上海市宝山区18 501例健康儿童末梢血白细胞计数及其分类参考区间的建立

张宇亮，徐灵，李仁杰，董成林，崔邦铨，吴成志

上海中冶医院检验科，上海 200941

白细胞是一种抵抗感染的免疫细胞，它主要由人体骨髓中的造血干细胞分化形成。在医学上根据其形态与功能将其分为淋巴细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性细胞、中性粒细胞五大类。各类细胞的检测在血液检测中均有重要的作用，在临床上各类细胞的检测值对于患者的诊断与治疗均有重要意义[1-3]。参考区间是一种供医学临床上对患者疾病与身体状况做出准确评估的一个依据，在国内已出台了关于成人的白细胞各参数的参考区间，而对于儿童的白细胞参考区间一直在引用成人的区间范围。因儿童处于生长发育阶段，使儿童的白细胞各参数值处于一种不稳定状态，且目前在国内对于儿童白细胞各参数参考区间的指导没有统一的标准[4-5]。本研究通过对上海市宝山区2～6岁的健康儿童白细胞参数的参考区间进行统计、分析与研究，为本地区儿童白细胞参数的参考区间提供一定的临床指导，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取上海市宝山区2019年4～8月进行幼托体检的18 501例2～6岁健康儿童作为研究对象。纳入标准：①经临床体检所有儿童均发育正常；②经测量儿童的体温均≤37.5℃。排除标准：①在近2周内有发热、服药史的儿童；②依从性较差的儿童。将18 501例健康儿童按不同年龄段分为5组，其中男童9 199 例，女童9 302 例；年龄2～6 岁，平均(5.0±1.0)岁；2 岁474 例，3 岁4 575 例，4 岁5 234 例，5 岁4 718 例，6岁3 500例。本研究经医院医学伦理委员会批准，儿童家属均知情并签署同意书。

1.2 检测方法 对所需的仪器进行校准检验，确定其结果均在范围内后再进行使用，采用Sysmex XS 500i全自动血细胞分析仪及原装配套试剂，原厂校准品和质控品(日本Sysmex 公司)，严格按照《上海市医疗机构临床实验室质量管理规范》[6]进行手指末梢血采集，所有儿童均在无名指末梢利用微量吸管采集儿童末梢血80 μL，然后加入含有EDTA-K2 抗凝剂的离心管中，将其充分混和至均匀。血细胞分析检测由两名熟练的医护人员严格按要求进行操作，所有标本均在4 h 内完成。检测指标包括白细胞计数、中性粒细胞百分率、淋巴细胞百分率、单核细胞百分率、嗜酸性粒细胞百分率、嗜碱性粒细胞百分率。

1.3 观察指标 (1)比较不同性别儿童白细胞计数、中性粒细胞百分率、淋巴细胞百分率、单核细胞百分率、嗜酸性粒细胞百分率、嗜碱性粒细胞百分率。(2)比较2～6 岁健康儿童各年龄组间末梢血白细胞计数及其分类的参考区间。(3)比较本次调查地区2～6岁正常儿童末梢血白细胞计数及其分类分析结果与第八版诸福棠实用儿科学参数。(4)验证本次调查的末梢白细胞计数及其分类的参考区间。

1.4 统计学方法 应用SPSS25.0 统计软件进行数据分析。采用Mann-Whitney 非参数检验进行两个独立样本间的结果分析，采用Kruskal-Wallis H非参数检验对5 个年龄段进行多个独立样本间的结果分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同性别儿童间的各种参数比较 采用Mann-Whitney 非参数检验进行两个独立样本间的结果分析，男女两组间白细胞计数、中性粒细胞百分率和嗜碱性细胞百分率比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，而淋巴细胞百分率、单核细胞百分率、嗜酸性粒细胞百分率男女两组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。其中淋巴细胞百分率女性明显高于男性，单核细胞百分率和嗜酸性粒细胞百分率男性明显高于女性，见表1。

表1 不同性别儿童间的各参数比较

2.2 2 ～6岁健康儿童各年龄组间末梢血白细胞计数及其分类的参考区间比较 采用Kruskal-Wallis H非参数检验对5个年龄段进行多个独立样本间的结果分析，所有参数的年龄组间比较，除了白细胞计数和嗜碱性粒细胞百分率外，其他各参数比较差异均有统计学意义(P＜0.05)。再进一步对各年龄组分别进行Mann-Whitney 的分析，从2～3 岁开始，如果两组间相比差异无统计学意义(P＞0.05)，则将两组数据进行合并，并与4岁组进行比较，直至将各年龄组六项参数全部完成比较。最后将各年龄组根据比对结果进行分组划分，同时考虑到性别对白细胞计数、中性粒细胞百分率和嗜碱性细胞百分率无显著性影响，故在这三项参数的年龄分组中不考虑性别的分组，而性别间淋巴细胞百分率、单核细胞百分率、嗜酸性粒细胞百分率比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 2～6岁健康儿童各年龄组间末梢血白细胞计数及其分类的参考区间

2.3 本调查地区2～6岁正常儿童末梢血白细胞计数及其分类分析结果与第八版诸福棠实用儿科学的参数比较 本次调查地区2～6岁儿童末梢血白细胞计数及其分类结果与第八版《诸福棠实用儿科学》提供的参考区间相比，白细胞计数等6 项参数差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

表3 本调查地区2～6 岁正常儿童末梢血白细胞计数及其分类分析结果与第八版诸福棠实用儿科学的参数比较

2.4 本调查的末梢白细胞计数及其分类参考区间进行小样本验证情况 应用本次调查的末梢白细胞计数及其分类参考区间进行小样本验证，按照筛选标准，从参加幼托体检补检的2～6 岁儿童中选出任意20 例，将这20例标本的测定值与需验证的参考区间比较，落在参考区间外的测定值＜1个。本次调查的末梢血血细胞分析参考区间的技术要求及操作过程符合我国卫生部行业标准(WS/T 402-2012)文件要求。

3 讨论

血常规检测是儿童医院在临床上常用的检测指标，白细胞计数作为血常规检测的指标之一，其在临床上常被用于对疾病的诊断、治疗与评估，尤其是在儿科发热门诊中具有重要的作用，它能对病毒性或细菌性的感染做出判断[7]。白细胞计数因受采集部位的不同、检测方法的差异以及地区、民族、环境等因素的影响，使其参考区间存在一定的差异。因此，国际检验学与临床化学共同提出了在条件允许的情况下，各地区可建立适合本地区人群的参考区间[8-9]。

近几年，手指末梢血的采集因具有创伤小、方便快捷、疼痛小等优势，在临床上被广泛应用。对于儿童手指末梢血白细胞计数的参考区间主要依据试剂盒说明书或相关的参考文献，但在参考前需进行验证[10]。儿童属于特殊群体，处于生长发育的快速阶段，其血液中的各项指标均会受到年龄、性别、地区等因素的影响。另有，儿童免疫系统也处于一种逐步完善的阶段，从而使其白细胞分类指标也会随着年龄的变化而变化，因此，在不同地区有必要建立符合本地区儿童白细胞计数的参考区间[11]。本研究结果显示，在白细胞各参数中淋巴细胞百分率、单核细胞百分率、嗜酸性粒细胞百分率在不同性别中相比，差异有统计学意义，且在淋巴细胞百分率中，女童明显高于男童，在单核细胞百分率和嗜酸性粒细胞百分率中，男童明显高于女童；在白细胞各参数中除了白细胞计数和嗜碱性粒细胞百分率不受年龄的影响外，其他参数值均与年龄有一定的关联。本次调查上海市宝山区2～6岁儿童末梢血白细胞计数及其分类结果与第八版《诸福棠实用儿科学》[12]提供的白细胞计数等6项参数的参考区间相比，差异均有统计学意义。这与之前陈兴等[13]、刘佳丽等[14]的研究结果基本一致，均说明了儿童白细胞的部分参数值会受到性别、年龄等因素的影响，但年龄与性别对白细胞的各参数值均有一定的差异性。这可能是由于地域、研究对象的数量、检测系统、采血方式的不同所造成的差异性。再有，本研究只局限于上海市宝山区，具有一定的局限性，对其他地区不一定适用，且所研究的对象为2～6岁儿童，而对其他年龄段儿童的研究还需进一步探讨。通过调查研究发现，影响儿童白细胞计数及其分类参考区间的因素是多方面的，在医学上有必要在各地区建立一套适合自身的参考区间。随着检测系统与技术的不断更新与完善，建立符合本地区白细胞分类的参考区间，对于本地区儿童血常规检测对相关疾病的诊断与治疗具有重大意义[15]。

综上所述，在对儿童性别、年龄与临床需求的基础上给予充分考虑，实验室根据自身的检测系统，建立一套适应自己医院在临床诊断中所需求的白细胞计数及其分类的参考区间，具有重大的临床意义。