不同HPV感染亚型与阴道常见微生物感染的相关性研究

凌艳芝，刘丽文，黄 蕾，屠浚溶，李 琪，童望娇

(长沙市第一医院 妇科，湖南 长沙410000)

据统计，每年在全球范围内大约会出现50多万例宫颈癌患者，其中有近26万例患者因宫颈癌而导致死亡[1-2]。目前临床已明确人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈病变甚至宫颈癌密切相关，其中16、18型HPV对女性生殖道持续性感染状态最为高危[3-4]。目前研究发现，阴道感染与HPV感染之间密切相关，它在生殖道HPV感染和宫颈癌前病变甚至宫颈癌发生中都可能发挥了一定的作用[5-7]，而其中阴道内各种微生物感染导致的菌群平衡失调对引发HPV感染方面有着重要意义。本研究通过收集并分析行HPV分型检测且同时行阴道微生物检测的743名患者的检查结果，来分析HPV不同感染亚型与阴道内常见微生物之间的关系，为HPV感染的预防、检测和诊疗方案优化提供一定的科学依据。

1 对象及方法

1.1 研究对象

选取2020.04.01至2020.10.31期间在长沙市第一医院妇科门诊就诊，行HPV分型检测且同时行阴道常见微生物检测的743名患者作为研究对象。将HPV检测阳性的患者分成三组：A组即HPV16、18型感染组；B组即除16、18其他高危型HPV感染组；C组即低危型HPV感染组。根据选择标准确定365名HPV阳性者，其中A组共84人，B组共233人，C组共48人；同时从门诊健康体检人群中HPV检测阴性的患者通过系统抽样法随机抽取378名作为D组即对照组。743名患者年龄为16-74岁，各组间患者年龄情况无统计学差异。

1.2 方法

1.2.1阴道常见微生物检测 通过免疫荧光法，将免疫显色试剂中的各种抗体成分分别来标记宫颈上皮脱落细胞以及阴道分泌物中的各种病原菌抗原，同时采用支原体药敏培养基进行支原体分离培养及鉴定，采用沙眼衣原体抗原检测试剂盒对沙眼衣原体进行检测。

1.2.2HPV分型检测 通过荧光PCR+膜杂交法的方法来检测HPV21种亚型，即使用PCR技术扩增从宫颈细胞中提取出来的DNA，通过导流杂交的原理，将提前固定在低密度基因芯片膜上的DNA探针与得到的PCR产物进行杂交、显色，最后通过得到的薄膜条HPV分布图的阳性特点来判断HPV感染的类型。

1.3 统计学分析

采用SPSS23.0统计软件，计数资料用率表示，率的比较采用χ2检验，同时计算OR值及其95%CI描述风险度。多组间比较采用χ2检验，以α=0.05为检验标准，若P<0.05则表明有统计学差异，必要时予以采用Fisher确切概率法以及Bonferoni法校正检验水准。

2 结果

HPV各阳性组及HPV阴性组之间合并解脲脲原体(UU)、人型支原体(MH)、沙眼衣原体(CT)、细菌性阴道病(BV)、外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)、滴虫性阴道炎(TV)感染发生情况见表1。

表1 HPV16、18型组与HPV阴性组合并各种阴道炎对比情况

4组合并发生解脲脲原体(UU)感染率分别为48.81%(41/84)，40.34%(94/233)，47.92%(23/48)，28.84%(109/378)，A、B、C组分别与D组相比差异有显著统计学意义，而四组在MH(χ2=6.045，P=0.109)、BV(χ2=1.363，P=0.714)、VVC(χ2=4.83，P=0.185)、CT(χ2=2.234，P=0.525)、TV(χ2=1.097，P=0.778)之间感染率无明显差异性。

3 讨论

宫颈癌是常见的一种生殖道恶性肿瘤，在女性生殖系统中的发病率及致死率均位于第一位[8]，虽然近年来随着社会经济的发展，宫颈癌的筛查已逐渐得到完善和广泛应用，但由于人口基数大等各种原因的影响，我国仍然是一个宫颈癌高发国家，这对广大女性的生殖健康以及身心健康都构成了很大威胁。而宫颈癌与HPV感染诱导宫颈病变的发生相关，特别是HR-HPV感染，其中又以16、18型最高危，是导致SIL以及宫颈癌变的重要病因[9-10]。而HPV感染越来越被认为与阴道微生物感染密切相关。

BV是阴道内优势菌群减少、而其他厌氧菌大量生长繁殖所引发的阴道感染。BV发生的原因可能与性伴侣过多、过早进行性生活以及滥用阴道灌洗液等因素有关。目前有很多学者证实了BV与HPV感染的发生甚至宫颈病变的发生都有着一定的联系，可能机制是宫颈上皮细胞可因为BV感染后加速降解及脱落，同时BV会影响如白细胞介素-1β、白细胞介素-10等一些免疫因子的分泌，从而增加HPV病毒易感性，且上皮细胞分泌的分泌性白细胞蛋白酶抑制因子被BV降解后数量的降低抑制了机体抵抗HPV的能力最终引起HPV感染。有研究提示BV与HR-HPV所导致的宫颈病变甚至与宫颈癌的进展有关[11]。Meng等[12]通过研究发现HPV感染与BV有一定的联系，而与TV、VVC之间均无明显相关性。但在本研究中，BV与不同亚型HPV感染之间均无明显相关性。考虑这个结果不排除与数据样本例数较少引起，因此日后需继续加大样本量进一步研究。

VVC是由假丝酵母菌感染发生的一种真菌性阴道炎，TV是由阴道毛滴虫引起的一种临床上较常见的性传播疾病。目前对于VVC、TV是否与生殖道HPV感染，以及是否与宫颈病变相关尚还需要论证。有研究认为TV、VVC与HPV感染之间无明显相关性[13-14]。

CT是一种生活在宫颈细胞内的原核生物，发病的原因可能是与机体免疫力下降以及宫颈黏膜的褶皱性特点等导致机体无法完全清除病原体从而发生感染有关。而支原体是一种没有细胞壁故具有多种形状的原核生物，一般将它分为UU和MH两种。当机体在免疫功能下降时，支原体可以穿过细胞来干扰细胞正常的代谢，从而引起细胞损伤而发病。支原体已经被证实了与女性盆腹腔炎症、不孕症、稽留流产等疾病都有着一定的联系[15]，但其与HPV感染之间的联系尚未得到证实。Liang等[16]学者认为UU和CT感染均能够促使HPV感染的发生发展，且UU是HPV促进宫颈癌前病变继续发展成为宫颈癌的一个协同因子。刘娜等[17]通过分析82例患者高危型HPV感染与支、衣原体之间的关系，得出支原体与HR-HPV感染之间相关，而CT与之无明显相关性。本研究发现，CT与HPV感染之间无明显相关性，而UU感染与HPV感染密切相关。同时，MH感染仅与低危型HPV感染的发生呈正相关性。

近年来越来越多的学者提出恢复阴道微生态内环境稳定对于HPV转阴率以及SIL转阴率都有着非常重要的意义，且中西医提倡的“内外兼治”法也被证实具有明显的临床效果。在本研究中也支持HPV感染与阴道微生物感染之间存在着一定联系的结论，建议对存在MH或者UU感染者，应常规进行HPV检测，同时在治疗HPV感染的同时也应注重恢复阴道微生态平衡状态，根据具体实际情况进行用药治疗。