淋巴细胞激活基因-3 分子的生物学功能及应用

李闰，郑秀玉 综述，王健 审校

国药中生生物技术研究院有限公司第四研究室，北京 102600

免疫检查点抑制剂为肿瘤治疗提供了一种新的机制，程序性死亡蛋白-1（programmed death protein-1，PD-1）／细胞程序性死亡-配体 1（programmed deathligand 1，PDL1）通路是目前设计用于免疫检查点抑制剂药物开发的主要靶点，已在许多实体瘤和血液瘤中取得了较好的临床效果，但该类药物具有一定的耐药性和不良反应，目前的研究致力于开发新的抑制途径，这些抑制途径参与癌症中的免疫调节［1］。淋巴细胞激活基因-3（lymphocyte activation gene 3，LAG-3），是一种新兴的可靶向抑制的免疫检查点分子。LAG-3 分子与CD4 分子位于同一条染色体上，尽管两种分子的氨基酸序列仅有20%的相似性，但其结构特性有相同的胞外折叠模式。因此，LAG-3分子也可结合主要组织相容性复合体Ⅱ（major histocompatibility complex classⅡ，MHCⅡ）分子，甚至具有比CD4 分子更高的亲和力。LAG-3 表达于活化的人T 细胞和NK 细胞，在炎症或肿瘤环境中，LAG-3和PD-1、TIM3 等抑制性受体共同表达于T 细胞表面，导致T 细胞功能障碍。在许多恶性肿瘤中，LAG-3主要表达于肿瘤浸润Treg 细胞。研究发现，LAG-3在肾细胞癌、黑色素瘤、淋巴瘤和其他肿瘤的肿瘤浸润淋巴细胞上的表达增加［2］，并且在小鼠中同时敲除LAG-3 和PD-1 较单个敲除肿瘤体积明显减少，在卵巢肿瘤、黑色素瘤、淋巴瘤和多个骨髓瘤观察到同样的结果［3］。目前临床上已有多种靶向LAG-3的药物正在研发，LAG-3 已是肿瘤免疫治疗中最有前景和潜力的靶点之一，本文旨在介绍LAG-3 的分子结构及其配体，以及LAG-3 分子在多种疾病中的应用及药物开发。

1 LAG-3 的分子结构

LAG-3 于 1990年被 Frederic Triebel 发现，2007年第7 届国际人类白细胞分化抗原专题会议命名为CD223。LAG-3 位于人 12 号染色体（12p13.3），基因全长6.6 kb，包括8 个外显子，相对应的cDNA 编码含有498 个氨基酸的膜蛋白，成熟蛋白由470 个氨基酸组成，预测相对分子质量为 51 295，PL 为 10.9［4］。LAG-3 分子是免疫球蛋白超家族成员［5］，为跨膜蛋白，包括胞外段、跨膜区和胞内段。

LAG-3 胞内段包括3 个区域，第1 个区域含有丝氨酸磷酸化位点；第2 个区域含有独特的Kieele基序；第 3 个区域含有谷氨酸-脯氨酸（Glu-Pro，EP）重复序列［6］。LAG-3 胞外段含有 D1 ~ D4 四个结构域，类型为 1 个Ⅴ区和 3 个C2 区［7］。Ⅴ区具有特异性，因为在其结构域的中间有1 个额外的环，还含有1 个异常的链内“二硫桥”。该基因编码2 个免疫球蛋白超家族结构域，因此，LAG-3 分子可能是通过一个预先存在的基因复制演变而来［4］。疏水性前导肽（28 aa）由外显子Ⅰ（19 aa）和外显子Ⅱ（9 ／ 50）编码；胞外区由外显子Ⅱ（41／50）、Ⅲ（101 aa）、Ⅳ（90 aa）、Ⅴ（92 aa）和Ⅵ（81 aa）编码；跨膜区由外显子Ⅴ（44 aa）编码；外显子Ⅷ（21 aa）为高电荷区。胞外区包括8 个半胱氨酸残基和4 个潜在的N-连接糖基化位点（Asn-X-Ser，Thr）。用 EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ或XbaⅠ限制性内切酶消化LAG-3 基因，发现与基因组克隆的限制性内切酶图谱一致，表明LAG-3基因以单拷贝基因的形式存在于人类单倍体基因组中［4］。LAG-3 分子可在转录水平被金属蛋白酶ADAM10 和ADAM17 分子消化切割，使其胞外段从细胞膜表面脱落，释放可溶性LAG-3 分子（soluble LAG-3，sLAG-3）［8］。

LAG-3 与CD4 分子有高度同源性。对LAG-3和CD4 的肽序列和外显子 ／ 内含子结构的比较分析表明，这两种分子间密切相关，并且这两种基因均位于12 号染色体短臂的远端。与LAG-3 相同，在CD4分子中，在结构域1 与3 及2 与4 之间也存在显著的内部序列同源性［9］。

2 LAG-3 分子相关配体

2.1 Lag-3-MHCⅡ 1992年，Baixera 等通过细胞黏附试验发现的LAG-3 可结合MHCⅡ分子，进而发现LAG-3 融合蛋白可结合表达MHCⅡ分子的B 细胞。MHCⅡ分子表达于抗原提呈细胞（antigen presenting cell，APC）和肿瘤细胞表面。sLAG-3 分子对MHCⅡ分子的亲合力大于CD4［10］，在某些情况下，MHCⅡ分子优先结合 LAG-3，并且 LAG-3 与MHCⅡ类分子的结合可阻断CD4 与MHCⅡ分子的相互作用。通过突变分析检测LAG-3 分子与MHCⅡ分子的结合力，发现LAG-3 的前2 个N-末端区域，即D1、D2 包括D1 结构域上的凸起，对结合MHCⅡ类分子起重要作用［11］。胞内段无尾LAG-3 突变体不与MHCⅡ分子相互作用，表明LAG-3 分子胞内段保守的Kieele 基序对与下游信号分子的相互作用是必须的［12］。

LAG-3 与MHCⅡ分子的相互作用可抑制T 细胞的增殖及细胞因子分泌，下调免疫应答。尽管CD8+T 细胞不表达MHCⅡ分子，但LAG-3 阻断对CD4+T 和CD8+T 细胞同样有效。使用两种不同结合位点的LAG-3 抗体，即不阻断LAG-3-MHCⅡ相互作用的C9B7W 和强烈阻断LAG-3-MHCⅡ相互作用的抗体28G10 进行体外试验，评估LAG-3 抗体的功效是否依赖于阻断LAG-3 与MHCⅡ结合的能力，结果发现，这两种抗体间的T 细胞体外试验无显著差异，表明LAG-3 靶向抗体的T 细胞增强活性与其破坏LAG-3-MHCⅡ相互作用的能力无关［13］。尽管CD8+T 细胞和NK 细胞不与MHCⅡ分子相互作用，但LAG-3 依然抑制其功能。这些研究表明，LAG-3的免疫抑制功能可能由其他配体介导。

LAG-3 对T 细胞具有负调控作用。LAG-3 在Treg 细胞表面表达，是产生IL-10 的Tregs 的候选表型表面标记，人PBMCs 中的CD4+CD25-LAG-3+Treg细胞均能产生高水平的IL-10，并抑制B 细胞抗体的产生［14］；LAG-3+Treg 特异性表达早期生长反应基因 2（early growth response gene 2，EGR-2），是诱导 T细胞耐受的关键分子［15］。在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者中，LAG-3+Treg 与疾病活动成反比，尤其是RA 的有效治疗导致LAG-3+Treg 水平升高，CD25+Treg 水平降低，提示LAG-3+在降低炎症中起关键作用［14］。另外，有研究显示，在颈动脉狭窄患者中检测到LAG-3+Treg 细胞明显上调，表明LAG-3+Treg 亚群从早期即参与动脉粥样硬化斑块形成的炎症过程。提示LAG-3+Treg 细胞下调炎症反应［16］。

2.2 LAG-3-FGL-1 2019年2月，WANG 等［17］发现了LAG-3 的另一种重要配体，即纤维样蛋白1（fibrinogen-likeprotein 1，FGL-1）。FGL-1 属于纤维蛋白原家族，与纤维蛋白原β 和γ 亚基的羧基末端氨基酸同源性高，但其不具有纤维蛋白凝块形成所必需的血小板结合位点、交联区和凝血酶敏感位点。FGL-1由 1 个 coil-coil 结构域（coil-coil domain，CCD）和一个类纤维蛋白原结构域（fibrinogen-like domain，FD）组成［18］。通过结构域缺失研究，与LAG-3 结合的功能结构域为FD［17］。在LAG-3 蛋白胞外段的4 个结构域中，D3、D4 结构域缺失不影响FGL-1 的结合，而单独的D1 或D2 结构域的缺失降低其结合活性，表明D1 和D2 均参与FGL-1-LAG-3 的相互作用；D1 结构域中的单点突变（Y73F）先前被证明破坏MHCⅡ结合［12］，然而，这种突变并不影响FGL-1-Ig结合，表明FGL-1-LAG-3 与MHCⅡ-LAG-3 的结合机制不同。此外，LAG-3+T 细胞与C9B7W（结合LAG-3 D2 结构域而不阻断LAG-3-MHCⅡ相互作用的抗LAG-3 mAb）预孵育，导致FGL-1-LAG-3 结合完全被抑制。之后，用MHCⅡ融合蛋白染色的LAG-3+细胞，即使在FGL-1-Ig 过量100 倍的情况下，结合也无明显减少。表明FGL1 以独立于MHCⅡ的方式与LAG-3 相互作用，这种相互作用涉及FGL1 的FD 结构域和 LAG-3 D1-D2 结构域［17］。

FGL-1 mRNA 和蛋白表达于人正常的肝脏和胰腺组织中［19］。Oncomine 数据库分析显示，与正常组织相比，包括肺癌、前列腺癌、黑色素瘤和结直肠癌在内的人类实体瘤中FGL-1 mRNA 表达上调，另外，高血清FGL-1 还与帕金森患者预后不良有关［17］。研究结果显示，FGL-1 基因敲除肿瘤生长显著减慢，同样，FGL-1 单抗可显著抑制肿瘤生长。表明FGL-1作为LAG-3 主要配体诱导T 细胞抑制功能和免疫逃避。此外还发现，FGL-1 基因敲除小鼠中白细胞数量显著增加；FGL-1 抗体或LAG-3 抗体处理小鼠的CD4+或CD8+TIL 中的活化或功能标记物［如CD69、LY6C、颗粒酶 B（granzyme B，GZB）、CD4 和 Fas］显著增加。表明通过基因敲除或抗体阻断沉默FGL1-LAG-3 相互作用，可刺激T 细胞在肿瘤微环境中增殖和活化，促进肿瘤免疫［17］。

2.3 Lag-3 的其他配体 LAG-3 可能还具有其他一些配体。已知LAG-3 被广泛的糖基化，可与半乳糖凝集素-3（Galectin-3）相互作用。Galectin-3 是一种相对分子质量31 000 的凝集素，可通过多种机制调节 T 细胞反应［20］。LAG-3 对 Galectin-3 体外抑制CD8+T 细胞IFNγ 的释放是必须的，其在肿瘤微环境中的多种细胞上表达，可与肿瘤特异性CD8+T 细胞上的LAG-3 相互作用调节抗肿瘤免疫应答［21］。

另一种可能以类似方式与LAG-3 结合的潜在配体是肝窦内皮细胞凝集素（liver and lymph node sinusoidal endothelial cell C-type lectin，LSECtin），其是DC-SIGN 家族成员的细胞表面凝集素［22］。LSECtin 在肝脏中表达，并且在黑色素瘤组织中被鉴定出来，抑制抗肿瘤T 细胞应答促进肿瘤生长［23］。在黑色素瘤细胞中，LAG-3 与LSECtin 相互作用抗原特异性T 细胞释放IFNγ。

这两种潜在配体的存在可能拓宽LAG-3 对T细胞功能的影响，特别是关于LAG-3 对肿瘤微环境中CD8+T 细胞的内在作用。另外，不能排除LAG-3还有其他配体存在的可能性。研究发现，LAG-3 结合中枢神经系统中的突触核蛋白预形成的原纤维，与小鼠模型帕金森病的发病机制有关［24］。以上数据提示了LAG-3 其他相关配体的潜力，并提示了LAG-3分子可能在免疫系统之外的作用。

3 LAG-3 信号通路

目前关于LAG-3 完整的信号通路尚未确定，仍需进一步研究。现有的关于LAG-3 的下游信号传导机制研究表明，LAG-3 具有其他抑制性受体（inhibitory receptor，IR）所不具备的独特的胞质结构域，表明其可能具有独特的作用方式。早期研究表明，在酵母双杂交筛选中鉴定的LAG-3 相关蛋白（LAG-3 associated protein，LAP）可能与 EP 基序结合［25］。LAP可促进 LAG-3 与 CD3、CD4 和 ／ 或 CD8 在富含鞘糖脂的微结构域（脂筏）内的共定位［26］。共刺激分子被分割成脂筏，随后形成免疫突触，聚集信号分子以增强TCR 信号。虽然LAP 最初被假设为对LAG-3信号传导起重要作用，但缺少EP 基序的LAG-3 突变体仍保留活性，表明其对LAG-3 的功能可能不是必需的［12］。

Kieele 基序是LAG-3 活性必需的1 个基序，该序列中的单个赖氨酸残基（小鼠中的Lys468）是不可缺少的，并且在迄今测序的所有物种中均保守［12］。该基序似乎不存在于任何其他蛋白质中，因此其可能介导一种尚未鉴定的信号分子或机制。阐明潜在的LAG-3 细胞传导信号机制仍是当务之急。

LAG-3 与APC 相互作用可传导双向信号。LAG-3在人体内有两种存在形式：膜结合型LAG-3（membrane LAG-3，mLAG-3）和可溶性 LAG-3（soluble LAG-3，sLAG-3），两者与DC 相互作用发挥不同的免疫调节作用。正常情况下DC 保持耐受状态，经外来抗原刺激后分化为成熟DC，并通过MHCⅠ类或Ⅱ类分子将抗原提呈给初始T 细胞，使T 细胞增殖分化为CTL 或CD4+Th1 细胞，增强免疫应答，并通过分泌细胞因子和趋化因子募集效应T 细胞迁移至肿瘤部位，维持其在肿瘤部位的长期存在，发挥肿瘤杀伤活性。肿瘤细胞表面不表达共刺激分子缺乏T 细胞成熟的第二信号，并且肿瘤细胞可分泌IL-10和TGF-β 等细胞因子，抑制DC 成熟。有研究表明，某些肿瘤可引起DC 凋亡［27］，DC 凋亡可能阻断了特异性抗肿瘤反应的发生，这可能是肿瘤实现免疫逃逸的重要机制。体外致敏的DC 回输体内可诱导特异性免疫应答，在人类临床应用研究中具有一定潜力［28］。

表达在Treg 细胞上的mLAG-3 与MHCⅡ结合可抑制 DC 功能，通过抑制 FcγRγ 和 ERK 参与的免疫受体酪氨酸激活基序（immunoreceptor tyrosinebased activation motif，ITAM）信号通路，募集含 SH2结构域的磷酸酶1（SH2-containing protein tyrosine phosphatase 1，SHP-1）导致 IL-12 分泌减少和 CD86下调，从而下调免疫应答［29］。与DC 的反向信号机制相似，mLAG-3 与表达MHCⅡ类的黑色素瘤细胞通过激活 MAPK ／ ERK 和 PI3K ／ Akt 生存途径来抵抗Fas 介导的凋亡，从而实现免疫逃逸功能［30］。不同的是，sLAG-3 与DC 相互作用激活免疫应答。sLAG-3-MHCⅡ类相互作用与CD40L-CD40 相互作用一起参与了APC 在体外诱导IL-12 和IFNγ［31］，并诱导 DC产生Th1 型细胞因子。sLAG-3 作为免疫激活剂与肿瘤细胞抗原一起皮下给药时，可激活DC 诱导抗原或肿瘤特异性CTL 和 CD4 Th1 反应［32］。

4 LAG-3 药物的开发及应用

目前有4 种LAG-3 调节剂作为抗癌治疗药物进入临床，还有几种正在临床前开发中。最初的LAG-3驱动的临床试验集中在设计为APC 激活剂的IMP-321（prima biomed ／ immutep）上，另外已开发了 3 种不同的LAG-3 特异性单克隆抗体用于治疗癌症，即BMS-986016（Bristol-Myers squibb，全人 IgG4）、LAG525（Novartis，人源化 IgG4）和 MK-4280（Merck）。葛兰素史克公司开发的第4 种抗LAG-3 拮抗单克隆抗体（GSK2831781）被设计用于在自身免疫性疾病患者中耗竭LAG-3+表达细胞，该药物正在用于斑块型银屑病患者的临床试验（NCT02195349），强调LAG-3 调节疗法可能具有癌症以外的应用的作用。靶向LAG-3 的药物临床试验总结见表1（ClinicalTrials.gov）［3］。

表1 LAG-3 药物研发近况Tab.1 Recent development of LAG-3 drugs

4.1 sLAG-3 作为癌症疫苗佐剂的应用 治疗性癌症疫苗旨在通过增强内源性免疫系统来治疗癌症。在临床有效的癌症疫苗开发中，最实际的目标之一是鉴定能够优化疫苗效果的佐剂。在人类细胞中，LAG-3 作为可溶性分子，结合MHCⅡ类分子通过PI3K ／Akt 通路信号传导激活抗原呈递细胞，导致体内抗原特异性T 细胞应答增加。体内LAG-3 转染的肿瘤细胞或由sLAG-3 融合蛋白与照射的肿瘤细胞一起，可诱导肿瘤消退和肿瘤细胞特异性CD8+T 细胞应答［33］。随后，用乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface Ag，HBsAg）或可溶性抗原（soluble antigen，OVA）与sLAG-3 共同免疫小鼠，结果表明，与对照组相比（不加sLAG-3），sLAG-3 与抗原联合使用可显著增强CTL 应答，激活T 细胞，增强Th1 型细胞因子应答，并显著提高血清抗体滴度［34］。

LAG-3 可作为佐剂激活免疫应答，用于癌症疫苗的治疗。LAG-3-Ig 与 Poly（I：C）作为一种新的佐剂组合可协同增强癌症疫苗的治疗效果。肿瘤相关抗原 P1A 单独与 poly（I：C）或 LAG-3-Ig 佐剂联合免疫可延缓P815 肥大细胞瘤肿瘤的生长，但小鼠最终均被肿瘤杀死。然而，当 P1A 肽疫苗与 Poly（I：C）和LAG-3-Ig 一起治疗小鼠时，预先建立的P815 肿瘤完全消退，所有小鼠均独立存活。对小鼠肿瘤组织病理学检查发现，P1A 和 Poly（I：C）与 LAG-3-Ig联合佐剂处理的小鼠，大多数肿瘤组织发生坏死，坏死区域附近有大量CD4+和CD8+T 细胞浸润［35］。因此，可溶性LAG-3 分子在癌症疫苗的研发中作为佐剂具有较好的应用前景。

关于sLAG-3 免疫增强的临床研究主要集中在IMP321。IMP321 是一种可溶性二聚体重组蛋白，由与人 IgG1（LAG-3-Ig）的 Fc 部分融合的 4 个 LAG-3细胞外结构域组成。该融合蛋白最初旨在作为LAG-3拮抗剂，但如今临床开发更关注于其作为免疫佐剂用于激活APC 的用途。IMP321 作为一种单药，在晚期转移性肾癌（renal cell carcinoma，RCC）（NCT-00351949）患者中进行了第1 期剂量递增试验［36］，结果显示，IMP321 单药治疗显著诱导表达CD28 的效应记忆T 细胞，并具有一定的安全性和耐受性，为将该药物与一线化疗或其他免疫治疗（如癌症疫苗）结合以增强整体抗肿瘤活性提供了依据。在此基础上，评估了IMP321 在晚期胰腺癌患者和晚期乳腺癌的化学免疫治疗试验。IMP321 在美国的第1 个临床试验评估了 IMP321 联合吉西他滨（1 000 mg ／ m2）作为一线治疗18 例晚期胰腺癌患者的安全性。化疗可诱导肿瘤细胞凋亡释放抗原，而IMP321 可刺激DC 成熟，因此认为这一联合作用可促进CD8+T细胞的扩增和对肿瘤的识别。结果显示，吉西他滨与IMP321 联合，在所有剂量水平上均具有良好的耐受性，并且无严重不良事件，其T 细胞水平及DC 和单核细胞水平在治疗前后无明显差别［37］。后续研究可探索更高的剂量水平。此外，在33 名转移性乳腺癌患者（NCT00349934）中评估了IMP321 与紫杉醇联合使用作为一线化学免疫疗法的应用，结果显示，患者在化疗后第2 天，每2 周用紫杉醇与可溶性IMP321 进行治疗，每组患者皮下注射0.25、1.25 和6.25 mg IMP321。接受治疗的患者群体未出现不良反应，建议将每2 周1 次的30 mg 剂量用于Ⅱ期临床试验，该剂量被证明最有效并且安全，与对照组相比（单独的紫杉醇治疗）有明显的免疫学效果。表达MHCⅡ分子的 APC（单核细胞和 DC）、NK 和 T 细胞群体均出现明显升高，并伴随肿瘤体积减小［38］。

将LAG-3-Ig 与分泌粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）的肿瘤细胞免疫疗法结合可刺激细胞和体液抗肿瘤免疫应答，这种联合疗法可促进分泌IFNγ 的CD8+T 细胞增殖，并在动物血清中检测到抗原特异性IgG1 体液反应增加，可延长荷瘤动物的存活期［39］。

4.2 LAG-3 在肿瘤免疫治疗中的应用 LAG-3 分子作为免疫检查点，在多种肿瘤中发挥免疫抑制作用。错配修复阳性的肝转移性结肠癌（liver metastases of colorectal cancer，LM-CRC）在肿瘤 T 细胞上表达抑制性受体的比例高于错配修复阳性的原发性CRC，CD8+T 细胞、树突状细胞和单核细胞的比例也高于错配修复阳性的原发性CRC，抑制性受体LAG-3、PD-1、TIM3 和 CTLA4 在 LM-CRC 肿瘤 CD8+T 细胞、CD4+T 辅助细胞和 ／ 或调节性T 细胞上的表达高于正常个体。LAG-3 或PD-L1 的抗体阻断增加了从LM-CRC 分离的肿瘤内T 细胞对多克隆和自体肿瘤特异性刺激的增殖和效应细胞因子产生［40］。

相对正常组织而言，LAG-3 分子在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）患者的肿瘤组织区中高表达，LAG-3 分子的高表达与CD8+T 细胞的效应功能呈负相关［41］。此外，LAG-3 分子在非小细胞癌、黑色素瘤、HIV 等疾病中通过免疫抑制作用实现免疫逃逸，用LAG-3 单抗封闭可提高免疫应答。

BMS-986016（Relatlimab）是首个开发的抗LAG-3 mAb，目前正在各种临床试验中进行评估，包括实体瘤和血液系统恶性肿瘤。Relatlimab 的Ⅰ／ Ⅱa 初始阶段试验旨在研究该药物单独使用或与Nivolumab 联合治疗对晚期疾病的疗效，近期数据表明，在黑色素瘤患者中Relatlimab 与Nivolumab 联合使用可延长生存期［42］。

4.3 LAG-3 分子在自身免疫病中的应用 抑制性受体（inhibitory receptor，IRS）的表达对于控制免疫反应是必要的，从而防止恶化的T 细胞活化和自身免疫的发生，LAG-3 作为负性调节物具有重要作用。因此，LAG-3 缺陷导致许多自身免疫模型中疾病的恶化。BALB ／ c-Aicda-／-是一种自发性自身免疫病的小鼠模型，由LAG-3 功能丧失突变导致，并且缺乏编码PD-1 的基因，LAG-3 的缺失在小鼠中诱导致死性心肌炎。表明LAG-3 与PD-1 协同作用可预防小鼠的自身免疫［43］。活化的T 淋巴细胞在许多自身免疫疾病和器官移植排斥中具有重要意义。因此，特异性地耗尽LAG-3+T 细胞可能导致靶向免疫抑制，因此制备了细胞毒性LAG-3 嵌合抗体（嵌合A9H12），其对LAG-3 蛋白表现出高度的亲和力并在体内外均成功删除T 细胞应答，与传统免疫抑制剂相比，LAG-3 是一种有前途的治疗靶点，用于消除可能导致更高治疗指数的自身免疫疾病和移植［44］。在LAG-3敲除的非肥胖糖尿病（non obese diabetes，NOD）小鼠模型中，发现LAG-3-／-表现出糖尿病进程加速，CD4+和CD8+T 细胞胰岛浸润增加和胰岛内增生［45］。因此，LAG-3 在自身免疫疾病和移植排斥反应的治疗上具有较高的潜力。

5 展 望

阻断CTLA4 和PD（-L）1 取得的成功为肿瘤靶向免疫治疗建立了新途径。在过去的几年中，LAG-3作为一种抑制性受体获得了广泛的关注，现时已开展的多个LAG-3 靶向药物早期临床研究初步结果显示，靶向LAG-3 作为单药疗法或联合抗PD-1 ／ 抗PD-L1 抗体药物均展现出一定的安全性和抗肿瘤有效性，特別是联合疗法有望发挥协同增强作用。因此，开发针对LAG-3 靶点的药物将为患者提供更新型、全面和有效的治疗方案。

在肿瘤免疫治疗研究领域，CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、TIGIT 这 5 个免疫检查点，能抑制 T 细胞的增殖、活化和效应功能，维持体内的免疫稳态。目前对PD-1 ／ PD-L1 通路抑制肿瘤发展的研究比较深入，LAG-3 作为新型靶点仍需进一步研究，目前关于LAG-3 的药物研发均是以MHCⅡ分子为配体开展，临床效果差强人意。其功能配体FGL-1 的发现为LAG-3分子药物的研发提供了新的思路，其必将成为肿瘤免疫治疗中最有前景和潜力的靶点之一。