姜黄素对罗曼粉壳蛋鸡产蛋性能和卵巢结构及功能的影响

赵壮志 钟梓奇 高文 吴江 效梅 安立龙

摘要 [目的]探討日粮中添加不同剂量的姜黄素对罗曼粉壳蛋鸡产蛋性能以及卵巢结构和功能的影响。[方法]选取体重相近、健康、生产性能相近的29周龄罗曼粉壳蛋鸡144只，随机分为对照组（NC）和3个处理组（NT1、NT2、NT3），对照组饲喂基础日粮，各处理组在基础日粮的基础上，分别添加50、150和200 mg/kg姜黄素，温度保持在（25±2）℃，相对湿度均保持在65%～80%，分析姜黄素对罗曼粉壳蛋鸡产蛋性能、卵巢结构与卵泡发育以及卵巢组织生殖激素水平的影响。[结果]在产蛋性能方面，与对照组（NC）相比，各处理组（NT1、NT2、NT3）日均采食量、产蛋率、平均蛋重、蛋破损率均无显著差异（P>0.05）;在卵巢结构和卵泡发育方面，与对照组相比，各处理组蛋鸡卵巢组织形态未见异常，NT2组的小白卵泡（SWF）数提高了35.64%（P<0.05）;在卵巢组织生殖激素方面，NT3组的促卵泡生成素（FSH）和雌二醇（E 2）含量与NC组相比分别提高了21.11%（P<0.05）和7.44%（P<0.05），NT2组和NT3组的孕酮（P 4）含量与NC组相比分别提高了9.36%（P<0.05）和10.89%（P<0.05）。[结论]日粮中添加姜黄素可以改善罗曼粉壳蛋鸡的卵泡发育，显著提高卵巢组织FSH、E 2、P 4的含量，但对蛋鸡产蛋性能并无显著影响。

关键词 姜黄素;罗曼粉壳蛋鸡;卵巢组织;结构与功能

中图分类号 S831  文献标识码 A  文章编号 0517-6611（2022）07-0088-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.07.020

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Effects of Curcumin on the Egg-laying Performance，Ovarian Structure and Function of Roman Pink-shell Laying Hens

ZHAO Zhuang-zhi，ZHONG Zi-qi，GAO Wen et al

（College of Costal Agricultural Sciences，Guangdong Ocean University，Zhanjiang，Guangdong 524088）

Abstract [Objective] To investigate the effects of different doses of curcumin on the laying  performance，ovarian structure and function of Roman pink-shell laying hens.[Method] 144 29-week-age Roman pink- shell laying performance with similar body weight，health and similar production performance were selected and randomly divided into control group （NC） and three treatment groups （NT1 and NT2，NT3）.The laying hens in control group were fed with the based diet，and the laying hens in three treatment groups （NT1 and NT2，NT3） were fed with the diet with adding 50，150，200 mg/kg curcumin in the basal diet.The temperature was kept at （25±2） ℃，and the relative humidity in each group was maintained at 65%-80%.The effects of curcumin on the laying performance，ovarian structure and follicle development，reproductive hormones in ovarian tissues of Roman pink-shell laying hens were studied.[Result] In terms of production performance，there was no significant differences in average daily feed intake，laying rate，average egg weight and egg’s breakage rate between treatment groups （NT1，NT2，NT3） and control group （NC） （P>0.05）.In terms of ovarian structure and follicle development，there was no abnormality in the morphology of ovarian tissues in laying hens in the treatment groups， compared with control group. Compared with control group，the number of SWF in NT2 group increased by 35.64% （P<0.05）.In terms of reproductive hormones in ovarian tissues，compared with control group，the contents of FSH and E 2 in NT3 group significantly increased by 21.11% （P<0.05） and 7.44% （P<0.05） respectively，P 4 content in NT2 group and NT3 group significantly increased by 9.36% （P<0.05） and 10.89% （P<0.05） respectively.[Conclusion] Adding curcumin in the diet could improve the follicle development，significantly increase the contents of FSH，E 2 and P 4 in ovarian tissues of laying hens，but it had no significant effect on the laying performance of laying hens.

Key words Curcumin;Roman pink-shell laying hens;Ovarian tissues;Structure and function

近年来，为提高畜禽生产性能，加快畜牧业发展，对植物添加剂的开发利用显得尤为迫切。姜黄素 （curcumin） 是一种从姜科植物姜黄等的根茎中提取的一种酚类物质[1]，具有免疫调节、抗氧化和抗炎的作用[2]，能有效提高畜禽的生产性能[3]。因其天然、无残留、无污染的特点，姜黄素作为绿色饲料添加剂被广泛应用于畜禽生产中[4]，是家禽生产中有效的生长促进剂之一[5]。近年来，关于姜黄素免疫调节、抗氧化、抗炎作用的研究报道越来越多，但关于姜黄素对蛋鸡产蛋性能和卵巢结构与功能的研究很少。为此，笔者探讨了日粮中添加不同剂量的姜黄素对罗曼粉壳蛋鸡产蛋性能以及卵巢结构和功能的影响，以期为姜黄素作为饲料添加剂应用于家禽生产中提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物。144只29周龄罗曼粉壳蛋鸡购自广州喜迎珍禽养殖有限公司。

1.1.2 试验材料。姜黄素（≥95%）购自西安金绿生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 试验设计。选取体重、产蛋性能相近的29周龄罗曼粉壳蛋鸡144只，随机分为1个对照组（NC组，饲喂基础日粮）和3个姜黄素处理组，即NT1组（基础日粮+50 mg/kg）、 NT2组（基础日粮+150 mg/kg）、 NT3组（基础日粮+200 mg/kg姜黄素），每组6个重复，每个重复6只鸡，温度保持在（25±2）℃，相对湿度均保持在65%～80%。

饲粮为玉米-豆粕型，结合德国罗曼家禽育种有限公司（LOHMANN TIERZUCHT GmbH，Germany）提供的饲料营养标准和《中华人民共和国农业行业标准-鸡饲养标准（NY/T 33—2004）》以及本地实际情况设计[6]。基础日粮组成及营养水平见表1。

1.2.2 饲养管理。试验用罗曼粉壳蛋鸡用三层梯式蛋鸡笼笼养，饲养于广东海洋大学动物医院动物生产室。每只笼饲养2只鸡，每天早晚各投料1次，自由饮水和采食。通过空调、保温灯、抽湿机调节室内温湿度;采用自然光照和人工补光结合的方法，试验期间光照强度为10～15 lx，保持每天光照16 h（06：00—22：00）。免疫程序参照罗曼粉壳蛋鸡标准并结合广东当地状况进行。

1.2.3 样品采集。在试验第21天07：00随机从每个重复中随机挑选1只鸡，断颈处死后迅速取出卵巢，用眼科镊迅速剥离直径大于1 mm的卵泡。取部分卵巢组织与预冷的PBS缓冲液或生理盐水按照1∶9（g∶mL）的比例充分匀浆，10 000  r/min离心10 min后取上清，放入-20 ℃下保存备用。

1.2.4 测定项目与方法。

1.2.4.1 产蛋性能测定。试验期间每周统计各重复的日均采食量（g/只）、产蛋率（%）、平均蛋重（g）和蛋破损率（%），计算公式如下：

日均采食量=每日总采食量/鸡只数（1）

产蛋率=每日总产蛋数/鸡只数×100%（2）

平均蛋重=总蛋重/产蛋数（3）

蛋破损率=破损蛋數/总鸡蛋数×100%（4）

1.2.4.2 卵巢不同等级卵泡的测定。

用眼科镊剥离直径大于1 mm卵泡的同时，使用电子游标卡尺测量已剥离卵泡的直径，按其直径大小分为小黄卵泡（SYF）、大黄卵泡（LYF）、小白卵泡（SWF）、大白卵泡（LWF）和等级卵泡，并分别统计各级卵泡的数量。

1.2.4.3 卵巢结构切片观察。

取卵巢组织放入10%甲醛溶液中常温浸泡24 h，通过乙醇脱水和二甲苯处理，制作厚度4 μm的石蜡切片后，再进行HE染色。使用普通光学显微镜观察卵巢组织，分析不同处理组间是否存在结构差异。

1.2.4.4 生殖激素含量的测定。

采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定卵巢组织中促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）、孕酮（P 4）、雌二醇（E 2）的含量，所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.2.5 数据统计与分析。使用Excel 2019软件进行数据整理，使用SPSS 22.0统计软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），使用GraphPad Prism绘制柱状图。试验结果均以“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 日粮中添加姜黄素对蛋鸡产蛋性能的影响

如表2所示，各处理组（NT1、NT2、NT3）的日均采食量、产蛋率与对照组（NC）相比均无显著差异（P>0.05）;各处理组（NT1、NT2、NT3）的平均蛋重与对照组（NC）相比差异均不显著（P>005）; NT2组和NT3组蛋破损率与对照组（NC）相比分别降低了33.33%和13.33%，差异均不显著（P>0.05）。

2.2 日粮中添加姜黄素对蛋鸡卵巢结构和卵泡发育的影响

如图1所示，各处理组蛋鸡卵巢组织中有结构完整的成熟卵泡及初级卵泡，形态无异常;结构完整且发育良好的卵巢颗粒细胞呈椭圆形，在目镜观测中其细胞核大小正常，有完整的细胞膜和核膜。

如表3所示，各处理组（NT1、NT2、NT3）的等级卵泡数、SYF数、LWF数、LYF数与对照组（NC）相比均无显著差异（P>0.05）;NT2和NT3组的SWF数与对照组（NC）相比差异显著，其中NT2组的SWF数较对照组（NC）显著提高了3564%（P<0.05）。

2.3 日粮中添加姜黄素对蛋鸡卵巢组织生殖激素含量的影响

如图2所示，与对照组（NC）相比，NT3组卵巢组织的FSH含量提高了21.11%（P<0.05）、E 2含量提高了7.44%（P<0.05）;NT2和NT3组蛋鸡卵巢组织的P 4含量比对照组（NC）分别提高了9.36% （P<0.05）和10.89%（P<0.05）;各姜黄素处理组蛋鸡卵巢组织LH含量与对照组（NC）相比均有所提高，但均无显著差异（P>0.05）。

3 讨论

3.1 日粮中添加姜黄素对蛋鸡产蛋性能的影响

迄今为止，国内外关于在日粮中添加姜黄素对蛋鸡生产性能的影响研究报道很少。Solis-Cruz等[7]研究表明日粮中添加姜黄素可以改善肉鸡的生产性能;Johannah 等[8]研究表明姜黄素可以提高鸡的体增重和饲料利用率;王进波等[9]研究表明在大黄鱼饲料中添加0.04%的姜黄素可以提高鱼的平均体增重和成活率;胡忠泽等[10]研究发现，在肉鸡日粮中添加一定量的姜黄素对于促进采食量、增加日增重、降低料重比有较好的效果;王鹏[11]报道在肉仔鸡日粮中添加姜黄素可以提高肉仔鸡的日均采食量和平均日增重;杨泰[12]报道添加姜黄素可以提高海兰蛋鸡的产蛋性能。该试验结果表明，与对照组（NC）相比，日粮中添加不同剂量的姜黄素对罗曼粉壳蛋鸡的日均采食量、产蛋率、平均蛋重、蛋破损率有不同程度的影响，但均无显著差异（P>0.05）。日粮中添加姜黄素可用作畜禽生产的生长因子[13]，在产蛋期可作为一种天然的抗氧化剂[2]，能够提高生产性能[14]，但在该试验日粮中添加姜黄素对蛋鸡产蛋性能有一定的影响，但差异不显著。

3.2 日粮中添加姜黄素对蛋鸡卵巢结构和卵泡发育的影响

在禽类卵泡发育过程中，只有极少数的卵泡可以发育成等级卵泡并成熟排卵，家禽产蛋性能是由卵巢中未分化的等级前卵泡数量所决定的[15]。前人研究表明，姜黄素可以缓解卵巢功能不全[16]，对卵巢有一定的保护作用[17]。陈振国等[18]报道姜黄素可以促进新生大鼠原始卵泡的发育启动，并抑制卵母细胞的凋亡。Tiwari-pandey等[19]研究表明姜黄素可以促进小鼠卵巢细胞增殖、促进卵子生成和卵泡发育、缓解凋亡。该试验结果表明，与对照组（NC）相比，日粮中添加姜黄素的各处理组蛋鸡卵巢组织形态未见异常，其中添加150 mg/kg 姜黄素可以显著提高罗曼粉壳蛋鸡SWF数（P<0.05）;日粮中添加150和200 mg/kg的姜黄素可以不同程度地提高罗曼粉壳蛋鸡的等级卵泡数、SYF数、LYF数和LWF数，但均无显著差异（P>0.05）。

3.3 日粮中添加姜黄素对蛋鸡卵巢组织生殖激素的影响

动物的生殖过程受下丘脑-垂体-性腺轴（HPG）调控[20]，HPG 轴通过下丘脑分泌促性腺激素释放激素 （GnRH） 刺激垂体分泌的FSH 和LH，是促进卵巢发育的主要激素[21]。Moro-Balbás等[22]研究表明，E 2对颗粒细胞凋亡和卵泡闭锁有抑制作用。该试验结果表明，日粮中添加不同剂量的姜黄素可以显著提高罗曼粉壳蛋鸡卵巢组织生殖激素含量，其中添加200 mg/kg 姜黄素可以显著提高罗曼粉壳蛋鸡卵巢组织的FSH、E 2含量（P<0.05）;添加150和200 mg/kg 姜黄素可以显著提高罗曼粉壳蛋鸡卵巢组织的P 4含量（P<0.05），说明日粮中添加姜黄素可以促进性腺激素和固醇类激素的分泌。目前，姜黄素作为一种饲料添加剂，在家禽生产中的研究主要集中在其抗氧化性能，而关于姜黄素对常温环境中蛋鸡卵巢生殖激素影响的作用机制则有待进一步研究。

4 结论

日粮中添加姜黄素可以改善罗曼粉壳蛋鸡的卵泡发育，显著提高卵巢组织FSH、E 2、P 4的含量，但对蛋鸡产蛋性能并无显著影响。

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