抗核抗体检测在复发性流产患者中的应用价值

陈晨 程峰

【摘要】目的：综合分析复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）患者进行抗核抗体相关检测的临床价值，为其诊断和治疗提供病例支持。方法：选定2020年6月—2021年9月在南京市妇幼保健院就诊的245例RSA患者作为观察组，另选择同时期已正常生育的健康女性142例作为对照组。运用化学发光法与免疫印迹法分别进行抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）和抗核抗体谱（antinuclear antibody spectrum，ANAs）的检测。结果：观察组血清样本中ANA阳性结果为32例，阳性率13.06%，ANAs阳性结果为22例，阳性率8.98%，对照组血清样本中ANA阳性结果为4例，阳性率2.82%，ANAs阳性结果为3例，阳性率2.11%。两组ANA和ANAs阳性率比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。在ANAs 17项抗体类型阳性率统计中，观察组抗天然干燥综合征A Ro60型抗体阳性率为3.27%，显著高于对照组（2χ=4.74，P<0.05），两组其余ANAs抗体类型阳性率比较，差異均无统计学意义（P>0.05）。结论：抗核抗体和复发性流产的发生发展有一定的相关性，可能是反复流产的原因之一，但其具体机制机理尚待进一步明确。

【关键词】抗核抗体（ANA）；抗核抗体谱（ANAs）；复发性流产（RSA）

The value of antinuclear antibody detection in patients with recurrent miscarriage

CHEN Chen， CHENG Feng The Nanjing Medical University obstetrics and Gynecology Hospital， Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital，

Nanjing， Jiangsu 210004， China

【Abstract】Objective：The aim of this study is to provide scientific data reference for the diagnosis and treatment of recurrent spontaneous abortion by comprehensively analyzing the detection value of antinuclear antibodies in the serum of patients with recurrent spontaneous abortion （RSA）. Methods：245 patients diagnosed with RSA in Nanjing Maternity and Child Health Hospital from June 2020 to September 2021 were selected as the observation group， and 142 healthy women who had given birth without any adverse pregnancy history during the same period were selected as the control group. Chemiluminescence and immunoblotting were used to detect antinuclear antibodies （ANA） and antinuclear antibody spectrum （ANAs）， respectively. Results The number of ANA positive cases in the observation group was 32 with the positive rate of 13.06%， and the number of ANAs positive cases was 22 with the positive rate of 8.98%.The number of ANA positive cases in the control group was 4 with the positive rate was 2.82%， and the number of ANAs positive cases was 3 with the positive rate was 2.11%. The comparison of the positive rates of ANA and ANAs between the two groups was statistically significant （P<0.05）. In the ANAs 17 antibody type positive rate statistics， the observation group has the highest positive rate of anti-natural sjogren syndrome A Ro60 （SSA/Ro60kD） antibodies with the positive rate of 3.27%， which is significantly higher than that of the control group （2χ=4.74， P<0.05）. There was no statistically significant difference in the positive rate of the other ANAs antibody types between the two groups（P>0.05）. Conclusion：There is a certain correlation between antinuclear antibodies and the occurrence and development of recurrent miscarriage， which may be one of the reasons for recurrent miscarriage， but its specific mechanism needs to be further clarified.

【Key？Words】Antinuclear antibody； Antinuclear antibody profile； Recurrent miscarriage

依据世界卫生组织指南，复发性流产是指与同一对象连续发生3次或3次以上且妊娠小于28周的自然妊娠失败。RSA的病因难明且无典型的临床特征，其中能找到明确病因的仅占50%，主要包括母体生殖器官结构异常，内分泌系统功能紊乱，夫妻染色体异常，生殖道感染，免疫功能异常及血栓形成倾向[1]。近年来，我国医疗水平不断进步，临床研究者们逐步意识到RSA与抗核抗体具有一定的相关性，本研究对245例RSA患者血清中的抗核抗体和17项抗核抗体谱进行检测，综合分析检测结果的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选定2020年6月—2021年9月在南京市妇幼保健院就诊并诊断为RSA的患者245例作为观察组，年龄24～45岁，平均年龄（35.35±12.39）岁。选定依据：①连续发生3次或3次以上反复自然流产；②同一性伴侣；③母体生殖道解剖结构正常；④无内分泌紊乱；⑤凝血功能正常；⑥双方染色体正常；⑦精液常规检测结果正常。再选择同一时期无自身免疫性疾病史的已经正常生育的健康女性142例作为对照组，年龄23～44岁，平均年龄（34.35±12.39）岁。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 两组选定人员均于早上空腹抽取静脉血3mL于不含抗凝剂的采血管中，待静置凝固后以3500转每分钟离心15分钟，然后吸取血清于冻存管中并做好标记，最后放入-80℃冰箱冷冻保存，测定前血清需重新复溶。

1.2.2 检测方法及观察指标 ANA检测采用的是化学微粒子发光法，ANAs检测运用的是特定膜条的免疫印迹技术。ANAs包括17种不同抗体类型：抗核糖核蛋白（nRNP）抗体、抗史密斯（Sm）抗体、抗天然干燥综合征A Ro60型（SSA/ Ro60kD）抗体、抗干燥综合征A Ro52型（SSA/Ro52kD）抗体、抗干燥综合征B（SSB/La）抗体、抗硬皮病70（Scl-70）抗体、抗皮肌炎-系统硬化症（PM-Scl）抗体、抗组氨酰转运RNA合成（Jo-1）抗体、抗着丝点蛋白B（Cenp B）抗体、抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体、抗双链DNA抗体（dsDNA）、抗核小体抗体（AnuA）、抗组蛋白抗体（AHA）、抗核糖体P蛋白抗体（ARPA）、抗线粒体M2抗体（M2， AMA-M2）、抗Mi-2抗体、抗ku抗体。

1.3 统计学处理

采用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（χ±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组与对照组ANA及ANAs阳性率比較

观察组血清样本中ANA阳性32例，阳性率为13.06%；对照组血清样本中ANA阳性4例，阳性率为2.82%。两组ANA阳性率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组血清样本中ANAs阳性22例，阳性率为8.98%；对照组血清样本ANAs阳性3例，阳性率为2.11%。两组ANAs阳性率比较，差异也有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 观察组与对照组ANAs抗体类型阳性率比较

观察组22例ANAs阳性样本中存在1种或几种抗体类型阳性，各种抗体类型检出频次总数为27例次，其中抗SSA/ Ro60kD抗体阳性率为3.27%，显著高于对照组（2χ=4.74，P=0.03），见表2。

3 讨论

RSA的发生在育龄女性中并不罕见，同时其再次流产的风险伴随流产次数的增加而不断升高，据相关文献报道，RSA患者再次流产的概率可高达75%[2]。随着我国生殖免疫学不断进步，不少学者逐步认识到RSA的发生与发展和患者的免疫功能异常息息相关[3]。

ANA是一组对细胞核内DNA，RNA，蛋白或多种成分复合物产生的自身抗体，其靶抗原具有多样性。自身免疫性疾病ANA常提示阳性，但在正常人群尤其是女性的血清中ANA的阳性率也达2%～6%[4-5]。目前对于ANA的作用机理仍不十分明确，但多数观点认为ANA的出现诱导自身免疫过程的发生，抗原抗体复合物不断累积，影响胚胎在母体内的发育，最终导致流产[6]。因此，ANA在RSA患者中亦有一定的特异性临床表现，有关文献报道，经统计RSA患者中ANA的阳性率为13.21%，显著高于对照组的0.9%[7]；也有研究结果显示，采用辅助生殖技术后仍发生自然流产患者的血清中ANA检测结果的阳性率可高达39.45%，也显著高于正常对照组[8]。然而，ANA检测在临床上对于RSA患者的应用价值仍有争议。依据本次研究的结果，观察组ANA阳性率显著升高（13.06% vs2.82%），提示ANA与RSA具有相关性，存在一定的检测价值。

抗核抗体谱实际是按核内各个分子不同性能区分开的一组有着不同临床意义的自身抗体，但在正常人群中，也可出现个别抗体类型阳性。它们是风湿免疫性疾病的常用标志物，但是其与不孕症、复发性流产等生殖障碍疾病的相关性， 目前观点仍有分歧[9]。有研究者发现，抗dsDNA抗体、抗核糖体P蛋白抗体、抗Jo-1抗体会导致早期自然流产；也有文献报道抗Sm抗体、抗SSA/Ro52kD抗体、抗SSA/Ro60kD抗体、抗 SSB/La抗体与RSA紧密相关[10]。本次研究的抗核抗体谱17项抗体类型中，结果经分析后仅抗SSA/Ro60kD抗体和RSA关系密切（P<0.05），与之前的文献报道有部分一致性。

综上所述，抗核抗体对于复发性流产患者虽然并不是特异性的抗体，但其与复发性流产的发生具有一定的相关性。因此，在临床上抗核抗体和抗核抗体谱的联合检测对于复发性流产的早期筛查、病因明确和疗程安排具有一定的指导意义。

参考文献

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[3] 史青杨，李春洪，冯丽华.不明原因反复自然流产的免疫病因研究进展[J].中国实验诊断学，2010，14（1）：153-155.

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