miR-133/208对老年急性心肌梗死患者预后的预测价值

周 艳，张克昌，涂 秀，钱 琤

(1.滁州市第一人民医院 检验科，安徽 滁州239000;2.中国人民解放军第904医院 检验科,江苏 苏州215007)

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是冠状动脉急性缺血缺氧引起的心肌坏死，多见于老年人，该病可累及消化、呼吸、心血管系统，并发心律失常、血管栓塞、心脏破裂、心力衰竭、心源性休克等，危及患者生命[1]。随着医学不断进步，急性心肌梗死早期病死率明显降低，但整体病死率仍较高，而急性心肌梗死后不良心血管事件是造成患者死亡的重要因素之一[2]。因此早期预测急性心肌梗死后不良心血管事件是降低急性心肌梗死病死率的关键。微小核糖核酸(MicroRNA，miR)是一种单链非编码小RNA分子，广泛存在于真核生物中，可参与转录后基因表达调控[3]。miR-208、miR-133是近年新发现的的miRNA，既往研究报道[4-5]miR-208、miR-133与急性心肌梗死发生及病情相关，但其与急性心肌梗死预后的相关性尚不清楚。本研究就miR-208、miR-133对老年急性心肌梗死患者预后的预测价值进行了探讨，现将研究结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

征得滁州市第一人民医院医学伦理委员会批准，选择2019年3月-2021年6月滁州市第一人民医院收治的急性心肌梗死患者198例为研究组，体检健康者50例为对照组。研究组：男109例，女89例；年龄50-93岁，平均年龄(71.25±5.43)岁。对照组：男27例，女23例；年龄52-90岁，平均年龄(72.63±5.88)岁。两组一般资料无显著差异(P>0.05)。根据198例急性心肌梗死患者1年内是否发生不良心血管事件分为预后良好组(n=168)与预后不良组(n=30)，预后良好组：男92例，女76例；年龄50-92岁，平均年龄(69.77±5.49)岁。预后不良组：男17例，女13例；年龄51-92岁，平均年龄(70.46±5.73)岁。预后良好组和预后不良组一般资料无显著差异(P>0.05)。

1.2 纳入排除标准

纳入标准：①符合急性心肌梗死诊断标准[1]；②行冠状动脉支架置入术(intracoronary stent implantation，ISI)；③年龄50-93岁，病历资料完整；④心、肝、肾功能正常；⑤所有研究对象签订知情同意书。排除标准：①合并凝血系统疾病、扩张型心肌病、恶性肿瘤、心脏瓣膜病、活动期肺结核、精神性疾病、自身免疫性疾病、甲状腺疾病；②随访期间发生与急性心肌梗死无关的重大疾病导致的预后不良；③住院期间死亡；④转院或放弃治疗；⑤依从性不好，不能配合完成本研究。

1.3 研究方法

所有研究对象入院后记录年龄、性别等一般资料，采集清晨空腹外周静脉血5 ml，置于含肝素抗凝的无菌真空采血管(安徽赫尔生物医学检验科技有限公司)中，采用总RNA提取试剂盒(常州百代生物科技有限公司)提取血液总RNA，采用反转录试剂盒(北京百奥莱博科技有限公司)将总RNA反转录成cDNA，以此cDNA为模板进行PCR扩增。PCR扩增体系：cDNA模板1 μL，SYBR Premix Ex Taq 10 μL，上下游引物各0.5 μL，加无核酶水补充至20 μL；PCR反应条件：95℃预变性15 s，95℃变性5 s，60℃退火延伸30 s，39次循环。根据扩增曲线读取循环数(Ct)，将GAPDH作为内参基因，采用相对定量法以2-△△Ct对miR-208、miR-133表达水平进行相对定量分析。每份RNA样本重复检测3次，由同一名医师严格根据说明书描述进行操作。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 研究组与对照组外周血中miR-208、miR-133相对表达量

研究组外周血中miR-208、miR-133相对表达量显著高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)(表1)。

表1 研究组与对照组外周血中miR-208、miR-133相对表达量

2.2 预后良好组与预后不良组外周血中miR-208、miR-133相对表达量

预后不良组外周血中miR-208、miR-133相对表达量显著高于预后良好组，差异具有统计学意义(P<0.05)(表2)。

表2 预后良好组与预后不良组外周血中miR-208、miR-133相对表达量

2.3 miR-208、miR-133与急性心肌梗死患者预后不良的相关性

miR-208、miR-133与急性心肌梗死患者预后不良呈正相关(P<0.05)(表3、图1)。

表3 miR-208、miR-133与急性心肌梗死患者预后不良的相关性

图1 miR-208、miR-133与急性心肌梗死患者预后不良的相关性

2.4 miR-208、miR-133对急性心肌梗死患者预后不良的预测价值

miR-208对急性心肌梗死患者预后不良的预测价值明显优于miR-133(P<0.05)；miR-208、miR-133联合检测对急性心肌梗死患者预后不良的预测价值明显优于各指标单独检测(P<0.05)(表4、图2)。

图2 miR-208、miR-133预测急性心肌梗死患者预后不良的ROC曲线

表4 miR-208、miR-133对急性心肌梗死患者预后不良的预测价值

两指标联检时，以均阳性方为阳性(预后不良)。

3 讨论

急性心肌梗死是老年人群的常见病、多发病，临床表现为剧烈而持久的胸骨后疼痛、心电图进行性改变以及血清肌红蛋白(myoglobin，MB)、肌酸激酶同功酶(Creatine kinase isoenzyme，CKMB)、肌钙蛋白Ⅰ(Troponin I，TnI)等心肌酶活性升高[6]。随着人们生活方式改变及生活水平的提高，急性心肌梗死发病率逐年攀升。急性心肌梗死发病迅速，并发症多，严重危害人类健康。急性心肌梗死后不良心血管事件是造成患者死亡的重要因素之一，因此早期预测急性心肌梗死后不良心血管事件的发生，是降低急性心肌梗死患者病死率的重要途径，对提升急性心肌梗死患者预后有重要意义。

miRNA是一类单链非编码小分子RNA，长度约为20-25个核苷酸，广泛存在于真核生物中，能够通过靶向结合特定mRNA的3′端非编码区(3′UTR)，对靶基因表达进行转录后负调控。人类1/3基因受miRNA调控，miRNA能够参与人体多个生理过程，广泛参与细胞增殖、分化、凋亡等细胞生物学行为，并在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)、自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia，AHA)、多发性脑脊髓硬化症(multiple sclerosis，MS)等自身免疫性疾病、心血管疾病(Cardiovascular disease，CVD)以及非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)、肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)等恶性肿瘤等疾病发生、发展中发挥重要作用[7-9]。miR-208、miR-133是近年新发现的的miRNA，有研究发现[10]敲低miR-208可减少急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积，改善心肌细胞凋亡。另有研究发现[11]miR-208可在转录后水平负调节目的基因表达，参与急性心肌梗死后心室重构过程。本研究显示研究组外周血中miR-208相对表达量显著高于对照组，这与刘新秀等[12]人研究结果一致，提示miR-208在老年急性心肌梗死患者外周血中呈高表达。本研究显示预后不良组外周血中miR-208相对表达量显著高于预后良好组，提示miR-208与老年急性心肌梗死患者预后具有明显相关性，本研究spearman相关分析也证实了这一结论，提示miR-208高表达的老年急性心肌梗死患者预后越差。有研究显示[13]miR-133在缺血再灌注损伤(Ischemia-reperfusion injury，IRI)过程中表达水平上升。另有研究显示[14]miR-133在急性心肌梗死大鼠心脏中表达明显上调。上述研究[13-14]在本研究中得到了证实，本研究显示miR-133在老年急性心肌梗死患者外周血中呈高表达，且预后不良组外周血中miR-133相对表达量显著高于预后良好组，提示miR-133与老年急性心肌梗死患者预后相关，miR-133高表达的老年急性心肌梗死患者预后越差，这与Yuan L等[15]人研究结果一致，等人研究发现miR-133高表达患者急性心肌梗死后不良心血管事件发生率更高。

综上所述，miR-208、miR-133在老年急性心肌梗死患者外周血中呈高表达状态，miR-208、miR-133与老年急性心肌梗死患者预后具有明显相关性，外周血miR-208、miR-133联合检测对老年急性心肌梗死患者预后具有一定评估价值，有望成为临床管理老年急性心肌梗死的分子生物标志物。但本研究尚具样本小、随访时间短的不足，故有待进一步研究。

作者简介：周艳，女，安徽省明光市人，硕士，主管检验师，研究方向:检验。