乌梅汤对溃疡性结肠炎治疗作用的初探*

武寒飞 王 旻 吕 莎

（1.吉林省中医药科学院第一临床医院普外科，吉林 长春 130000；2.吉林大学第二医院结直肠肛门外科，吉林 长春 130000；3.吉林大学第二医院皮肤科，吉林 长春 130000）

溃疡性结肠炎（UC）是一种病因尚不完全清楚的结肠与直肠慢性非特异性炎症性病变，病变局限于黏膜及黏膜下，以溃疡为主。其病程长，易反复，血性腹泻为常见早期症状，同时伴有腹痛、便血、体质量减轻等症状[1]。常以肠镜进行诊断，治疗多以卧床休息，并给予全身支持治疗，常用药物为水杨酸制剂、糖皮质激素或免疫抑制剂，但治疗效果一般，且不良反应多，目前临床缺少切实有效的治疗方法。而中药治疗溃疡性结肠炎的效果较为理想。在长期的临床实践中发现，乌梅汤对溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用[2]。本文以50 只大鼠为研究对象，对乌梅汤在溃疡性结肠炎中的治疗作用与机制进行初步研究，报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料 清洁及健康、成熟雄性SD（Sprague Dawley）普通级大鼠50 只，体质量220～250 g，由长春市一缘生物科技有限公司提供，许可证号：SYXK（吉）2019-0003。按照清洁级动物饲养方法喂养，室温20～25℃，相对湿度20%～35%，日光灯照明，持续12 h 明暗交替，自由活动，自由饮水，饲以标准鼠食，大鼠在吉林省中医药科学院南苑动物饲养室适应性喂养1 周后进行实验。处死方法为颈椎脱臼处死。

1.2 实验分组及造模 建立正常对照组、三硝基苯磺酸（TNBS）联合乙醇诱导大鼠溃疡性结肠炎模型组，取雄性SD 大鼠50 只，随机分3 组，A 组：正常对照组10 只，B 组：UC 模型不给药组20 只，C 组：UC 模型给药组20只。

大鼠于清洁级实验室适应性饲养1 周，造模前禁食不禁水24 h 并称重，计算给药剂量。用水合氯醛（0.3 mL/100 g）腹腔麻醉后，将钝头导管从肛门插至距肛门8 cm 处，将5%三硝基苯磺酸（TNBS）与无水乙醇以体积1∶1 配成25 mg（TNBS）/mL（混合液），按0.4 mL/100 g 体质量比例缓慢灌肠，诱导急性结肠炎。14 d 后再次按0.4 mL/100 g 体质量比例缓慢灌肠，造成复发性结肠炎。第1 次诱导时大鼠快速发展成严重结肠炎，其典型症状包括腹泻、血便、体质量明显下降、活动减少。第2 周大鼠腹泻改善，饮食增加。第2 次混合液灌肠后，上述症状再次出现。TNBS 联合乙醇结肠炎模型的病理学改变为结肠炎黏膜灶性溃疡形成，杯状细胞及隐窝细胞减少，炎性细胞浸润21 d 后造模完成。造模完成后，每组随机抽取大鼠2 只，以确认其病理改变符合溃疡性结肠炎。

1.3 给药方法 造模完成后，对大鼠进行药物治疗：A组和B 组每天予蒸馏水2 mL/只灌胃，日1 次；C 组给予乌梅汤（0.82 g/mL）2 mL 灌胃，日1 次；连续15 d。

1.4 观察指标 （1）从造模完成后第1 天（及实验开始的第22 天）开始，直至进行药物治疗15 d（及实验开始第37 天）后，每天观察各组大鼠一般情况、体质量、大便性状、血便及大便隐血情况，同时记录各组发生例数，并依照Cooper 等评分方法进行疾病活动指数（Disease activity index，DAI）评分。

（2）观察各组大鼠肠组织学变化（连续灌胃15 d 后，第16 天处死动物留取标本）；取结肠组织，光镜及透射电镜下观察：黏膜上皮表面、腺体、固有层结构，采用Hovdenak 评分系统量化评分。（包括上皮表面指标：细胞肿胀/体积改变、细胞炎性浸润；腺体指标：上皮细胞核向腺腔迁移、杯状细胞消失、有丝分裂情况、隐窝炎、隐窝脓肿、腺体消失、腺体萎缩、腺体扭曲；固有层指标：炎症、水肿、血管充血）。

（3）上皮细胞增殖情况测定：免疫组织化学染色采用ABC 法，检测增殖细胞核抗原（PCNA）。

（4）测定肠系膜淋巴结细菌移位率：提取回肠系膜淋巴结0.5 g 加l mL 无菌生理盐水匀浆后放入胰酪大豆胨液体（TSB）内进行细菌培养，观察淋巴结细菌移位率。

1.5 统计学方法 以SPSS 22.0 分析组间数据，计数资料以率（%）表示，行х2检验；计量资料以（）表示，行t 检验。P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠一般情况以DAI 评分情况 A 组大鼠活动、饮食正常，反应敏捷，体质量增长，毛光色泽，其大便呈现颗粒状。B 组大鼠出现肉眼可见的精神萎靡，毛发蓬松且无光泽，饮食减少，体质量有明显降低，肛门周围污秽并伴有难闻的臭味，其阴囊下垂，均有不同程度的腹泻、脓血便等，于2 周后好转，粪便质稀不成型，共有2 只大鼠死亡（不计入统计学分析），一只因腹部胀大，但未见排便而亡；另一只死因不明。C 组大鼠与A 组相比，与明显的体质量下降、粪便松散等症状，但与B 组相比，其粪便松散等症状较轻，血便不明显。C 组DAI（1.23± 0.12）分低于B 组（3.56± 0.32）分（t ＝33.400，P ＜0.05）。

2.2 各组大鼠的肠组织学变化与PCNA 表达指数比较 经光镜观察，A 组Hovdenak 评分为0 分，B 组与C 组比较，经治疗15 d 后，C 组评分低于B 组（P ＜0.05）；A 组PCNA 染色为肠上皮细胞核染色为棕褐色，B 组为淡黄色，C 组为棕色，C 组PCNA 表达指数经治疗后高于B组（P ＜0.05），但未能回升至A 组水平，见表1。

表1 各组UC 模型大鼠肠组织学变化、PCNA 表达指数比较（）

表1 各组UC 模型大鼠肠组织学变化、PCNA 表达指数比较（）

注：与A 组比较，aP<0.05，与B 组比较，bP<0.05。

2.3 各组大鼠淋巴结细菌移位率比较 经统计A 组淋巴结细菌移位率为0，而B 组与C 组均出现细菌移位，经治疗C 组由100%降至25%，而B 组由100%降至75%，C 组优于B 组（F ＝12.32，P ＜0.05）。

3 讨论

UC 为慢性非特异性肠道炎症，病变多从直肠开始，逆行向近端发展，可累及全结肠与末端回肠，继而侵犯黏膜与黏膜下层，造成结肠黏膜出现不同程度的充血、水肿与糜烂等，主要表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便等[3]。而近年来该病症发病率呈现上升趋势，且以病程较长、反复发作、缠绵难愈为特征，严重影响患者身体健康。目前临床针对该病症治疗以内科治疗为主，必要时可行手术治疗，常用药物有氨基水杨酸制剂、糖皮质激素与免疫抑制剂，但不良反应较大，易使患者产生依赖性，临床治疗效果不佳[4]。而近年来有研究报道中药对溃疡性结肠炎具有较好疗效，能有效缓解各种症状，促进机体康复。UC 归属于中医学“肠澼”“痢疾”“大瘕泄”等范畴，其核心病机实为肝脾失调，气机不畅。而乌梅汤方中，以乌梅为主药，蜀椒、细辛共为臣药，取二药辛温止痛、散寒止痛之意；以黄连、黄柏清肠间湿热，以附片、桂枝、干姜辛热药温经祛寒，以当归、人参补气养血共为佐药；以蜜炼之，取使药之调和诸药之意。纵观全方，乌梅丸酸能涩肠止泻，辛可祛寒温中，苦能清热解毒，甘能补益气血，同调诸药。针对溃疡性结肠炎，本方剂组成中的乌梅可涩肠、生津，安蛔；蜀椒主治腹内虚冷，久冷不利；细辛可祛风散寒，通窍止痛；黄连可清热燥湿，泻火解毒；黄柏可清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮；附片可补火助阳，散寒止痛；桂枝可发汗解表，温经通阳；干姜可发汗解表，温中止吐；当归可活血止痛，补血调经，润肠通便；人参可大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津；蜂蜜可补中缓急，润肠通便。诸药联用可有效改善患者病情，提高治疗效果[5]。

本文实验结果中，C 组大鼠经乌梅汤治疗，其肠组织学变化、上皮细胞增殖情况、肠系膜淋巴结细菌移位率等情况均改善，可为见乌梅汤治疗效果显著，且无不良反应。

总之，针对溃疡性结肠炎实施乌梅汤治疗，可减少细菌移位情况，有效维持肠道黏膜结构与功能的稳定性及屏障作用，其应用价值显著。