200例高龄卵巢储备功能减退患者IVF/ICSI助孕妊娠结局的分析

张静姿，于月新

（北部战区总医院生殖医学中心，辽宁 沈阳 110003）

卵巢储备功能减退（diminished ovarian reserve，DOR）属于不孕症的影响因素之一。DOR的病因众多，主要临床表现为生育功能降低甚至不孕，严重影响患者的身体健康和家庭和睦[1]。因此，探寻有效的治疗措施具有重要意义。目前，临床上治疗DOR的方法较多，疗效也存在明显差异。体外受精（in vitro fertilization，IVF）与卵泡浆内单精子显微注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）均为辅助生殖技术，在临床上应用广泛[2-3]。目前关于二者对DOR患者的治疗效果的研究较少。基于此，本研究回顾性分析本院收治的200例DOR患者的临床资料，旨在分析IVF与ICSI在DOR患者中的助孕妊娠结局，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性分析本院2017年2月至2019年2月诊治的200例高龄DOR患者的临床资料。按照受精方式分为观察组与对照组，各100例。观察组年龄35～50岁，平均（40.32±4.11）岁；体重指数18～28 kg/m2，平均（22.15±2.34）kg/m2；不孕时间1～8年，平均（4.58±2.35）年。对照组年龄35～50岁，平均（40.41±4.25）岁；体重指数18～28 kg/m2，平均（22.26±2.27）kg/m2；不孕时间1～9年，平均（4.62±2.45）年。两组临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会审核批准。患者及家属均知情同意并签署知情同意书。

纳入标准：年龄≥35岁；促卵泡激素（folliclestimulating hormone，FSH）＞10 U/L；双侧窦卵泡计数（antral follicle counting，AFC）＜5个；既往未行IVF/ICSI；男方精液正常。排除标准：合并严重肝、肾等重要脏器病史者；恶性肿瘤者；存在宫腔病变、子宫畸形者；有智力、精神障碍者；临床资料不完整者。

1.2 方法 所有患者均给予常规促排卵方法，在注射人绒毛膜促性腺激素（HCG）35～36 h后进行取卵。男方需禁欲3～7 d，在取卵当天手淫取精。观察组接受IVF治疗：联合上游法、密度梯度离心分离精液，后形态分析运用改良巴氏染色法，采取大体授精法微滴法，保持1微滴50μl G-IVF，培养皿行3～4滴后覆盖矿物油，将卵母细胞、精子在取卵4 h后放入，比例为40 000∶1。将2～3个卵母细胞加入每个孔中，行5 h孵育，然后转移卵母细胞至G-IVF中去除其四周的颗粒细胞。对照组接受ICSI治疗：分离精液的方法同观察组，在G-IVF中对卵母细胞进行3 h的培养，采取透明质酸酶脱颗粒细胞，后在G-IVF中对已处理的卵子进行30 min的继续培养，通过400倍放大镜筛选出优质量精子进行ICSI。

1.3 观察指标 比较两组胚胎植入率、可用胚胎率、优质胚胎率、受精率、妊娠率、早孕流产率（怀孕3个月内出现流产）。

1.4 胚胎评级标准 ①细胞大小一致、胞质透亮无颗粒，碎片≤5%为I级胚胎；②细胞大小有细微差别，胞质有些许颗粒，碎片在6%～20%为Ⅱ级胚胎；③细胞大小显著不一致，胞质内颗粒显著，碎片在21%～50%内为Ⅲ级胚胎；④细胞大小极其不一致，胞质内颗粒严重多，碎片＞50%为Ⅳ级胚胎。优质胚胎为I、Ⅱ级胚胎，可用胚胎为I、Ⅱ、Ⅲ级胚胎。

1.5 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组胚胎状况比较 两组胚胎植入率、可用胚胎率比较差异无统计学意义；观察组优质胚胎率明显高于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 两组胚胎状况比较[n（%）]

2.2 两组妊娠结局比较 两组妊娠率比较差异无统计学意义；观察组受精率、早孕流产率明显低于对照组（P＜0.05），见表2。

表2 两组妊娠结局比较[n（%）]

3 讨论

卵巢储备是指女性人群的卵巢皮质内所存在的原始卵泡。卵巢储备功能主要反映卵巢皮质区卵泡发育形成优质卵母细胞的能力及女性生育潜能。DOR会影响育龄妇女的生育能力，影响患者身体健康。因此，探寻有效的治疗方法有利于提高患者的生育机会。近年来，随着医学技术的快速发展，IVF、ICSI等辅助生殖技术在不孕患者助孕中发挥重要作用。

IVF作为不孕患者助孕的一种重要方式，工作原理主要是在体外人工操控的环境下完成精子与卵子的受精过程，从而达到助孕的目的。IVF的适应证为排卵障碍、免疫性不孕、子宫内膜异位症、原因未明的不孕等，其应用解除了多数不能生育患者的痛苦，缓解了不孕患者家庭压力。有研究[4]发现，不孕患者IVF治疗的效果较好，能提高优质胚胎数及临床妊娠率。也有学者报道通过IVF治疗不孕虽然能改善不孕现象，但其受精率仍较低[5]。ICSI又名第二代“试管婴儿”，其工作原理主要是通过显微操作技术完成精子与卵子的受精过程，从而达到助孕的目的。自1992年应用ICSI成功使不孕患者妊娠并诞生了试管婴儿开始，ICSI在临床得到广泛应用。ICSI的适应证为男方严重精子障碍、前次IVF失败者、原因未明的不孕等，其临床发展壮大的基础为多种类型的显微授精技术。本研究结果显示，两组胚胎植入率、可用胚胎率、妊娠率比较差异无统计学意义，提示IVF与ICSI技术对于DOR患者均有较好的助孕作用。IVF与ICSI技术均为辅助生殖技术，二者操作过程均包括促排卵这一环节。研究[6]报道，评价药物诱导排卵效果的直接指标是卵母细胞数，而且胚胎活产率与获卵数密切相关。还有资料表明，胚胎活产率达到峰值时获卵数有15个，而获卵数更多时胚胎活产率反而降低[7]。因此，评价促排卵效果不应仅局限于获卵数量的最大值，而应增加优质胚胎数量。本研究结果显示，观察组优质胚胎率高于对照组（P＜0.05），提示相比ICSI技术，在高龄、卵巢储备功能减退患者中，IVF技术更有利于胚胎质量的完善。分析原因可能为，在ICSI实施过程中可能损害卵子，同时，ICSI技术的应用避开了正常受精过程中自然筛选精子活力的过程，这也可能会使卵子中注入有问题的精子，进而影响胚胎质量[8]。本研究中观察组早孕流产率低于对照组（P＜0.05），也证实了这一点。另外，本研究结果也显示，观察组受精率低于对照组（P＜0.05），提示ICSI技术有助于提高受精率。分析原因可能与ICSI技术是将单一精子注入卵子完成受精，此过程仅需数条精子即可完成，克服了IVF受精失败因素有关。

综上所述，与ICSI助孕比较，对DOR患者采用IVF助孕能提高优质胚胎率，减少早孕流产现象，但采用ICSI助孕能提高患者受精率，故应根据患者实际情况选择合适的助孕方式。