寒地山楂树栽培技术及山楂叶总黄酮含量测定
2022-04-11冯继承赵宪斌胡凤亮郑小春李光刘百通黎曙光
冯继承,赵宪斌,胡凤亮,郑小春,李光,刘百通,黎曙光
1.黑龙江省药品审核查验中心(哈尔滨 150076);2.黑龙江贵龙医药有限公司(哈尔滨 150076);3.黑龙江省肇源县林业和草原局(大庆 166500)
山楂为传统药食同源中药材,具有健脾开胃、消食化滞、活血化瘀等功效,广泛用于消化不良、活血化痰等。山楂叶被中国药典收载,为蔷薇科植物山里红Crataeguspinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂CrataeguspinnatifidaBge的干燥叶,具有活血化瘀,理气通脉,化浊降脂;用于气滞血瘀,胸痹心痛,胸闷憋气,心悸健忘,眩晕耳鸣,高脂血症。随着对山楂叶研究的不断深入,发现山楂叶总黄酮具有调节脂质和糖代谢,护肝、抗氧化、扩张冠状动脉等多种药理活性,能有效治疗糖尿病、高血压等[2]。
近几年,国内外专家学者从山楂叶提取出了牡荆素、牡荆槲皮素、金丝桃苷等成分,并开发研制了50多种含有山楂叶的药物,其中“心安胶囊”是含有山楂叶的单方制剂。山楂叶应用市场前景广阔,规模化栽培应运而生[3],有必要开展深入研究。
1 栽植
1.1 基地选择与整地
本研究种植地选择位于黑龙江省肇源县新站林场,面积300亩。该林场位于黑龙江省西南部,地处松嫩平原沙地内,川岗相间,波状起伏,地形开阔,平均海拔130米;属北温带大陆性季风气候,植被属蒙古植物区系。栽植树苗前,做好土地整理,即对土壤进行深翻熟化,修建树盘蓄水池,挖鱼鳞坑。
1.2 选择树苗
挑选根系发达完整、主根短直的幼苗。起苗后,根系应无劈裂,苗干粗壮通直,高度适中。侧枝分布均匀,数量5~6条即可。侧芽发育饱满,能构成丰满的树冠,且树苗不能有病虫害和自然损伤,为后续寒地山楂种植与生长奠定良好基础[4]。
1.3 科学定植
采用秋季挖坑、春季栽种植株体或秋季土壤封冻前栽种植株体方式。栽种密度取决于地形,山地或丘陵按株行距2.5×3米、3米×4米;平地按株行距4米×5米。栽种时,提苗、踏实,栽好后浇足水、封土保湿。
1.4 田间管理[5]
1.4.1 水分管理 人工建植后灌足水,保证移栽两个月内土壤湿润;在分枝时期和开花期保证水量充足供水,初冬及时浇封冻水,以利幼苗顺利过冬。
1.4.2 施肥 秋季施基肥以利补充树休营养,基肥以有机肥和农家肥为主。果实采收后,每亩开沟施入500~1000kg,当根系布满全园时,基肥可全园撒施,然后结合深翻树盘将地表肥翻入土中,深度为15~20厘米,追肥频次为每年3次,并在发芽期、开花结果期、果实膨大期根据具体情况施用,前期以氮肥为主,后期多施磷、钾肥。
1.4.3 除草 杂草要早除勤除,若杂草已经进入开花期或结实期,一定要在其成熟前割除清理。
1.4.4 病虫害防治 夏秋季易发生白粉病,叶片正反面产生白粉状斑后期逐渐长出小黑点(病菌的菌囊壳),严重时使叶片早期脱落。白粉病病菌以菌囊壳在残壳和残体上越冬,翌春子囊白孢子引起初侵染,病株上产生的分生孢子主要靠气流传播,不断进行再次侵染,导致不相邻的地块也会普遍发病。秋季清除田间病株并烧毁,发病初期可用25%的粉锈宁1000倍液喷雾防治,每7~10天喷施1次,连续喷施2~3次,注意喷药后半个月停止浇水,宜选择下午气温较高,植物各器官缺水状态时喷施效果最好,喷药应顺风方向喷施,以免对人体造成危害。
2 含量测定
2.1 山楂叶来源
黑龙江省肇源县林业局新站林场三年生寒地山楂叶。
2.2 溶液制备
取本品细粉约1g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷加热回流提取至提取液无色,弃去三氯甲烷液,药渣挥去三氯甲烷,加甲醇继续提取至无色(约4小时),提取液蒸干,残渣加稀乙醇溶解,转移至50mL量瓶中,加稀乙醇至刻度,摇匀,作为供试品贮备液。
2.2.1 标准品溶液制备 精密称取芦丁对照品(批号:100080-202012,92.2%)26.12mg,置50mL量瓶中,加乙醇适量,超声处理使溶解,放冷,加乙醇至刻度,摇匀。精密量取20mL,置50mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得(浓度0.1927mg/mL)。
2.2.2 供试品溶液制备 取供试品贮备液,滤过,精密量取续滤液5mL,置25mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取2mL,置25mL量瓶中。
2.3 测定方法
2.3.1 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL,分别置25mL量瓶中,各加水至6mL,加5%亚硝酸钠溶液1mL,摇匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,以相应试剂为空白。结果可参见表1。
表1 标准溶液曲线的测定数据
2.3.2 供试品溶液测定 照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6mL”起依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量,计算,即得。结果可参见表2。
表2 供试品的测定数据
2.4 绘制标准曲线
以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,根据标准曲线供试品溶液,计算供试品溶液中芦丁的重量。结果见图1。
图1 山楂叶标准曲线
按干燥品计算(水分5.60%):样品1含量值为9.30%,样品2含量值为9.32%,平均值为9.31%。山楂叶总黄酮含量达9.31%,高于药典标准。
3 讨论
山楂树栽培技术的广泛应用,加速培育药用植物资源,以促进森林资源的合理利用,实现经济的可持续发展,为林业转型升级开辟了一条新路。在开发、培育山楂药用植物资源的同时,拓展了农业投资领域,保护生态环境处于良好的自然水平,保证了药材资源所需的生态环境,从而实现以农养药,对当地振兴、职工致富具有实际意义。