炎症性肠病患者粪便钙卫蛋白水平分析

嵇金陵，张小云，王宏刚，靳德甫，刘本，姜玉章(南京医科大学附属淮安第一医院检验科，江苏淮安 223300)

炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)是一组慢性、进行性炎症性疾病，病因仍未明确，临床特点主要为腹痛、腹泻及黏液脓血便，其特征在于活动期和缓解期交替出现且时间不可预测，严重影响了患者的生活质量。目前，IBD的筛查和监测主要依赖结肠镜检查和组织病理学评估，均为侵入性检查，存在一定的风险且有一定的禁忌症和局限性。粪便钙卫蛋白(fecal calprotectin, FC)是一种能与钙结合的不均一的复合蛋白质，主要位于中性粒细胞内，约占中性粒细胞胞浆蛋白的30%～60%，该蛋白质在粪便中的存在意味着中性粒细胞向胃肠腔的迁移，并且其浓度与肠腔内炎症的存在和程度密切相关[1]。因此，本研究旨在探讨FC作为一种非侵入性的评价肠道炎症水平指标的可能性。

1 材料与方法

1.1研究对象 选择2020年4月—2021年3月淮安市第一人民医院消化内科住院确诊的98例IBD患者为研究对象，男性66例(67.3%)，女性32例(32.7%)，年龄为(33±7.6)岁。纳入标准：(1)符合中华医学会消化病学会炎症性肠病学组制定的炎症性肠病诊断标准[2]；(2)年龄>18岁；(3)患者知情配合且一般资料完整。排除标准：(1)合并其他可能影响FC水平的疾病，如胃肠道肿瘤、胃肠道感染、肝硬化、长期服用非甾体抗炎药等；(2)妊娠或哺乳期妇女。IBD患者中包含克罗恩病(Crohn′s disease, CD)44例，溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)54例。健康人对照为本院体检中心体检健康者37例，男性21例(56.8%)，女性16例(43.2%)，年龄(41.9±10.4)岁。本研究获得本院医学伦理委员会批准(伦理文件编号：YX-2021-013-01)。

1.2仪器与试剂 WIZ-A202免疫分析仪、粪便钙卫蛋白胶体金免疫层析法检测试剂盒(厦门为正生物科技公司)，XN9000全自动血细胞分析仪及配套试剂(日本Sysmex公司)，Cobas c702自动生化分析仪及配套试剂(瑞士Roche公司)。

1.3方法 患者于肠镜检查前1～2 d，采集新鲜粪便标本50 mg，按试剂盒说明书处理标本并检测FC，WIZ-A202胶体金免疫分析仪将胶体金显色带转化为数字信号，并根据试剂的标准曲线将数字信号转化为FC的浓度值(正常参考区间：<60 μg/g，可报告区间：15～1 000 μg/g)。同时采集静脉血，用XN9000血细胞分析仪检测白细胞(white blood cell, WBC)、血红蛋白(hemoglobin, Hb)、中性粒细胞(neutrophil, Neu)及淋巴细胞(lymphoctye, Lym)，计算中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio, NLR)；Cobas c702全自动生化分析仪检测血清中胆红素(total bilirubin, TBil)(重氮法)、总蛋白(total protein, TP)(比色法)、清蛋白(albumin, Alb)(比色法)及钙离子(calcium, Ca)(比色法)浓度。

1.4统计学分析 采用SPSS 23.0统计软件进行。各组数据正态性检验用Shapiro-wilk检验，正态分布的计量资料用均数±标准差表示，两组之间比较用独立t检验；偏态分布的计量资料用中位数(25分位数，75分位数)表示，两组之间比较用Mann-WhitneyU检验。采用Spearman相关性分析评价FC与其余血液学指标之间的相关性。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1两组间FC及血液学指标水平比较 IBD组患者FC水平和NLR显著高于健康人对照组，差异均有统计学意义(P<0.001)，而TBil、TP、Alb、Ca及Hb水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P均<0.001)。两组之间WBC水平差异无统计学意义(P=0.158)。见表1。

表1 两组间FC及血液学指标水平比较

2.2IBD患者FC水平与血液学指标的相关性 IBD患者的FC水平和NLR呈正相关，差异有统计学意义(r=0.636,P<0.001)，与TBil(r=-0.529,P<0.001)、TP(r=-0.341,P=0.001)、Alb(r=-0.404,P<0.001)及Ca(r=-0.341,P=0.001)呈负相关，与Hb无相关性(r=0.176,P>0.05)。

3 讨论

FC由于理化性质稳定，可抵抗消化酶的破坏及肠道细菌的降解，在粪便中能被有效地检测到，其浓度与排至肠腔中的中性粒细胞数量成正比，所以在一定程度上可以特异性地反映肠道炎症情况[3]。本研究结果显示，IBD患者的FC水平显著高于健康人对照组，说明FC可作为筛查IBD的无创指标。

中性粒细胞作为吞噬细胞参与清除感染性炎症中的病原体，在无菌性炎症的组织修复和免疫调节中发挥重要作用。淋巴细胞则参与免疫系统的长期反应。机体发生炎症反应时，中性粒细胞与淋巴细胞之间的均衡状态被打破，NLR即升高。本研究中IBD患者的NLR显著高于对照组，且NLR与FC水平呈正相关，说明人体肠道内发生炎症时，产生大量炎性细胞，其中大部分是中性粒细胞，中性粒细胞可以由循环池穿过肠壁进入肠腔内，聚集在发生炎症的肠黏膜上，导致FC水平升高。

研究报道，氧化应激是IBD致病的潜在机制，可能是由于IBD患者活性氧产生的增加导致胆红素消耗增多，从而引起肠道损伤[4]。Lenícek等[5]已证实CD患者的低TBil水平是由炎症介导的氧化应激增加导致，TBil表达水平与炎症标志物表达呈负相关。本研究中IBD患者的血清TBil水平显著低于对照组，且与FC水平呈负相关。

IBD患者多数处于相对或绝对营养缺乏，这些患者的营养不良主要与吸收不良、药物治疗、胃肠道营养损伤和能量消耗增加有关[6]。本研究中IBD患者的TP、Alb以及Ca均低于对照组，并且这3个指标与FC水平呈负相关，FC结合3个指标可考虑作为判断IBD患者炎症程度及营养缺乏的标志物，对于是否进一步补充营养素具有指导意义。