促红细胞生成素联合亚低温对缺氧缺血性脑病患儿血清因子、脑组织损伤和脑氧代谢指标的影响

陈红兵，周瑞（通信作者）

1.蚌埠医学院第一附属医院 儿科，安徽 蚌埠 233000；2.蚌埠医学院，安徽 蚌埠 233000

0 引言

新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic ischemic encephalopathy，HIE）是指新生儿在围产期因不同程度的缺血缺氧因素而发生的神经系统综合征。它与意识丧失有关，如自发运动、声音和反射的减弱，严重时还会出现抽搐。HIE是一个全球性问题，发病率约为1.5～2.0/1000例活产新生儿[1]。目前公认的减少新生儿脑损伤的治疗策略是亚低温，临床证据表明，亚低温可显著提高中度至重度HIE足月婴儿的存活率和神经认知预后，并降低其发生脑瘫的风险[2]。然而，幸存者由于广泛的神经发育异常，仍有留下脑损伤后遗症的风险，因此迫切需要寻求辅助治疗策略。

促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）具有良好的神经保护、神经再生和抗炎作用,是一种强有力的神经保护剂。EPO通过对神经元和少突胶质细胞的抗兴奋毒性、抗氧化和抗凋亡作用，达到神经保护作用；对星形胶质细胞和小胶质细胞也有抗炎作用；对损伤后的神经发生、分化和修复也有明显的作用[3]。目前关于EPO联合亚低温对新生儿HIE临床治疗效果的研究较少。因此，本研究收集EPO联合亚低温治疗新生儿HIE前后血清因子、脑组织损伤标志物以及脑氧指标的相关数据，并进行的回顾性分析，为临床EPO治疗新生儿HIE治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2020年1月-2021年4月在蚌埠医学院第一附属医院治疗的新生儿HIE患儿51例，收集相关的检查化验资料，其中观察组（26例）、对照组（25例）。观察组与对照组的患儿的出生时体重、新生儿评分、性别、日龄、胎龄方面比较均无统计学意义差异（P＞0.05），见表1。本研究获得本院伦理委员会批准且患儿及家属知情同意。

表1 两组一般资料比较（）

表1 两组一般资料比较（）

1.2 纳入标准及排除标准

纳入标准：按照儿科学新生儿HIE的诊断标准的足月新生儿：①存在造成胎儿宫内窘迫的异常产科明确的病因，伴有严重的胎儿宫内窘迫症状，或是分娩过程中存在明显窒息情况发生；②出生后不久有神经系统病变现象，至少存在有24h。排除标准：①电解质紊乱、颅内出血等因素造成的抽搐；②宫内感染和其他相关先天性疾病造成的脑组织损伤。

1.3 方法

对照组在呼吸支持、补液、抗惊厥、降低颅内压、维持血液灌注等常规治疗的基础上进行亚低温治疗。亚低温治疗是从出生后6h内开始，全身冷却至（33.5±0.5）℃，头部冷却至（34.5±0.5）℃，持续治疗72h。结束后患儿自然恢复体温，若6h后仍未到36℃，利用远红外辐射恢复体温。观察组为在对照组的基础上合并使用EPO治疗，从住院第2天开始，EPO（华北制药金坛生物科技，石家庄，中国；批号：GYZZ S20 000026；规则批号：201405YC14；规格：3000IU/1mL）200IU/kg溶于10%葡萄糖溶液中，静脉内给药，每天一次，连续7天。

1.4 疗效评价与数据采集

治疗后7天进行疗效评价，评价标准[4]：①显效：患儿一般情况良好，呼吸平稳，意识清醒，肌张力、原始反射恢复正常，无惊厥发生；②有效：患儿呼吸较稳，意识较清醒，肌张力、原始反射显著改善，惊厥次数显著减少；③无效：患儿呼吸紊乱，意识障碍，肌张力增强或减弱，原始反射消失，频繁惊厥甚至死亡。总有效率=（显效+有效）/总人数×100%。

收集治疗前和治疗7天后血清学因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素8（IL-8）和脑损伤指标神经元特异性烯醇化酶（NSE）、血清S100β蛋白（S100β）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）以及脑氧代谢指标脑组织氧分压（PO2）、动脉-颈内静脉血氧含量差（Da-jvO2）的数值。

1.5 统计学分析

用SPSS 25.0统计软件对相关数据进行分析，计量资料之间的比较使用两样本独立样本t检验，不符合正态分布的使用秩和检验；计数资料之间采用卡方检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗有效率比较

观察组的总有效率为92.31%，对照组总有效率为80.00%，两组之间的有效率差异具有统计学意义（P＜0.05），且观察组的总有效率比对照组高，见表2。

表2 两组治疗效果比较[n（%）]

2.2 两组血清因子水平比较

两组治疗前血清TNF-α、IL-8之间的差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后两组间血清因子水平的差异具有统计学意义（P＜0.05）；两组内治疗前后血清TNF-α、IL-8之间的差异也有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组血清因子水平比较（）

表3 两组血清因子水平比较（）

注：▲与本组治疗前比较P＜0.05。

2.3 两组脑组织损伤指标比较

两组间治疗前损伤指标NSE、S100β和8-OHdG之间的比较差异无统计学意义（P＞0.05）；两组间治疗后损伤指标水平之间的差异具有统计学意义（P＜0.05）；两组内治疗前后损伤指标之间的差异也具有统计学差异（P＜0.05），见表4。

表4 两组脑组织损伤指标比较（）

表4 两组脑组织损伤指标比较（）

注：▲与本组治疗前比较P＜0.05。

2.4 两组脑氧代谢指标比较

两组间治疗前脑氧代谢指标的比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后两组间的比较具有统计学意义差异（P＜0.05）；两组内治疗前后脑氧代谢指标PO2和Da-jvO2之间的比较均有统计学意义差异（P＜0.05），见表5。

表5 治疗前后脑氧代谢指标比较（）

表5 治疗前后脑氧代谢指标比较（）

注：▲与本组治疗前比较P＜0.05。

3 讨论

HIE是足月和近足月婴儿脑损伤的重要原因。这些患儿往往伴有慢性神经系统疾病和残疾，亚低温治疗作为目前唯一被认可的治疗方案，仍有多达40%的患儿在接受亚低温治疗后死亡或者遗留脑瘫和智力障碍等长期残疾[5]。促红细胞生成素是一种由肾脏以及肝脏分泌的糖蛋白,其在临床上多用于治疗贫血。近年来有研究表明，EPO可减轻HIE相关损伤对新生儿的影响。在临床前动物模型中，证实促红细胞生成素通过增强神经发生、少突胶质细胞生成和血管生成以及通过刺激包括脑源性神经营养因子在内的生长因子来改善缺氧缺血性损伤急性期后脑组织的再生[6]。最近EPO治疗HIE引起了临床工作者的重视，张君[7]通过对比患儿治疗前后神经细胞因子胰岛素生长因子（IGF-1）、脑损伤标志物视椎蛋白样蛋白1（VILIP-1）、神经肽Y（NPY）及NSE的水平以及神经行为（NBNA）评分，证实亚低温联合EPO治疗能够降低新生儿HIE的脑损伤程度，提高患儿的神经行为并改善其神经功能。刘丽娟等[4]通过对比观察新生儿治疗前后智力发育指数（MDI）、精神运动发育指数（PDI）、NBNA评分及精神运动发育商（MDQ）评分，发现亚低温联合重组人EPO可以降低重度HIE患儿的神经功能损伤，促进患儿智力及精神发育。

本研究采用EPO联合亚低温方案对HIE患儿进行治疗，观察了一些新的指标，如血清学因子TNF-α、IL-8和脑损伤指标NSE、S100β、8-O H d G 以及脑氧代谢指标脑组织氧分压（PO2）、动脉-颈内静脉血氧含量差（Da-jvO2），进一步证实EPO在治疗HIE方面的治疗效果。

在血清炎症因子方面，有研究得出，HIE的发生与发展和机体免疫炎症损伤存在密切相关[8]。在众多炎症细胞因子中，起主要作用的是TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等。TNF-α是TNF/TNFR细胞因子超家族的成员，参与慢性炎症，自身免疫等病理过程，可协助其他免疫因子的合成与分泌。TNF-α可作为早期脑组织损伤的标志物。IL-8为一种中性粒细胞激活因子，它参与组织局部的炎症反应,也可以增强TNF-α神经毒性作用，进一步加强炎性反应[9]。本研究得出，两组治疗虽然都获得较好的临床治疗效果，恢复情况基本满意，但是观察组的总体有效率数值较对照组高，血清因子TNF-α、IL-8数值，观察组中优于对照组（P＜0.05），提示EPO联合亚低温可以减轻炎症反应，减少炎症因子对脑组织的损伤。

8-OHdG常被用作氧化应激和致癌的生物标志物[10]。神经元特异性烯醇化酶（NSE）是神经元和神经内分泌细胞独特的一种酸性蛋白酶，常被当作神经元损伤的特异性标志物，可以用于新生儿脑部疾病中的诊断[11]。王欢欢等[12]研究表明，随着新生儿HIE病情加重，血清NSE、8-OHdG水平逐渐升高。本研究中，观察组的脑组织损伤指标NSE、S100β和8-OHdG低于对照组（P＜0.05），说明EPO联合亚低温对HIE患儿氧化应激反应、保护脑组织作用优于单独亚低温治疗，这对临床治疗工作具有重要指导意义。

当HIE患儿身体组织器官的血液供应以及血氧含量出现异常，脑组织血氧含量会随之显著降低，这极大地影响脑组织的发育，甚至出现严重的不可逆损伤[13]。在本研究中，对比两组治疗前后脑氧代谢指标脑PO2和Da-jvO2，其中脑PO2有统计学差异（P＜0.05），但Da-jvO2只在组内有统计学差异（P＜0.05），组间差异无统计学意义（P＞0.05）。说明EPO联合亚低温可以提高HIE患儿减少全身耗氧量的同时提高脑部供氧量，进而保护脑组织。此外，组内治疗前后对比上述各类指标，均具有统计学差异（P＜0.05），说明两种治疗方案对HIE患儿均有效。

综上所述，EPO联合亚低温治疗新生儿HIE临床效果优于亚低温单独治疗。另外，本研究依旧有一些不足，如样本量少，科研周期较短。以后的研究中，应扩大样本量，并进行长期随访观察。