信号转导和转录激活因子3及鳞状细胞癌抗原在喉癌中表达及其临床意义

邵 静 魏鑫鑫 范栩嫚

喉癌(laryngeal cancer)是原发于咽喉或转移至喉部肿瘤的统称，分为原发性和继发性[1,2]，症状包括吞咽困难、声音嘶哑、耳痛、咳血、呼吸困难等。既往研究显示，喉癌与吸烟、饮酒、职业接触、HPV感染等有关。但目前尚无明确的病因，可能是以上因素综合作用的结果。喉癌可通过手术(包括微创手术和切除术等)、放射治疗、化学治疗和免疫治疗等，早期治疗生存率高达90%，因此早期诊断尤为重要[3]。目前尚无理想标志物，以达到细胞免疫学诊断的目的。信号转导和转录激活因子3(STAT3)参与肿瘤的发生，鳞状细胞癌抗原(SCC)是典型的肿瘤相关抗原。因此，本研究拟观察STAT3、SCC与喉癌的关系，为临床诊断和治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2019年1月至2020年5月于本院耳鼻喉科活检或经手术治疗留取病理组织的患者68例，其中获取喉癌病理组织样本68例，癌旁(0.5～1 cm以上)组织25例。患者年龄35～72岁，平均(57.4±3.5)岁；男性59例，女性9例；无淋巴结转移45例，伴颈部淋巴结转移23例；高分化49例，中低分化29例。全部患者均未接受化疗或免疫治疗。

1.2 主要仪器和试剂

STAT3和SCC单克隆抗体、免疫组化试剂盒购于R&D System公司(美国)，显色试剂盒购于Abcam公司(美国)，石蜡包埋和切片机购于莱卡公司(德国)，显微镜及显微拍摄仪购于奥林巴斯公司(日本)。

1.3 观察指标

应用免疫组化法(SP)检测样品组织中STAT3和SCC蛋白质表达水平，全部操作按试剂盒说明书完成。在显微镜下观察判定结果，细胞核或细胞质中出现黄色颗粒判定为阳性。在低倍镜视野下随机选取5个视野，在高倍镜下计数500个细胞后，对阳性细胞进行，并计算阳性细胞数量占比，以此百分比判定阳性肿瘤细胞占比及染色强度。其中无色判定为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，黄褐色为3分；含黄色颗粒细胞占比小于5%判定为0分，占比5%～25%为1分，占比26%～50%为2分，占比大于51%为3分。两结果相乘为此样本最终得分，0至1分判定为阴性，大于1分判定为阳性。

1.4 数据分析

2 结果

2.1 STAT3和SCC在样品组织中的表达情况

在喉癌组织中，STAT3和SCC阳性染色大部分出现于细胞质中，细胞核也见表达。喉癌组织中STAT3和SCC阳性率均明显高于癌旁组织(P<0.05)，见表1、表2。

2.2 STAT3、SCC表达与喉癌临床病理特征的关系

不同性别、年龄、吸烟史喉癌患者STAT3、SCC表达无明显差异(P>0.05)。临床分期Ⅰ+Ⅱ期、高分化、T1～T2浸润深度患者STAT3阳性率明显低于Ⅲ+Ⅳ期、中低分化、T3～T4浸润深度患者(P<0.05)，临床分期Ⅰ+Ⅱ期、高分化、无淋巴结转移、T1～T2浸润深度患者SCC阳性率明显低于Ⅲ+Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移、T3～T4浸润深度患者(P<0.05)，见表3。

表3 STAT3、SCC表达与喉癌临床病理特征的关系(例，%)

3 讨论

STAT3定位于细胞质中，参与体内细胞因子、生长因子介导的信号传递和转导，从而调节各种不同的生理功能[4]。同时作为信号转导及转录活化因子家族的一员，STAT3也参与细胞凋亡和增殖、组织修复和再生过程。已有研究证实，STAT3在肺鳞状细胞癌中阳性表达率明显升高，在胃癌组织中强阳性表达[5,6]。这些都证实STAT3与恶性肿瘤疾病显著相关。本研究显示相同的结果，相较于癌旁组织，喉癌病理组织中STAT3阳性表达率明显升高。进一步分析STAT3与喉癌患者临床病理特征的关系发现，随着患者临床分期的上升、病理分化的降低和浸润深度的增加，患者喉癌病理组织的STAT3阳性表达率明显上升。这些结果都表明，STAT3高表达或表达增加可能促进喉癌疾病的发生和发展，也增加恶性肿瘤的浸润及恶化程度，同时促进癌细胞转移。究其原因，可能STAT3高表达促进细胞因子、生长因子介导的信号传导，激活细胞增殖，从而导致癌细胞扩增加速，增加癌细胞侵染能力。

SCC是一种在子宫、肺部和头颈等上皮细胞癌细胞质中表达的糖蛋白。现作为特异性较好的标志物，已被用于多种癌症诊断[7,8]。研究报道，在正常鳞状上皮组织中，可见极低水平SCC表达，但在鳞状上皮来源肿瘤细胞中可见SCC大量表达[7,9]。但SCC水平研究及临床价值讨论均集中于鳞癌，少见于喉癌。本研究比较喉癌病理组织和癌旁组织中SCC水平发现，喉癌病理组织SCC阳性率为73.5%，明显高于癌旁组织。进一步分析SCC与喉癌患者临床病理特征的关系发现，随着患者临床分期的上升、病理分化的降低、浸润深度的增加和淋巴结的转移，患者喉癌病理组织的SCC阳性表达率明显上升。与STAT3结果相同，SCC高表达或表达增加可能促进喉癌疾病的发展，也增加恶性肿瘤的浸润及恶化程度，同时促进癌细胞转移。这可能是高表达水平的SCC经淋巴系统进入血液，从而诱导癌细胞浸润和转移，导致癌细胞加速扩散引发疾病进展。

但由于本研究纳入时间和资料受限，未对STAT3、SCC水平与患者治疗、疾病进展的相关性展开研究，故无法了解上述两指标与不良预后的关系。因此在下一步的研究中，本研究拟扩充样本量，并延长随访时间，以对上述问题更好了解。

综上所述，喉癌组织STAT3和SCC均呈过表达，STAT3和SCC均与喉癌患者临床病理特征相关。