁人群感染率高，应与机体免疫力减低，激素水平下降，生殖道局部免疫力降低有关。不同的年龄组流行的优势亚型也有差异，其中41～50岁，51～60岁的优势亚型分别为16型、58型，而其他年龄组的优势亚型均为52型。在不同年龄段，HPV单一感染与多重感染率中，41～50岁人群阳性占比最高(分别为42.07%、34.09%)。提示淮北地区41～50岁女性在HPV阳性感染中占比最大，且16亚型为优势亚型。因此该年龄组的女性人群应引起临床的重视。

综上所述，本地区HPV感染以51～60岁人群的阳性检出率最高，阳性病例中以41～50岁人群占比最大，因此应重视对这两个年龄组人群宫颈癌的筛查及知识宣教工作。HPV感染的主要亚型为HPV52、16、58、44、40，而最新推出的HPV6、11、16、18、31、33、45、52、58等9种亚型的疫苗[14]对本地区女性HPV感染预防的作用有限，针对本地区特定女性人群开展宫颈癌防治工作和研发相应的HPV疫苗才会有效降低本地区宫颈癌发病率。