多普勒超声联合DKK-4、YKL-40检测对上皮性卵巢癌早期诊断价值

杜成许 杨 坡 王超华 乔 木 岳丽芳

郑州大学第三附属医院(450052)

卵巢癌为妇科恶性肿瘤[1]。以上皮性卵巢癌最为多见，由于早期症状不明显、发病部位隐匿导致患者确诊时已处于卵巢癌中晚期，因此对于上皮性卵巢癌患者的早期诊断至关重要[2]。多普勒超声广泛运用于临床疾病诊断[3]。DKK-4属于DKK家族，在多种肿瘤中均有特异性表达[4]，可作为某些疾病的生物标志物。赵长燕等[5]研究表明DKK-4可作为卵巢浆液性囊腺癌诊断的有效指标。人软骨糖蛋白-39(HC-gp39)又名YKL-40，是一种血清糖蛋白，与细胞增殖、分化、自身免疫等过程有关，参与多种病理生理过程[6]。Kemik等[7]表明YKL-40可用于子宫内膜癌的早期诊断。多普勒超声能够对肿瘤进行初步诊断，由于部分恶性肿瘤病灶可能会表现出良性病变的特点，或有些良性肿瘤由于变性、缺血等原因无法与恶性肿瘤区分，可能导致误诊或漏诊[8]。多普勒超声结合血清标志物能够增加对疾病诊断的敏感性和特异性[9]。DKK-4、YKL-40均与肿瘤的发生发展有关，因此本研究通过多普勒超声联合血清DKK-4、YKL-40检测，探究对上皮性卵巢癌的早期诊断价值。

1 对象和方法

1.1 一般资料

选取2017年1月-2020年1月在本院确诊的上皮性卵巢癌患者92例(卵巢癌组)，年龄(57.3±6.3)岁(36～74岁)；同期年龄匹配的体检健康女性96例为对照组，年龄(56.2±6.6)岁(35～75岁)。纳入标准：①经病理学检查确诊为上皮性卵巢癌；②接受多普勒超声检查；③未行放化疗或生物治疗；④签署知情同意书。排除标准：①患有心血管疾病或肝肾功能不全；②存在精神疾病；③免疫系统疾病；④合并其他恶性肿瘤。研究经本院道德伦理委员会审核通过。

1.2 多普勒超声诊断

采用GE voluson E8彩色多普勒超声诊断系统(美国通用电气医疗集团)对所有受试者进行检查，检查前需排空膀胱取截石位，探头频率6.0～9.0Hz；观察肿瘤位置、大小、形态、内部回声、有无包膜、盆腔有无积液等情况，观察血流分布和血管形态。探测血流情况时至少获得≥3个心动周期清晰频谱。记录受试者血流参数指标血流阻力指数(RI)和搏动指数(PI)。

1.3 血清指标检测

卵巢癌组患者入院首日，对照组于体检时，采集静脉血-80℃冰箱中保存。利用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血清DKK-4、YKL-40水平，DKK-4试剂盒(ab100503)、YKL-40 ELISA试剂盒(ab255719)均购自于abcam公司。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组多普勒超声参数比较

卵巢癌组多普勒超声参数RI、PI值(0.45±0.14、0.59±0.11)低于对照组(0.71±0.25、1.37±0.53)(P<0.05)(t=8.747、13.832，均P=0.000)。

2.2 两组血清DKK-4、YKL-40水平

卵巢癌组血清DKK-4(2347.54±462.36 pg/ml)、YKL-40(174.79±63.86 pg/ml)水平均高于对照组(1249.35±238.64 pg/ml、43.56±9.83 pg/ml)(t=20.587、19.892，均P=0.000)。

2.3 多普勒超声与血清DKK-4、YKL-40水平诊断上皮性卵巢癌效能

ROC曲线分析结果见表1，多普勒超声参数RI、PI与血清DKK-4、YKL-40联合诊断上皮性卵巢癌的效能优于单个指标效能。

表1 各检测指标诊断上皮性卵巢癌效能

2.4 上皮性卵巢癌危险因素分析

将是否发生上皮性卵巢癌作为因变量，以多普勒超声参数RI、PI、血清DKK-4、YKL-40表达水平作为自变量行多因素logistic回归分析。结果表明，血清DKK-4、YKL-40水平异常升高是上皮性卵巢癌发生的危险因素。见表2。

表2 影响上皮性卵巢癌的危险因素分析

3 讨论

多普勒超声在疾病诊断中应用广泛。邓曦等[10]诊断发现彩色多普勒超声检查小儿腹部肿瘤具有较高的准确率。肿瘤的发生发展与血管再生有关，恶性肿瘤的RI值低，血流速度快，血流显示信号丰富，而良性肿瘤及其周围组织血流RI值较高、血流不丰富，超声检测血管信号不明显[8]。多普勒超声能够根据血流信号、包膜形态、内部回声、边界等判断是否发生卵巢癌，RI与PI值可间接反映组织血管生成情况，从而判断是否发生肿瘤。周虹等[11]研究表明彩色多普勒超声血流参数PI、RI可以对子宫内膜病变进行诊断，能够反映微血管的丰富程度，有利于判断子宫内膜癌患者病情程度。本研究结果表明上皮性卵巢癌患者多普勒超声参数RI、PI值均低于对照组，且诊断上皮性卵巢癌有较好的敏感度和特异性，提示可利用多普勒超声为上皮性卵巢癌的早期诊断提供一定临床依据。

随着分子生物学的发展，血清生物标志物逐渐被用于疾病的诊断。Ouyang等[12]研究表明DKK-4与肿瘤、器官发育和免疫炎症有关，在胰腺癌组织中高表达；Wang等[13]研究表明DKK-4可以促进上皮性卵巢癌细胞侵袭，DKK-4 mRNA及蛋白在上皮性卵巢癌组织中过表达。本研究结果表明上皮性卵巢癌患者血清DKK-4表达水平高于对照组，表明DKK-4可能参与了上皮性卵巢癌的发生；ROC曲线分析表明，血清DKK-4水平诊断上皮性卵巢癌的敏感度和特异性均达到70%以上，提示血清DKK-4表达对诊断上皮性卵巢癌具有较高的诊断价值，诊断截断值为1345.31pg/ml，可为临床诊断上皮性卵巢癌提供参考。本研究回归分析表明血清DKK-4水平异常升高为上皮性卵巢癌发生的危险因素，临床应加以关注。

YKL-40是一种炎症性糖蛋白，参与细胞生长、迁移、重组和组织重塑等多种生理过程[6]。在多种肿瘤中差异表达，可作为多种疾病的诊断标志物[14-16]。Fuksiewicz等[16]研究认为结直肠癌患者血清YKL-40水平高于健康对照组，对结直肠癌有较高诊断价值；代海涛等[17]对肾细胞癌患者与健康对照组外周血YKL-40表达水平进行检测分析，表明YKL-40是影响肾细胞癌生存率的危险因素。本研究结果表明，上皮性卵巢癌患者血清YKL-40水平升高，用于诊断上皮性卵巢癌有较高的敏感度和特异性；回归分析表明血清YKL-40水平异常升高是上皮性卵巢癌发生的危险因素，提示临床诊断卵巢癌时密切关注。本研究利用多普勒超声联合血清DKK-4、YKL-40诊断上皮性卵巢癌，敏感度与特异性均得到提高且诊断效能较高。

糖类抗原(CA125)和人附睾蛋白4(HE4)是临床应用较广泛的辅助诊断上皮性卵巢癌的生物学标志物[18]。本研究仅分析了多普勒超声参数联合DKK-4、YKL-40诊断上皮性卵巢癌价值，而未分析其与CA125、HE4对上皮性卵巢癌诊断价值间的关系，此为本研究不足之处，今后可开展此项研究

综上所述，血清DKK-4、YKL-40检测可能是诊断上皮性卵巢癌的一种新型肿瘤标志物。联合多普勒超声可提高诊断效能，为上皮性卵巢癌的早期诊断提供新思路。