玉米须的干燥方法及提取方法研究*

冀德富 李欢欢 刘建国

(山西中医药大学中药学院，山西 晋中 030619)

玉米须又称玉米胡子、玉麦须、棒子毛，为禾本科植物玉蜀黍ZeamaysL.的干燥花柱和柱头，是《卫生部药材标准》1985 年版一部收录的常用药材品种之一[1，2]。玉米须含有多种有益于人体健康的成分，如黄酮类、甾醇类、多糖、有机酸、生物碱及维生素等，有显著的利尿、降血糖、抑菌、降压、增强免疫、抗癌等作用[3-5]。人们吃玉米习惯丢弃玉米须，实为可惜。鲜玉米须含水量高，不便于长期贮藏。常见的药材干燥方法有晒干、阴干、烘箱干燥、微波干燥等。目前尚未见系统研究玉米须干燥方法的相关报道，本实验采用上述4种干燥方法对鲜玉米须进行干燥，通过薄层色谱法对其展开情况进行研究，采用紫外分光光度法测定了玉米须不同干燥品中总黄酮的含量，确定了玉米须的干燥方法。表面活性剂可以在水中形成球状胶束[6]，非极性物质可以进入胶束内核或表面活性剂分子之间，从而增大这些非极性物质在水中的溶解度，达到增溶的目的。本实验对表面活性剂司盘60协同多种提取方法提取玉米须中总黄酮进行研究，为玉米须的进一步提取工艺优化提供参考。

1 实验材料

1.1 仪器设备 KD25B-C微波炉(顺德市美的微波炉制造有限公司)、BGZ-76电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司)、SB-5200 DTDN超声波清洗器(宁波新芝生物科技股份有限公司)、WD-9403F紫外仪(北京六一生物科技有限公司)、UV-6100S紫外可见分光光度计(上海元析仪器有限公司)等。

1.2 试药 鲜玉米须(收集于山西晋中农贸市场)；玉米须商品(安徽盛海棠中药饮片有限公司，批号2017120081)；芦丁(北京索莱宝科级有限公司，纯度HPLC98%，批号：804D026)；槲皮素对照品(上海金穗生物科技有限公司，纯度HPLC98%，批号：100081-201707)；司盘60(无锡市亚泰联合化工有限公司)、硅胶G粉、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、无水乙醇、乙酸乙酯等均为分析纯、水为蒸馏水。

2 实验方法与结果

2.1 干燥 精密称取4份鲜玉米须各20 g，分别采用阴干、晒干、50 ℃烘箱干燥和微波干燥的方式干燥至恒重，记录干燥时间。可知，鲜玉米须采用各干燥方法所需干燥时间由长至短依次为：阴干品>晒干品>50 ℃烘干品>微波干燥品，微波干燥所用时间明显最短。见表1。

表1 玉米须干燥实验结果

2.2 薄层色谱法

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品1.06 mg、槲皮素对照品1.09 mg，分别加甲醇溶解并定容于2 mL容量瓶，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取玉米须各干燥品及玉米须商品1 g，分别置于试管中，加甲醇8 mL，室温超声提取30 min，过滤，滤渣同法再提取1次，合并2次滤液，70 ℃水浴挥去大部分溶剂，再转移至2 mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

2.2.3 薄层鉴别 硅胶G-CMC-Na板的制备：称取硅胶G粉10 g置于研钵中，0.2%羧甲基纤维素钠溶液30 mL分2～3次加入，边加边沿顺时针方向轻轻研磨，使之形成无气泡的白色糊状液，将其均匀涂布于4～5块5 cm×10 cm的洁净玻璃板上，晾干，放入烘箱中，105 ℃活化30 min，取出，保存于干燥器中备用。

分别吸取供试品溶液、芦丁及槲皮素对照品溶液各5 μL，点于2块自制的硅胶G-CMC-Na板上，以乙酸乙酯∶甲酸∶水(8∶1.5∶1)为展开剂，在展开槽中饱和，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇液，晾干，置紫外灯(365 nm)处观察，见图1、图2。

注：a.玉米须阴干品b.芦丁对照品c.玉米须商品d.槲皮素对照品e.玉米须晒干品图1 阴干品玉米须 商品薄层图

注：a’.玉米须50℃烘干品b’.芦丁对照品c’.玉米须商品d’.槲皮素对照品e’.玉米须微波干燥品图2 烘干品玉米须 商品薄层图

由图1、图2可知，晒干品、50 ℃烘干品、玉米须商品的斑点情况无明显差异，阴干样品的斑点颜色明显较其他干燥品的清浅，微波干燥品的荧光斑点明显较其他干燥品的明亮，可能是因为微波干燥所用时间最短，化学成分被破坏的比较少。

2.3 玉米须干燥品及玉米须商品中总黄酮的含量测定

2.3.1 溶液的制备

2.3.1.1 供试品溶液的制备 精密称取玉米须阴干品4 g，置于带塞三角瓶中，加60%乙醇40 mL超声提取40 min，过滤，滤渣同法再提取1次，合并2次滤液于100 mL容量瓶，加60%乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.3.1.2 对照品溶液的制备 精密称定芦丁对照品8.06 mg于50 mL棕色容量瓶中，加60%乙醇溶解并定容，摇匀，即得。

2.3.2 测试波长的确定 精密移取芦丁对照品溶液和供试品溶液各3 mL，参照文献[7]的方法，即采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色体系进行显色、扫描，结果如图3、图4所示，芦丁对照品和玉米须供试品的最大吸收均在512 nm波长处，因此本实验在512 nm处测试样品。

图3 芦丁对照品紫外扫描图

图4 玉米须供试品紫外扫描图

2.3.3 线性关系的考察 精密移取3 mL、4 mL、4.5 mL、5 mL、5.5 mL与6 mL的芦丁对照品溶液，参照2.3.2项下方法完成显色，在512 nm处测吸光值N，计算N对芦丁质量浓度m的回归方程，得：N=0.0118 m-0.0052(r=0.9995)，表明芦丁在21.49～42.99 μg/mL与吸光值N呈良好的线性关系。

2.3.4 精密度实验 精密移取对照品溶液6份，各3 mL，按2.3.3项方法测定吸光度，结果为0.241、0.247、0.246、0.237、0.242、0.239，RSD=1.61%，表明仪器精密度良好。

2.3.5 稳定性实验 精密移取供试品溶液4 mL，按2.3.3项方法显色，分别于0 h、0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h测定吸光度，考察显色液的稳定性，结果为0.349、0.348、0.344、0.339、0.333、0.329，RSD=2.39%，因此供试显色液在4h内稳定。

2.3.6 重复性实验 取玉米须阴干品6份，每份约4 g，精密称定，按2.3.1.1项方法制备供试品溶液，按2.3.3项方法进行测定，计算总黄酮含量，结果为4.50 mg/g、4.56 mg/g、4.40 mg/g、4.53 mg/g、4.65 mg/g、4.54 mg/g，平均为4.53 mg/g，RSD=1.80%，结果表明本方法重复性良好。

2.3.7 加样回收实验 取已知总黄酮含量(4.53 mg/g)的玉米须阴干品6份，每份约2 g，精密称定，按样品含有量与对照品1:1的比例加入芦丁对照品溶液，按2.3.1.1项方法制备供试品溶液，按2.3.3项方法显色并测定吸光度，计算加样回收率。得出平均加样回收率为97.80%，RSD=1.92%，表明本方法准确度良好。见表2。

表2 加样回收率实验

2.3.8 样品含量测定 按2.3.1.1项方法制备其他玉米须干燥品及玉米须商品的供试溶液，按“2.3.3”项下方法测定吸光度，计算总黄酮的含量。结果显示，鲜玉米须微波干燥品和晒干品中总黄酮的含量较高，差异较小，玉米须商品中总黄酮含量稍低一些，阴干品中总黄酮含量最少，因此，玉米须不适合采用干燥时间较长的阴干法干燥，微波干燥法和晒干法均可以作为玉米须的理想干燥方法。见表3。

2.4 玉米须总黄酮的提取实验研究 鲜玉米须洗净，采用上述的微波干燥法干燥，粉碎成粗粉，备用。

2.4.1 超声水提取法 精密称取玉米须粗粉4 g，2份，分别置于编号为a、a’的带塞三角瓶中，a瓶里放入0.08 g的表面活性剂司盘60，a’瓶里不放，分别加入蒸馏水40 mL超声提取2次，每次40 min，抽滤，滤液合并于100 mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，即得样液a、a’。

表3 各样品总黄酮含量实验结果

2.4.2 超声醇提取法 精密称取玉米须粗粉4 g，2份，提取及定容溶剂为60%乙醇，其余按2.4.1项方法实验，得样液b、b’。

2.4.3 回流水提取法 精密称取玉米须粗粉4 g，2份，分别置于编号为c、c’的烧瓶中，c瓶里放入0.08 g的司盘60，c’瓶里不放，分别加水40 mL回流提取2次，每次40 min，抽滤，滤液合并于100 mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，即得样液c、c’。

2.4.4 回流醇提取法 精密称取玉米须粗粉4 g，2份，提取及定容溶剂为60%乙醇，其余按2.4.3项方法实验，得到样品液d、d’。

2.4.5 微波水提取法 精密称取玉米须粗粉4 g，2份，分别置于编号为e、e’的带塞三角瓶中，e瓶里放入0.08 g的司盘60，e’瓶里不放，分别加入蒸馏水40 mL，微波提取2次，每次1 min，抽滤，滤液合并于100 mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，即得样液e、e’。

2.4.6 微波醇提取法 精密称取玉米须粗粉4 g，2份，提取及定容溶剂为60%乙醇，其余按2.4.5项方法实验，得到样品液f、f’。

2.5 样品测定 对上述6组供试液按“2.3.3”项方法测定，计算玉米须总黄酮的提出率。见表4。

由表4可知，不同提取方法中，玉米须总黄酮的提取率。(1)加表面活性剂司盘60的实验显示：回流醇提法>超声醇提法>超声水提法>回流水提法>微波醇提法>微波水提法。(2)不加的实验显示：微波醇提法>回流醇提法>超声水提法>回流水提法>超声醇提法>微波水提法。由此表明表面活性剂司盘60协同超声(水/60%乙醇)提取和回流(水/60%乙醇)提取可以促进玉米须总黄酮的提出，而在微波(水/60%乙醇)提取中，表面活性剂司盘60没有作用。

表4 提取样品测定结果

3 讨论

微波是频率在300MHz～300GHz的电磁波。微波干燥，其传热、温度梯度、蒸汽压迁移方向均一致，它具有使物料受热均匀、干燥快速、效率高等优点[8]。本实验首次研究了鲜玉米须的干燥方法，通过对比鲜玉米须的阴干法、晒干法、50 ℃烘干法及微波干燥法，发现微波干燥法所需时间明显少于阴干、晒干等干燥方法。微波干燥法有着省时、操作简便、温度可控、受天气影响较小等优点，因此，在鲜玉米须的干燥中值得推广。

本实验研究发现，在回流提取和超声提取中，表面活性剂司盘60的加入可以促进玉米须中总黄酮的提出，为后续深入开展表面活性剂协同提取玉米须中药效成分的研究提供了参考依据。