转移抑制因子1和上皮型钙黏着蛋白在结直肠癌患者癌组织及癌旁组织中的表达及临床意义

于 建，李劲松，张景航，苏 蔚

新乡医学院第一附属医院病理科，河南 新乡 453100

结直肠癌（CRC）是现阶段临床较为常见恶性肿瘤之一，资料显示，随着人们饮食结构和生活习惯的改变，我国CRC发生率逐年升高，并呈现出年轻化的趋势［1］。CRC具有发病隐匿的特点，导致早期诊断、治疗仍进展有限，随着肿瘤生物学的发展，生物学标志物为CRC的诊治开辟了新途径。新近研究指出，转移抑制因子1（MTSS1）、上皮型钙黏着蛋白（E-cadherin）均为恶性肿瘤效果因子，二者在结直肠组织中表达下调，可能是CRC发生的诱因［2-3］。基于此，本研究尝试探究MTSS1、E-cadherin在CRC患者组织及癌旁组织中的表达及临床意义，旨在为临床诊治本病提供参考，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年6月—2020年6月新乡医学院第一附属医院收治的120例CRC患者作为研究对象，其中女48例，男72例；年龄48～82岁，平均年龄（66.37±7.81）岁；体质量指数（BMI） 18.1～28.7 kg/m2，平均体质量（24.35±2.17）kg/m2。两组患者一般资料具有可比性（P＞0.05）。

1.2 选例标准

纳入标准：（1）符合《中国结直肠癌诊疗规范（2017年版）》［4］中CRC诊断标准。（2）首次确诊。（3）认知功能良好，无沟通交流障碍。（4）无结直肠手术史。（5）患者知晓本研究，已签署同意书。排除标准：（1）合并其他原发性恶性肿瘤。（2）采集组织标本前接受放化疗治疗。（3）凝血功能障碍患。（4）严重感染性疾病。（5）免疫性疾病。（6）严重心脑血管疾病。

1.3 方法

所有患者均于确诊后通过手术或结直肠镜活检采集癌组织、癌旁正常组织（距癌旁＞5 cm）标本，组织标本大小约0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm，严格遵循无菌操作原则，组织标本置入冻存管内，并做好标记，于30 min内放入液氮中保存，由专业检测人员统一检测，采用荧光定量PCR法检测癌组织、癌旁正常组织MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平，取组织标本，采用磷酸缓冲盐溶液清洗后充分研磨，随后提取总RNA，并测定RNA含量，将RNA反转录为cDNA后进行基因扩增，采用2-ΔΔCt法计算MTSS1、E-cadherin蛋白相对表达量。

1.4 观察指标

（1）比较癌组织、癌旁正常组织MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平。（2）比较不同临床资料CRC患者癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平，临床资料包括性别、年龄、BMI、CRC家族史、饮酒史、肿瘤分化程度、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移。BMI评估：低于18.5 kg/m2为过轻，18.5～23.9 kg/m2为正常，24.0～27.9 kg/m2为过重，28.0～32.0 kg/m2为肥胖，高于32 kg/m2为非常肥胖。肿瘤分化程度、Dukes分期、浸润深度和淋巴结转移均依据《中国结直肠癌诊疗规范（2017年版）》［4］中相关标准判定。（3）分析癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达与CRC临床特征的相关性。

1.5 统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计分析，计数资料以例数描述，计量资料采取Bartlett方差齐性检验与Kolmogorov-Smirnov正态性检验，均确认具备方差齐性且服从正态分布，以均数±标准差（±s）描述，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两组间比较采用SNK-q检验，两组间比较采用独立样本t检验，相关性分析采用Spearman相关系数模型，均采用双侧检验，检验水准α=0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 癌组织、癌旁正常组织MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平情况

CRC患者癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平均较癌旁正常组织低，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 癌组织、癌旁正常组织MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平情况（±s）

表1 癌组织、癌旁正常组织MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平情况（±s）

组别癌组织（n=120）癌旁正常组织（n=120）t值P值MTSS1 0.82±0.24 31.56±10.48 32.123＜0.001 E-cadherin 0.38±0.08 0.56±0.12 13.672＜0.001

2.2 不同临床资料癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平情况

不同性别、年龄、BMI、CRC家族史、饮酒史CRC患者癌组织中MTSS1及E-cadherin蛋白表达水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；不同肿瘤分化程度、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移CRC患者癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 不同临床资料癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平情况（±s）

表2 不同临床资料癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平情况（±s）

临床资料性别男（n=72）女（n=48）年龄（岁）＜60（n=45）≥60（n=75）BMI过轻（n=26）MTSS1t值或F/P值0.693/0.490 E-cadherin t值或F/P值1.462/0.147 0.81±0.22 0.84±0.25 0.37±0.06 0.39±0.09 0.681/0.498 1.436/0.154 0.83±0.24 0.80±0.23 0.40±0.08 0.38±0.07 0.581/0.629 1.472/0.226 0.80±0.22 0.36±0.07

续表2

2.3 癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达与CRC临床特征的相关性

经Spearman相关性分析，发现CRC患者癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达肿瘤分化程度呈正相关，与Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移呈负相关，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达与CRC临床特征的相关性

3 讨论

CRC是一种恶性程度高、预后较差的恶性肿瘤，约50%的患者确诊时已经发生转移，超过30%的患者在术后出现复发，因此积极探索CRC的发病机制及早期诊断靶标，一直是临床研究的重点问题［5］。

MTSS1是近年来发现的抑癌因子，本研究发现，CRC患者癌组织中MTSS1蛋白表达水平明显低于癌旁正常组织，提示MTSS1可能与CRC发生有关。MTSS1也被称作肿瘤抑制基因，其通过与肌动蛋白结合，发挥调控肌动蛋白纤维组装及细胞骨架的动态的作用，且能调节细胞及细胞间基质的相互作用，在肿瘤细胞运动性调节中发挥抑制作用。相关研究［6］也证实MTSS1的表达可以抑制甲状腺癌细胞增殖，并促进肿瘤细胞凋亡，从而控制肿瘤进展，延长患者生存时间。本研究还发现CRC患者癌组织中E-cadherin蛋白表达水平明显降低，也可能参与CRC的发生过程。E-cadherin是一种钙依赖性的跨膜蛋白，在维持上皮细胞之间黏附作用、维持细胞内信号传导作用方面具有重要作用，其在正常细胞组织中应保持高表达水平，从而保持细胞之间的聚集功能［7］。文献报道［8］指出，细胞组织中E-cadherin的表达水平降低可导致细胞复合体解散，增强细胞的扩散、转移能力，是恶性肿瘤转移和扩散的关键。由此可见，MTSS1、E-cadherin在CRC发生过程中可能发挥抑癌作用。

本研究通过对比分析，发现不同肿瘤分化程度、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移CRC癌组织中MTSS1和E-cadherin蛋白表达水平存在明显差异，进一步通过相关性分析发现二者表达水平与肿瘤分化程度呈正相关，与Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移呈负相关，提示癌组织中MTSS1、E-cadherin表达缺失可能是导致CRC肿瘤细胞增殖、浸润、转移的因素。本研究认为，MTSS1、E-cadherin在CRC中作为肿瘤抑制型基因，其表达水平越低，对肿瘤细胞增殖、转移的抑制作用越低，肿瘤恶性生物学行为越活跃，因此通过相关措施上调MTSS1、E-cad-herin蛋白的表达，或许能发挥抑制肿瘤进展的作用，具有较大待开发潜力。

综上可知，CRC患者癌组织中MTSS1、E-cadherin蛋白表达水平明显降低，其表达水平与CRC肿瘤分化程度、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移密切相关，早期检测MTSS1、E-cadherin表达水平可能有助于临床评估CRC患者病情，具有较高临床应用价值。