2015—2020年荔波县家畜O型口蹄疫免疫抗体监测分析

覃英克，吴冬梅，覃 倩，莫汉兰，程振涛

(1.贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025；2.贵州省荔波县农业农村局，贵州 荔波 558400；3.凯里市动物疫病预防控制中心，贵州 凯里 556000)

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的高度接触性、热性、急性传染病，我国将其归为一类动物疫病，以发热，口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水疱和溃烂为主要症状，可通过空气传播，传播速度快，发病率高，偶尔可传染人[1]。该病可对猪、牛、羊等偶蹄动物的养殖生产造成严重经济损失[2]。2010—2018年，我国公开报道各类动物口蹄疫疫情达64起，虽然近年来我国在口蹄疫防控方面取得了很大进展，但口蹄疫疫情的零星发生依然存在[3]。目前，实施强制免疫仍然是我国防控家畜口蹄疫的重要手段，免疫动物群体的抗体水平是衡量免疫效果的主要指标之一[4]。现将2015—2020年荔波县猪、牛、羊口蹄疫免疫抗体监测情况报道如下，为下一步的防控工作提供参考和依据。

1 材料与方法

1.1 血清样品2015—2020年在荔波县养殖场(户)随机采集已免疫O型口蹄疫疫苗21～30 d的猪、牛、羊血液，静置自然析出血清，-20 ℃保存备用。其中：猪血清1 566份(55个规模场、80个散养户)，牛血清223份(22个规模场、42个散养户)，羊血清1 029份(82个规模场、12个散养户)。

1.2 主要试剂口蹄疫病毒O型竞争ELISA抗体检测试剂盒(武汉科前生物股份有限公司生产)。

1.3 主要仪器台式离心机(上海安亭科学仪器厂)、卧式冷藏冷冻转换柜(青岛海尔特种电器有限公司)、Multiskan FC型酶标仪[赛默飞世尔(上海)仪器有限公司]。

1.4 免疫抗体检测

1.4.1 检测方法取出保存于-20 ℃冰箱中的血清样品和口蹄疫病毒O型竞争ELISA抗体检测试剂盒，恢复至室温。血清样品、阳性和阴性对照5倍稀释。取抗原包被板，洗涤拍干，加入稀释好的血清样品、阳性和阴性对照各50 μL，各孔加入酶标记物50 μL，轻微振荡混匀，置37 ℃下孵育30 min；弃各孔反应液，洗涤拍干，各孔加入底物液100 μL，置20～25 ℃避光显色15 min；各孔加入终止液50 μL，用酶标仪测定各孔D450 nm值。

1.4.2 结果判定实验成立条件：阴性对照的平均D450 nm值与阳性对照的平均D450 nm值之差≥0.5。S为样品D450 nm值，N为阴性对照平均D450 nm值，S/N值<0.35则样品判为阳性，S/N值≥0.35则样品判为阴性。

2 结果

2.1 不同家畜O型口蹄疫免疫抗体检测情况由表1可见：检测猪养殖场(户)135个、样品1 566份，免疫抗体合格率为87.42%；牛养殖场(户)64个、样品223份，免疫抗体合格率为91.48%；羊养殖场(户)94个、样品1 029份，免疫抗体合格率为89.80%；3种家畜的总体免疫抗体合格率均达到国家标准要求(≥70%)，家畜群体免疫抗体合格率总体较高。

表1 家畜O型口蹄疫免疫抗体检测统计

2.2 不同养殖模式O型口蹄疫免疫抗体检测情况由表2可见：猪、牛、羊规模养殖场的平均免疫抗体合格率分别为91.4%、94.6%、92.6%，抗体合格率均在90%以上。散养户的平均免疫抗体合格率分别为84.1%、82.1%、68.9%，其中羊散养户的平均合格率未达到国家标准要求。从总体上看，规模养殖场的免疫抗体合格率要高于散养户。

表2 不同养殖模式O型口蹄免疫抗体检测结果

2.3 2015—2020年荔波县家畜O型口蹄疫免疫抗体检测情况由图1可见：6年中猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体平均合格率基本稳定在80%～100%之间，其中2015年牛、羊免疫抗体合格率较低，分别为78.43%、77.03%；2016年猪免疫抗体合格率较低(82.86%)。经调查分析发现与检测样品来源于散养户的占比较高有关。

图1 荔波县猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体检测

3 讨论

3.12016年农业农村部印发《国家口蹄疫防治计划(2016—2020 年)》，我国有计划地推广口蹄疫强制免疫，提高了易感动物的免疫力，特别是在边境复杂的流行环境下取得了较大的成效[5]。本文通过对贵州省荔波县2015—2020年猪、牛、羊O型口蹄疫免疫效果进行监测，结果除散养户的羊以外，均达到国家标准要求，说明荔波县猪、牛、羊O型口蹄疫强制免疫工作取得了较好的效果。

3.2不同养殖模式下，荔波县家畜O型口蹄疫免疫抗体合格率存在差异，总体情况为规模养殖场比散养户高。分析原因与散养户在接种过程中操作不规范、防疫意识淡薄等有一定关系[6]。2015—2017年统计数据中均有规模养殖场和散养户，能够充分体现本地区饲养家畜的总体免疫情况，但2018—2020年后主要是监测规模养殖场，散养户抽检较少，不能全面对本地区的免疫情况进行评估，有一定的片面性，其主要原因是2018年后荔波县养殖模式逐渐向规模化、集约化发展，散养户减少，难以采样等有关。