基于CiteSpace分析2011年—2020年全球肝癌免疫治疗研究领域的热点及趋势

张稚淳， 孙力超,2a， 孙秋月， 彭 亮， 田 古

1 北京中医药大学东直门医院 重点实验室， 北京 100700； 2 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院 a.分子肿瘤重点实验室，b.科研处， 北京 100021；3 中日友好医院 北京市免疫炎性重点实验室，中日友好医院临床医学研究所， 北京 100029

肝癌是我国第四常见恶性肿瘤，第二大恶性肿瘤致死病因，严重威胁我国居民的生命和健康[1]。目前，针对肝癌的治疗手段主要包括手术切除、靶向治疗、放化疗、介入治疗等[2]，但这些治疗手段疗效有限，肝癌5年生存率<10%[3]。新兴的免疫治疗手段，如程序性死亡受体1(PD-1)抗体、PD-1配体(PD-L1)抗体、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抗体，使肝癌治疗的客观缓解率达20%左右，标志着肝癌治疗正式进入免疫治疗时代[4]。为进一步了解肝癌免疫治疗领域的研究现状和未来发展趋势，本研究运用文献计量学方法对近10年Web of Science-SCI Expanded数据库中收录的肝癌免疫治疗领域的文献进行统计和可视化分析，以期为研究人员从事相关研究提供参考。

1 资料与方法

1.1 数据来源 选取Web of Science-SCI Expanded数据库，检索策略：#1 TS=(Liver Neoplasms OR Neoplasms，Hepatic OR Neoplasms，Liver OR Liver Neoplasm OR Neoplasm，Liver OR Hepatic Neoplasms OR Hepatic Neoplasm OR Neoplasm，Hepatic OR Cancer of Liver OR Hepatocellular Cancer OR Cancers，Hepatocellular OR Hepatocellular Cancers OR Hepatic Cancer OR Cancer，Hepatic OR Cancers，Hepatic OR Hepatic Cancers OR Liver Cancer OR Cancer，Liver OR Cancers，Liver OR Liver Cancers OR Cancer of the Liver OR Cancer，Hepatocellular)AND #2 TS=(Immunotherapy OR Immunotherapies OR Immunity therapy)，时间跨度：2011年—2020年，文献类型：Article，语种：English，索引：SCI Expanded。

1.2 统计学方法 共检出文献2014篇，将所有文献全记录与引用的参考文献以纯文本格式导出，首先采用CiteSpace 5.7.R5软件对数据进行去重[5]，去重后剩余文献1972篇。通过CiteSpace和Web of Science数据库自带文献统计工具根据研究内容不同，设置不同分析参数，对研究内容进行可视化分析。

2 结果

2.1 发文量年度分布 2011年—2020年肝癌免疫治疗相关文献发表量为2014篇，被引用频次总计45 847次，每项平均引用次数为22.76，H指数(H-index)[6]为89，表明有89篇文献已被引用89次。2011年发文量为84篇，2011年—2015年发文量平稳增长，2015年发文量(125篇)较2014年下降3篇，2015年以来发文量迅速增长，尤其是2020年发文量(442篇)较2019年发文量(305篇)增长44.9%。

2.2 研究国家分布 将Node types设定为Country(国家)，时间跨度为2011年—2020年，时间切片为1年，运行CiteSpace，获得节点数为63，连线数为190，密度为0.097 3的肝癌免疫治疗研究国家可视化图谱(附录1)。结果显示，全球共有63个国家开展肝癌免疫治疗相关研究，发文量排名前5位的国家分别是中国(898篇，45.5%)、美国(598篇，30.3%)、日本(181篇，9.2%)、德国(135篇，6.8%)和意大利(92篇，4.6%)。该领域中心性(衡量某个节点在网络中的重要性和与其他节点之间联系的密切程度)排名前5位的国家分别为美国(0.42)、英国(0.22)、西班牙(0.21)、德国(0.17)和法国(0.17)，中国(0.06)居第10位。

2.3 研究机构分布 将Node types设定为Institude(机构)，时间跨度为2011年—2020年，时间切片为1年，运行CiteSpace，获得节点数为346，连线数为642，密度为0.010 8的肝癌免疫治疗研究机构可视化图谱(附录2)。全球共有346个机构开展肝癌免疫治疗相关研究，发文量排名前5位的研究机构分别是中山大学(69篇)、美国国家癌症研究所(51篇)、复旦大学(50篇)、上海交通大学(46篇)和史隆凯特琳癌症中心(40篇)。该领域中心性排名前5位的机构分别为德国癌症研究中心(0.21)、中国科学院大学(0.2)、美国国家癌症研究所(0.13)、史隆凯特琳癌症中心(0.12)和斯坦福大学(0.12)。

2.4 研究作者分布 将Node types设定为Author(作者)，时间跨度为2011年—2020年，时间切片为1年，运行CiteSpace，获得节点数为458，连线数为1004，密度为0.009 6的肝癌免疫治疗研究作者可视化图谱(附录3)。全球总共有458位作者参与肝癌免疫治疗研究，发文量排名前5位的作者分别是Tetsuya Nakatsura(15篇)、Eishiro Mizukoshi(15篇)、Shuichi Kaneko(14篇)、Jibing Chen(10篇)和Lizhi Niu(10篇)。

2.5 期刊分布 通过Web of Science-SCI Expanded数据库自带文献统计工具进行出版物统计，2014篇肝癌免疫治疗文献总共分布于577种期刊中，该领域刊载文献量最多的期刊是JournalforImmunotherapyofCancer(61篇)，载文量TOP10期刊见表1。

表1 载文量TOP10期刊

2.6 被引文献分析 通过Web of Science引文报告进行被引频次统计，2011年—2020年肝癌免疫治疗文献被引频次逐年增长。2011年被引频次仅为78次，2020年被引频次已高达13 643次。被引次数排名前5位的肝癌免疫治疗文献见表2，其中，El-Khoueiry[7]等于2017年发表的CheckMate 040临床试验文章的引用率最高。

2.7 研究热点分析 将Node types设定为Keyword(关键词)，时间跨度为2011年—2021年，时间切片为1年，运行CiteSpace，获得关键词频次和中心性排名前20位的关键词见表3。通过关键词聚类分析，获得Q=0.4612、S=0.7468的关键词聚类，包括cell、vaccine、sorafenib、cancer immunotherapy(表4)。将肝癌免疫治疗的4个大类研究方向根据各聚类中关键词出现的频次细化，同时结合表2、3的相关信息，可见肿瘤相关巨噬细胞、溶瘤病毒(如腺病毒)、肿瘤疫苗[如树突状细胞(DC)疫苗和甲胎蛋白疫苗]、过继免疫细胞(如T淋巴细胞、自然杀伤细胞、CTL、细胞因子诱导杀伤细胞)、免疫检查点抑制剂(如抗PD-1、抗CTLA-4)及免疫联合治疗是肝癌免疫治疗领域研究的热点。

表2 被引次数TOP5文献

表3 高频和高中心性关键词

2.8 研究趋势分析 运行CiteSpace，在关键词聚类的基础上，通过“Burstness”获得突显词(表5)，2018年以前突显的关键词包括DC、过继免疫治疗、CTL等，2018年—2020年突显的关键词为免疫检查点抑制剂、PD-1阻断、检查点抑制剂。分析突显图发现，肿瘤疫苗→溶瘤病毒免疫治疗→过继免疫细胞治疗→免疫检查点抑制剂治疗是肝癌免疫治疗领域的研究趋势；免疫检查点抑制剂相关研究是重点研究方向。

表4 关键词聚类分析结果

表5 肝癌免疫治疗研究相关突显词出现的年度排序(TOP25)

3 讨论

肝脏是一个“免疫特惠”器官，其中T淋巴细胞、肿瘤相关巨噬细胞和肿瘤相关中性粒细胞等组成免疫抑制微环境，促进肝癌细胞的免疫逃逸。因此，如能逆转肝脏免疫抑制微环境，将可能会激活人体免疫功能，杀灭肿瘤细胞。目前，肝癌免疫治疗已成为肝癌治疗研究的新方向。2017年，PD-1抑制剂nivolumab获批作为肝癌患者sorafenib治疗失败的二线用药，标志着肝癌治疗正式进入免疫时代[4]。

本研究通过CiteSpace分析发现，近10年肝癌免疫治疗相关文献发文量和被引频次逐年上升；2012年，我国在该领域发文量超越美国，居世界首位，占全球发文量的45.5%。进一步分析发现，肝癌免疫治疗领域的研究趋势表现为：肿瘤疫苗→溶瘤病毒免疫治疗→过继免疫细胞治疗→免疫检查点抑制剂。免疫检查点抑制剂、PD-1阻断是近3年的突显词，标志着该领域的重点研究方向。聚类分析发现，肿瘤相关巨噬细胞、溶瘤病毒、肿瘤疫苗、过继免疫细胞治疗、免疫检查点抑制剂的治疗、免疫治疗联合靶向治疗等联合治疗的研究是该领域研究的热点。

关键词突显图显示，2018年以前，全球肝癌免疫治疗研究主要围绕肿瘤疫苗、溶瘤病毒和过继免疫治疗展开。肿瘤疫苗可激活机体免疫系统特异性杀伤肿瘤细胞，目前已被用于肿瘤的治疗和预防肿瘤复发。研究[8]发现，肝动脉栓塞治疗后的肝癌患者注射链球菌源性抗肿瘤免疫治疗剂OK432刺激后的DC疫苗，无复发存活率较未接种患者明显延长。溶瘤病毒是一类能够靶向在肿瘤细胞中复制和增殖，导致肿瘤细胞溶解和死亡的病毒，可以自然产生，也可经基因工程改造制得。来自清华大学的Huang等[9]开发的溶瘤病毒带有多个基因开关，可以定量杀伤肿瘤，在肝癌的临床前试验中也已取得明显的疗效。溶瘤病毒与其他免疫治疗方法联合也可以增强抗肿瘤效果[10]。过继免疫细胞治疗是一种新型的免疫疗法，通过收集患者外周血中的免疫效应细胞进行体外培养，使之具有抗肿瘤活性，然后回输到患者体内，从而发挥杀伤肿瘤的作用。研究[11]显示，接受DC-CTL输注患者的总生存期和无进展生存期分别达到了12.8个月和9个月，明显高于未经DC-CTL治疗患者。过继免疫治疗虽然疗效显著，但是易发生细胞因子释放综合征和免疫效应细胞相关性神经毒性综合征等不良反应。

免疫检查点抑制剂是近3年突显的关键词，是目前肝癌免疫治疗领域的重要研究方向。CD47结合信号调节蛋白α受体[12]及黑色素聚集激素1β(MCH1β)结合白细胞免疫球蛋白样受体1[13]2条信号通路的激活，导致肿瘤相关巨噬细胞从免疫杀伤到免疫抑制的转变。阻断CD47、MCH1β纠正巨噬细胞从免疫杀伤到免疫抑制的转变能够提高肿瘤相关巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的作用。因此，针对巨噬细胞的CD47和MCH1β免疫检查点抑制剂的药物研究将会为肝癌患者带来新的治疗选择。肿瘤细胞还通过表达与T淋巴细胞相互作用的抑制性免疫检查点分子来抑制机体的免疫应答，使其避免被免疫系统清除。通过阻断免疫检查点的免疫疗法，可有效调节T淋巴细胞的免疫活性，从而增强T淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。CTLA-4和PD-1是目前备受关注的针对T淋巴细胞的免疫检查点。Tremelimumab作为一种CTLA-4抑制剂，其用于肝癌治疗的部分缓解率为17.6%，疾病控制率为76.4%，疾病进展时间为6.48个月[14]。在CheckMate040研究[7]中，PD-1抑制剂Nivolumab一线治疗晚期肝癌的客观缓解率达20%，中位生存时间为28.6个月。虽然当前临床研究未见免疫抑制剂单药治疗在生存时间上取得明显获益，但免疫联合治疗在晚期肝癌充分发挥了协同增效作用，疗效较单药进一步提高。在GO30140研究[15]中，阿特珠单抗联合贝伐珠单抗(A+T)治疗队列的客观缓解率达36%，中位生存时间达17.1个月。

综上所述，免疫治疗是目前肝癌研究的热点和新方向，随着新的肿瘤疫苗、溶瘤病毒和免疫检查点抑制剂的研发，免疫检查点抑制剂的改进，以免疫治疗为基础的联合治疗将进一步提高肝癌的临床疗效，从而使免疫治疗成为临床治疗肝癌的更好选项，发挥更重要作用。

利益冲突声明：本研究不存在研究者、伦理委员会成员、受试者监护人以及与公开研究成果有关的利益冲突。

作者贡献声明：张稚淳负责检索研究、分析数据，起草文章；孙力超、彭亮参与文章修改，指导研究内容；孙秋月参与数据分析；田古负责修改文章及全文指导。

附录1～3见二维码