miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宫颈癌演进过程中的表达变化分析*

王许平，石换丽，张利婷，赵 丽

河北省邯郸市第一医院：1.纺医手术室；2.妇产科，河北邯郸 056002

作为一种女性生殖系统上皮性恶性肿瘤，宫颈癌主要由机体宫颈上皮组织瘤变形成。宫颈癌具有较高的发病率，并且患者预后较差，据统计，宫颈癌发病率、病死率高居所有女性生殖系统恶性肿瘤第一位[1-2]。中年女性为宫颈癌的高发群体，我国子宫内膜癌发病率呈现逐年递增趋势，并且患者逐渐年轻化，引起广大专家学者的关注[3-4]。宫颈癌患者主要临床表现为阴道出血、排液，若患者病情得不到及时有效的控制，病情恶化，会出现下肢肿痛、尿频、尿急等症状，严重威胁患者身体健康甚至生命安全[5-6]。因此对宫颈癌症状做到早诊断、早治疗，对患者的病情治疗及预后改善具有重要意义[7-8]。有研究表明，miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达变化与恶性肿瘤发生发展具有密切联系，但是关于三者表达在宫颈癌发生演进过程中的作用研究还相对较少。本研究对宫颈癌癌组织标本miR-590-3p、miR-126、miR-147a的表达进行检测，旨在探讨miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宫颈癌进展中的表达变化及意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年6月至2020年6月本院收治的宫颈癌患者82例，年龄45～68岁，平均(56.5±9.2)岁。TNM分期情况：Ⅰ期20例，Ⅱ期21例，Ⅲ期23例，Ⅳ期18例；淋巴结转移情况：无淋巴结转移39例，有淋巴结转移43例；浸润情况：浅表癌49例，浸润癌33例；病理检查结果分析癌组织分化程度：高分化29例，中分化27例，低分化26例。本研究所有研究对象均知情同意，并经本院医学伦理委员会批准。

纳入标准：所有患者均符合中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会对宫颈癌的诊断标准[9]，均接受手术治疗，且均未接受过放化疗，病历资料齐全。

排除标准：(1)病历资料不全者；(2)心、肝、肾等脏器功能障碍者；(3)非手术治疗者；(4)接受过放、化疗者；(5)并发其他妇科恶性肿瘤者；(6)沟通障碍者。

1.2方法

1.2.1标本采集、免疫组化染色 手术切除患者癌组织、距癌组织5 cm癌旁组织制作标本，4%甲醛溶液固定、石蜡包埋，厚度3 μm，连续切片作免疫组化标记，进行免疫组化染色。

1.2.2miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达检测 实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达。提取细胞总RNA，检测RNA纯度、浓度，反转录处理后获得cDNA，使用Primer5.0软件设计引物，采用2-ΔΔCt方法计算miR-590-3p、miR-126、miR-147a相对表达水平。

2 结 果

2.1miR-590-3p、miR-126、miR-147a在癌组织、癌旁组织中的表达比较 与癌旁组织比较，宫颈癌癌组织中miR-590-3p表达较高，miR-126、miR-147a表达较低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1，图1、2。

表1 miR-590-3p、miR-126、miR-147a在癌组织、癌旁组织中的表达比较

注：A为miR-590-3p在癌旁组织中的表达免疫组化染色图；B为miR-126在癌旁组织中的表达免疫组化染色图；C为miR-147a在癌旁组织中的表达免疫组化染色图。图1 miR-590-3p、miR-126、miR-147a在癌旁组织中的表达免疫组化染色图(×40)

注：A为miR-590-3p在宫颈癌组织中的表达免疫组化染色图；B为miR-126在宫颈癌组织中的表达免疫组化染色图；C为miR-147a在宫颈癌组织中的表达免疫组化染色图。图2 miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宫颈癌组织中的表达免疫组化染色图(×40)

2.2miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达与宫颈癌患者临床特征的关系 与无淋巴结转移患者比较，有淋巴结转移患者miR-590-3p表达较高，miR-126、miR-147a表达较低，差异有统计学意义(P<0.05)。与浅表癌患者比较，浸润癌患者miR-590-3p表达较高，miR-126、miR-147a表达较低，差异有统计学意义(P<0.05)。与宫颈癌Ⅰ～Ⅱ期患者比较，宫颈癌Ⅲ～Ⅳ期患者miR-590-3p表达较高，miR-126、miR-147a表达较低，差异有统计学意义(P<0.05)。与宫颈癌高分化患者比较，宫颈癌中分化患者miR-590-3p表达较高，miR-126、miR-147a表达较低，差异有统计学意义(P<0.05)。与宫颈癌中分化患者比较，宫颈癌低分化患者miR-590-3p表达较高，miR-126、miR-147a表达较低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达与宫颈癌患者临床特征的关系

续表2 miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达与宫颈癌患者临床特征的关系

3 讨 论

有研究表示，宫颈癌的发病可能与性行为、分娩情况、病毒感染及其他因素等有关，但是目前临床医学尚未将宫颈癌发病机制研究透彻[10-13]。有学者通过分子生物学、基础医学等途径对宫颈癌发病机制进行研究，miRNA在大多数生物中大量存在，miRNA与机体炎症反应、免疫状态、微生物感染等多种病理学变化具有密切关系，有学者在研究中表示，miRNA与机体组织细胞分化、凋亡、神经元发育、脂肪代谢等生理过程密切相关，miRNA同时具有组织特异性、稳定性、保守性等特点，肿瘤组织的发生发展与miRNA具有密切关系，在肿瘤组织发展过程中，miRNA具有抑癌、促癌的特性，是临床常用的诊断肿瘤的标志物[14-16]。

miR-590-3p是miRNA家族的重要成员，在结直肠癌、喉癌、胃癌、胆囊管恶性肿瘤中均呈异常表达，有研究表示，miR-590-3p在不同的恶性肿瘤中作用不一，可作为抑癌或促癌基因在恶性肿瘤发展过程中发挥重要作用[17-18]，但是关于miR-590-3p在宫颈癌中表达变化的研究报道较少。本研究结果显示，相比癌旁组织，宫颈癌癌组织中miR-590-3p表达较高，有淋巴结转移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化的宫颈癌组织中miR-590-3p表达较高，说明miR-590-3p表达变化与癌组织淋巴结转移情况、病理分期、分化程度等临床特征具有一定的相关性，其参与宫颈癌的发生发展。因此，本研究认为miR-590-3p能够作为宫颈癌潜在的诊断指标和治疗靶点，为宫颈癌的诊断、临床治疗提供新的研究方向。

miR-126是miRNA家族中重要的一种抑癌基因，在乳腺癌、胃癌等恶性肿瘤中均呈现异常低表达[19-20]，有研究表示，miR-126在宫颈癌中表达较低，其表达变化与宫颈癌细胞增殖能力具有密切关系[21]。本研究结果显示，相比癌旁组织，宫颈癌癌组织中miR-126表达较低，有淋巴结转移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化宫颈癌组织中miR-126表达较低，说明miR-126表达变化与癌组织淋巴结转移情况、病理分期、分化程度等临床特征具有一定的相关性，其在宫颈癌发生发展过程中发挥重要作用。因此，本研究认为miR-126可作为宫颈癌潜在的诊断指标和治疗靶点，检测miR-126表达对宫颈癌的诊断、临床治疗具有重要意义。

miR-147a作为一种抑癌基因，在多种恶性肿瘤中呈现异常表达[22]。李圃等[23]在研究中表示，miR-147a在宫颈癌中表达较低，上调miR-147a表达能够对宫颈癌细胞增殖、侵袭起到抑制作用。本研究结果显示，相比癌旁组织，宫颈癌癌组织中miR-147a表达较低，有淋巴结转移、Ⅲ～Ⅳ期、低分化宫颈癌组织中miR-147a表达较低，说明miR-147a表达变化与癌组织淋巴结转移情况、病理分期、分化程度等临床特征具有一定的相关性，其参与宫颈癌的发生发展。因此，本研究认为miR-147a能够作为宫颈癌潜在的诊断指标和治疗靶点，为宫颈癌症状的诊断、临床治疗提供新的研究方向。

本研究也存在一定的局限性，本研究选取病例数较少，且并未对患者进行一定时间的随访，未能对miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达与患者预后的相关性进行研究。下一步将增加样本量，对患者进行随访，研究miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达与宫颈癌患者预后的相关性。

综上所述，miR-590-3p、miR-126、miR-147a在宫颈癌中表达呈现明显异常，且miR-590-3p、miR-126、miR-147a表达变化与有无淋巴结转移、浸润情况、TNM分期、分化程度有关，可能共同参与宫颈癌发展演进过程。