心脑一号颗粒剂生产工艺研究

周 萍 葛 岩 茹 妍 马子君▲

1.江苏省新沂市中医医院药剂科，江苏新沂 221400；2.上海药明津石医药科技有限公司临床部，上海 200000；3.甘肃省金塔县人民医院药剂科，甘肃金塔 735300

心脑一号颗粒剂是新沂市中医医院心内科名老中医临床应用多年的验方，由丹参，桃仁，红花，川芎，当归，白芍，炙黄芪，伏神，白术，炙甘草等药材组成。具有治疗气滞血瘀之心悸、失眠、多梦、健忘、胸痛等症的功效。传统汤剂携带不方便，煎煮时间长，新剂型颗粒剂与原方具有相同的疗效，但具有服用量小、服用方便等特点[1-5]。心脑一号颗粒剂采用现代提取技术，本研究探索心脑一号颗粒剂的生产工艺。对处方中各药物通过水提醇沉及醇提正交试验，找到各药物最佳提取工艺，以建立心脑一号颗粒剂院内制剂适合大型生产的工艺。为医院制剂备案研发提供参考[6-8]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

精宏DK-S24恒温水浴锅（上海精宏实验仪器有限公司）；十万分之一电子天平DZTP002（赛多利斯集团）；精宏GRX20热风循环烘箱（上海精宏实验仪器有限公司）；电子调温电热套S20（天津市泰斯特）；电子恒速搅拌器2011378（常州国宇仪器制造有限公司）；离心机TG18G（上海赫田科学仪器有限公司）。

1.2 试药

丹参、桃仁、红花、川芎、当归、白芍、炙黄芪、伏神、白术、炙甘草（新沂市中医医院草药库）、乙醇（北京化工厂，批号：200102），糊精（嘉兴市天磊化工有限公司，批号：200103），甜蜜素（嘉兴市天磊化工有限公司，批号：200506）。

2 实验方法

2.1 提取工艺研究

2.1.1 水提工艺研究 取丹参150 g，桃仁50 g，红花 50 g，川芎 150 g，当归 150 g，白芍 150 g，炙黄芪 150 g，伏神 150 g，白术 150 g，炙甘草 100 g，通过对药材提取的加水量、提取时间、提取次数等因素的考察，以L9（34）开展正交试验，出膏率为考察指标，并进行方差分析，考察水提工艺和最佳因素。

2.1.2 醇沉浓度的选择 为了达到纯化的目的，采用乙醇沉淀的方法以去除水提液中的杂质，按最佳工艺条件（加水量8倍，煎煮1.5 h，煎煮3次）得水煎液四份，浓缩至相对密度为1.10～1.20（60℃），搅拌下加乙醇至醇沉浓度，放置过夜，滤过。醇沉浓度选择了40%、50%、60%、70%四个浓度[9-10]。

2.1.3 小试实验数据 取丹参150 g，桃仁50 g，红花 50 g，川芎 150 g，当归 150 g，白芍 150 g，炙黄芪150 g，伏神 150 g，白术 150 g，炙甘草 100 g，加 8 倍水煎煮3次，每次1.5 h。合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10～1.20（60℃）左右，放冷，加乙醇至醇沉浓度60%，边加边搅拌，放置过夜，滤过，回收乙醇，减压干燥，得浸膏粉。

2.2 制粒工艺研究

2.2.1 加辅料量的考察 ①根据经验，选用糊精作为辅料，取不同比例的浸膏与辅料混合，用适量的85%乙醇作为润湿剂，筛粒，整粒，60℃以下干燥至恒重，确定吸湿率、成型速度和溶解速度。②玻璃干燥器在室温下平衡48 h，干燥器内相对湿度为75%。在已干燥恒重的称量瓶底部放入约1 g的样品，动摇其均匀分布，准确称量，干燥器的氯化钠过饱和溶液，48 h后，计算吸湿百分率[11]。吸湿百分率=（吸湿后药粉重量-吸湿前药粉重量）/吸湿前药粉重量×100%。③成型性测定：取样品10 g，依次通过1号筛和4号筛，能通过1号筛但不能通过4号筛的合格颗粒除以样品重量即为成型率。以成型率100%为25分。④溶解性测定：取0.5 g样品颗粒加入10 ml离心管（最小量程 0.1 ml），加入 10 ml沸水，搅拌 5 min，3000 r/min离心15 min，弃上清液，80℃烘干至恒重，计算溶解率。以溶化率100%为25分[12-13]。溶化率（%）=溶化颗粒重/总颗粒重× 100%。

2.2.2 湿润剂的选择 取浸膏粉10 g，加1.5倍糊精混合，然后喷到不同浓度的乙醇混合10 min，收集不能通过1号筛和能通过五号筛的颗粒和粉末，计算粗粒和细粉的总比例。

2.2.3 休止角测定 将3只漏斗串联并固定于水平放置的坐标纸上适宜高度处，使漏斗下口距坐标纸的距离为H，将样品沿漏斗壁倒入最上面的漏斗中，直到最下面漏斗药粉的圆锥体尖端接触到漏斗口为止，此时由坐标纸测出圆锥体底部的半径R，计算出休止角（tga=H/R）。

2.2.4 颗粒剂吸湿性考察 将制备好的颗粒干燥至恒重后，将约1 g样品放在5 ml的平称瓶底部，轻轻摇晃均匀，准确称量，放入装有氯化钠过饱和溶液的干燥器中（称量时瓶盖打开），测定6、12、24、48、60 h的颗粒吸湿率。

2.2.5 甜味剂加入量的考察 考虑到大多数中药是苦的，患者会感到阻力，为了便于颗粒成型，加入一定量的甜蜜素作为基本配方成分。取适量浸膏粉，加入3倍糊精，分成4份，分别加入0.2%、0.5%、1.0%、1.5%甜蜜素，品尝味道[14]。

2.2.6 三批中试试验 以三批中试试验物料数据表进行投料，计算理论产量（袋）、实际产量（袋）、成品率（%），验证工艺稳定性。见表1。

表1 三批中试试验物料数据表

3 结果

3.1 提取工艺研究

3.1.1 水提工艺研究 水提正交实验结果显示，按出膏率分析，可见影响提取的因素的顺序为A＞B＞C，最佳工艺条件为 A2B2C3，确定最佳水提工艺为加水量8倍，煎煮1.5 h，煎煮3次，见表2～ 4。

表2 因素水平表

3.1.2 醇沉浓度的选择 结果表明醇沉浓度为60%醇沉效果最佳，故选择60%的醇沉浓度，见表5。

表5 不同醇沉浓度测定结果

3.1.3 小试实验数据 小试实验数据出膏率与最佳提取工艺数据基本一致，表明提取工艺稳定可行，见表6。

表6 小试出膏率

3.2 制粒工艺研究

3.2.1 加辅料量的考察 考察结果显示，1∶1.5浸膏和糊精比的综合评分值较高，考虑药材批次提出量的不同，最终选择糊精作为该颗粒剂的成型辅料比例为1∶1～1∶1.5，见表7～11。

表7 不同辅料及不同比例考察

3.2.3 颗粒剂休止角测定 一般要求颗粒剂填充

表3 正交试验设计表及结果

表4 方差分析结果

表8 不同比例的吸湿百分率

表9 不同比例的成型性

表10 不同比例的溶解性

表11 不同比例综合评分

3.2.2 湿润剂的选择 根据表格中粗粒与细粉的总和百分率的评价指标，选择总和百分率最低的4.43%为最佳乙醇浓度即85%的乙醇作为湿润剂。见表12。物料的休止角应控制在35°以下，实验结果见表13。结果符合颗粒剂的要求。

表12 湿润剂的选择

表13 颗粒剂休止角

3.2.4 颗粒剂吸湿性考察 应《中华人民共和国药典》[15]要求，颗粒剂水分不得超过8%，实验结果表明该颗粒剂60 h内吸湿性符合标准，投入生产时须在制粒后的60 h内进行内包装，见表14。

表14 颗粒剂吸湿性

3.2.5 甜味剂加入量的考察 实验结果表明甜蜜素比例为0.5%时，口感适中，见表15。

表15 甜味剂加入量

3.2.6 三批中试试验结果 三批中试试验数据表明成品率均达到95%以上，且成品率数据稳定，表明该工艺方法稳定可靠，见表16。

表16 三批中试试验数据

4 小结

通过对药材提取的加水量、提取时间、提取次数等因素的考察，以出膏率为考察指标，考察水提工艺和最佳因素，得出最佳工艺为加水量8倍，煎煮1.5 h，煎煮3次。为了达到纯化的目的，采用乙醇沉淀的方法以去除水提液中的杂质，结果表明醇沉浓度为60%醇沉效果最佳，故选择60%的醇沉浓度。加入浸膏与糊精比例为1∶1.5，甜蜜素量为0.5%，选择85%的乙醇作为润湿剂。经验证成型性较好，含水量适宜，颗粒制备工艺稳定可行，可为院内制剂备案制研发奠定坚实基础。