可溶性4-1BB在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的水平及意义

刘倩，李静

（南阳医学高等专科学校第一附属医院 检验科，河南 南阳 473000）

全世界约1／3的人口曾被乙型肝炎病毒（HBV）侵袭，其中1／4的患者可进展为慢性乙型肝炎（CHB），若未能及时干预可进展为肝硬化、肝衰竭、肝癌等［1］。干扰素、核苷酸类及其类似物为常用于治疗CHB的药物，但疗效不理想。上述药物对HBV清除能力与机体免疫应答过程关系密切，取决于细胞免疫应答活性及强度。T细胞免疫是机体发挥免疫杀伤作用的主要途径，T细胞的激活需接受抗原受体的信号呈递，同时需共刺激信号传递抗原刺激的信息。可溶性4－1BB（s4－1BB）是一种在活化的T细胞及NK细胞上表达的诱导型共刺激受体，可通过与其配体相互结合，为T细胞增殖及溶细胞活性提供共刺激信号［2］。研究［3］表明，s4－1BB在脑膜炎病毒、水疱性口炎病毒急性感染期间明显升高。本研究探讨s4－1BB在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的水平及意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2019年10月至2020年10月我院收治的120例慢性乙型肝炎病毒感染患者作为观察组，另选取同期120例健康者作为对照组。纳入标准：符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015版）》中相关标准；入组前6个月未接受抗病毒治疗；接受穿刺活检；对本研究知情。排除标准：丙型、甲型或酒精性肝炎；自身免疫性肝炎；合并全身感染性疾病；合并恶性肿瘤。观察组男68例，女52例；年龄20～58岁，平均（38.54±4.29）岁。对照组男71例，女49例；年龄20～60岁，平均（39.19±4.51）岁。两组的一般资料比较无统计学差异（P＞0.05），有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 方法采集受试者空腹静脉血，离心分离，酶联免疫法检测s4－1BB（试剂盒购自美国Merck－Millipore）、干扰素－α（INF－α）、干扰素－β（INF－β），试剂盒由上海纪宁实业有限责任公司提供，严格参照仪器说明书操作。PCR法检测HBVDNA载量。穿刺活检：超声引导下行经皮肝穿刺活检，用10%甲醛固定，HE染色。肝组织炎症程度：根据《慢性乙型肝炎防治指南（2015更新版）》中关于肝脏炎症活动度的标准将其分为G0～G4，G0（无肝炎）9例，G1（轻度肝炎）60例，G2（中度肝炎）37例，G3（重度肝炎）11例，G4（肝坏死）3例。肝组织纤维化程度：S0～S4期，S0期（无纤维化）20例，S1期（轻微纤维化，无纤维隔）41例，S2期（轻度纤维化，存在纤维隔）51例，S3期（纤维化明显，4条及以上纤维隔）6例，S4期 （肝硬化）2例。

1.3 统计学方法采用SPSS 21.0统计软件处理数据。计量资料行t检验或F检验，相关性采用Pearson相关分析；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 s4－1BB、INF－α、INF－β水平观察组s4－1BB水平高于对照组，INF－α、INF－β水平低于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组的s4－1BB、INF－α、INF－β水平比较（±s）

表1 两组的s4－1BB、INF－α、INF－β水平比较（±s）

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2.2 s4－1BB与HBV-DNA载量的关系根据HBV-DNA载量将慢性乙型肝炎病毒感染患者分为<104组（n＝24）、104～105组 （n＝28）、105～106组 （n＝34）、＞106组 （n＝34），其s4－1BB水平分别为 （61.23±6.14）ng／mL、 （81.24±5.10）ng／mL、 （92.06±5.80）ng／mL、 （104.61±6.19）ng／mL，比较差异显著（F＝277.271，P＜0.05），两两比较差异均有统计学意义 （P＜0.05）。

2.3 s4－1BB与患者肝组织病理的关系s4－1BB水平在不同肝组织炎症程度及肝组织纤维化程度方面比较差异有统计学意义（P＜0.05）；s4－1BB水平在G0～G4之间依次升高，两两比较差异显著（P＜0.05）。s4－1BB水平在S0～S4之间依次升高，两两比较差异显著（P＜0.05）。见表2。

表2 s4－1BB与患者肝组织病理的关系（±s）

表2 s4－1BB与患者肝组织病理的关系（±s）

肝组织病理 n s4－1BB（ng／mL） F P肝组织炎症程度 G0 9 65.12±4.12 G1 60 85.59±4.59 G2 37 98.12±5.91 G3 11 106.61±6.20 G4 3 118.24±5.89肝组织纤维化程度 S0 20 68.24±4.77 135.400 <0.05 S1 41 86.13±5.10 S2 51 93.22±5.49 S3 6 105.61±5.34 S4 2 116.79±6.31 116.789 <0.05

2.4 s4－1BB与INF－α、INF－β相关性分析Pearson相关性分析显示，s4－1BB与INF－α、INF－β均呈负相关 （r＝－0.460，P＜0.05；r＝－0.665，P＜0.05）。见图1。

图1 s4－1BB与INF－α、INF－β相关性散点图

3 讨论

机体固有免疫反应是抵御病原菌侵袭的首道防线，通过抗原抗体相互识别，激活相应的细胞、体液免疫反应，诱导干扰素及其他炎性因子的合成、分泌，建立有效防御体系。机体固有免疫是适应性免疫的基础，在一定程度上决定感染结局。HBV是嗜肝DNA病毒，主要由正嗜肝DNA病毒及禽嗜肝DNA病毒组成，前者为感染人体的主要病毒，可引起急慢性肝炎，在外周血液循环中可检测到HBV－DNA存在。研究［4］表明，激活或阻断免疫检查点OX40或程序性死亡因子－1可部分或完全清除HBV感染。s4－1BB主要存在活化的单核细胞、巨噬细胞、B细胞及T细胞，抗体通过提供共刺激信号增强T细胞的免疫监视及杀伤作用［5］。研究［6］表明，激活s4－1BB信号传导及阻断程序性死亡因子－1可增强肝内HBV特异性T细胞反应，s4－1BB信号增强以非细胞溶解方式抑制HBV复制。

本研究结果显示，慢性乙型肝炎病毒感染患者s4－1BB水平高于健康者，INF－α、INF－β水平低于健康者，提示慢性乙型肝炎病毒感染患者固有免疫能力降低。相关性分析结果显示，s4－1BB与INF－α、INF－β呈负相关 （P＜0.05），提示s4－1BB水平越高，慢性乙型肝炎病毒感染患者免疫力越低。本研究结果亦显示，不同HBV-DNA载量患者的s4－1BB水平存在差异，且随着HBV－DNA载量增加，血清s4－1BB水平呈升高趋势；慢性乙型肝炎病毒感染患者肝组织炎症活跃度及纤维化程度不同，s4－1BB水平表达不同，表现为随着肝组织炎症活跃程度增强、纤维化程度加重，其水平升高，提示机体抵抗HBV的能力越低，s4－1BB水平越高。

综上所述，s4－1BB在慢性乙型肝炎病毒感染患者中表达水平较高，且与患者HBV－DNA载量、肝组织炎症程度、肝组织纤维化程度存在关联。