间接法建立长春地区成人血清淀粉酶参考区间

李雪文，徐攀洋，何 冰，邢东洋，夏 薇，许建成

（1.吉林大学第一医院检验科，吉林 长春 130021；2.北华大学医学技术学院，吉林 吉林 132013）

血清淀粉酶参考区间的准确性对胰腺疾病的诊断十分重要。目前，我国临床实验室检测项目的参考区间大多来自相关行业标准、《全国临床检验操作规程》或试剂说明书[1]，可能并不适用于所有地区的实验室，因此建立适用于不同地区人群的参考区间尤为重要。建立参考区间的方法主要为直接法和间接法。直接法是按照预定的标准纳入参考个体、进行实验项目测定、分析结果，进而建立参考区间。间接法是通过对实验室信息系统中已有的数据进行分析来建立参考区间[2]。美国临床实验室标准化协会（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）和国际临床化学联合会（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）推荐使用直接法建立参考区间[3]，但由于过程繁琐且成本过高而难以实现。间接法建立参考区间简便且成本低，逐渐被广泛应用。本研究拟运用间接法建立适用于长春地区的血清淀粉酶参考区间，以期为临床相关疾病的诊断提供更可靠的参考。

1 材料和方法

1.1 数据来源

收集2015年1月—2020年9月吉林大学第一医院健康体检人群的血清淀粉酶检测结果。

1.2 样本采集及处理

采用黄色真空采血管（广州阳普医疗科技股份有限公司）采集所有对象空腹肘前静脉血4 mL，剔除脂血、溶血等不合格标本，常温送至检验科。

1.3 仪器与试剂

采用4，6-亚乙基-对硝基苯-α-D-麦芽七糖法检测血清淀粉酶，试剂及标准品购自四川迈克公司，质控品购自美国伯乐公司。检测仪器为7600-210全自动生化分析仪（日本日立公司）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0软件和LMS chartmaker Light 2.54软件进行统计分析。采用Excel 2007软件制作图表。采用Kolmogorov-Smirnov检验分析数据的正态性。非正态数据进行自然对数转换后再检验其正态性。采用“Stem-and-Leaf & Box Plots”方法剔除离群值。不同性别之间比较采用Mann-Whitney U检验，不同年龄组之间比较采用Kruskal-Wallis H检验。采用LMS法拟合连续百分位数曲线分析血清淀粉酶随年龄的变化。将剔除离群值后的数据从小到大排列，取第97.5百分位数（P97.5）和第2.5百分位数（P2.5）作为参考区间的上、下限。

2 结果

2.1 血清淀粉酶参考区间的建立

血清淀粉酶数据呈偏态分布，经自然对数转换后呈正态分布。剔除256个离群值，最终纳入4 981例研究对象，其中男2 839名、女2 142名，年龄20～89岁。自然对数转换及剔除离群值前后数据分布见表1。根据年龄分为20～30岁组、31～40岁组、41～50岁组、51～60岁组、>60岁组。各年龄组男、女性之间血清淀粉酶差异有统计学意义（P<0.05），不同年龄组之间差异均无统计学意义（P>0.05）。男性和女性的P97.5曲线随年龄呈上升趋势，P2.5、第25百分位数（P25）、第50百分位数（P50）和第75百分位数（P75）曲线则较为平缓。见图1。建立的参考区间为：男性31～102 U/L，女性33～107 U/L。

表1 血清淀粉酶数据自然对数转换及剔除离群值前后数据分布

图1 血清淀粉酶连续百分位数曲线

2.2 血清淀粉酶参考区间的比较

本研究血清淀粉酶参考区间存在性别差异，与行业标准[4]不同。行业标准的参考区间上、下限均高于本研究。见表2。

表2 本研究与行业标准血清淀粉酶参考区间的比较

3 讨论

血清淀粉酶在急性胰腺炎中的敏感性为87.0%、特异性为88.6%[5]，对急性阑尾炎、肠梗阻也有辅助诊断作用[6]，因此建立准确的参考区间尤为重要。间接法建立参考区间成本低、数据来源充足、操作简便，但对数据分析时，易纳入潜在疾病患者的数据，需使用合适的方法剔除离群值。

行业标准推荐采用Dixon法剔除离群值[7]，但CLSI EP28-A3c文件[3]中提出在同侧异常值相近时，Dixon法易受掩盖效应的影响，导致离群值不能被完全剔除。“Stem-and-Leaf & Box Plots”法将≥3倍四分位数间距的离群值剔除，此方法要求数据呈正态分布，偏态数据会导致正常值被剔除或出现离群值的掩盖效应[8]。本研究数据呈偏态分布，应用自然对数即可转换为正态分布。百分位数曲线可为年龄分区提供参考依据，本研究男性与女性P97.5分位数曲线呈上升趋势，这可能是各年龄段人数分布不均所致。确定参考区间上、下限的方法包括参数法和非参数法，参数法要求数据呈正态分布，常以±1.96s作为参考区间的上、下限。EP28-A3c指南中推荐非参数法作为确定参考区间的方法之一，同时要求样本量超过120例，我国已有研究运用非参数法建立参考区间[9-12]。本研究数据分布及样本量满足要求，因此选用非参数法建立参考区间，以P97.5、P2.5作为参考区间上、下限。

本研究建立的血清淀粉酶参考区间与行业标准不同，可能是因为地理环境、饮食习惯、检测方法、样本量差异所致。行业标准中参考区间上限显著高于本研究，且参考区间较宽。这可能因为行业标准纳入的参考人群分布较广，而本研究仅限于长春地区。

综上所述，本研究利用实验室信息系统中的数据初步建立了适用于长春地区人群的血清淀粉酶参考区间，结果存在性别差异，且上、下限与行业标准存在一定的差异。本地区临床诊断相关疾病时应考虑性别差异，目前全国各大医院的信息系统已逐步完善，为间接法创造了便利条件，各地区实验室可建立更加合理、准确的参考区间。