液体活检技术在肺癌辅助诊断中的应用研究进展

凌芸

（广西中医药大学，广西 南宁 530200）

0 引言

将液体活检技术应用到肺癌辅助诊断中，可使医师根据检查结果对患者病情、诊疗情况等进行评估、预测，在诊疗前可根据相应检测结果及时调整患者的诊疗方案，使患者能得到更及时有效的救治[1-2]。

1 液体活检技术在肺癌辅助诊断中的相关简述

1.1 肺癌的相关概述

肺癌是指起源于气管、支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤疾病。虽肺癌具体病因尚未明确，但一般情况下，肺癌主要是因吸烟、环境、遗传、大气污染、肺部感染等因素所致，即长期吸烟或长时间患肺结核等疾病的患者其肺癌发病率更高。由于患者肺功能受损，因此患者发病后多有呼吸困难、咳嗽、咯血等临床症状，易对患者的正常呼吸状态造成严重影响。同时随肿瘤增大，易对患者胸壁组织、喉返神经等部位造成侵犯、损伤，致患者出现胸痛、声音嘶哑等临床症状，对患者正常生活状态及生命安全造成严重影响[3-4]。就目前肺癌较常见的临床检查诊断方式而言，主要有X 线检查、支气管镜检查、胸腔镜检查等肺癌影像学、内镜检查方式。而随着医疗技术的进步发展，目前还可利用液体活检技术对肺癌患者进行检查诊断，使医师可更深入地了解患者具体病情，使患者能得到更有针对性的救治。

1.2 液体活检技术的相关简述

活检是一种较常见的临床病理学检查诊断方式，是指通过切取、穿刺、钳取等方式将病变组织从患者机体内取出，专业检验医师可根据病变样本评估患者病变处肿瘤状态，再利用病理学检查诊断方式，包括对所取样本进行包埋，将其切成薄片进行苏木素-伊红染色后，最后利用光学显微镜对病变样本组织进行形态分析、识别，以诊断受检者具体病情。而液体活检技术顾名思义则主要是利用受检者机体内液体，包括血液、唾液、尿液等，检测其体液内的细胞DNA、RNA 及蛋白质等物质的变化，来诊断受检者是否患肿瘤疾病，或诊断肿瘤疾病患者具体病情，使其能得到有效且有针对性的救治。由于液体活检技术通过受检者唾液、尿液等即可进行相关病症的检验，属非入侵性临床检查诊断方式，同常规活检检查诊断方式相比，此活检方式不必担心因病变组织的切取而对患者病症造成过多影响，可连续取样，对受检者样本进行多次检验，以提升检验准确度[5-6]。

2 液体活检技术在肺癌辅助诊断中的检验情况

液体活检技术所涉及到的液体类型较多，如尿液、血液等，因此对于不同体液，其具体的检验方式、检验诊断情况也会有所不同。下面对液体活检技术在肺癌辅助诊断中的检验情况进行叙述。

2.1 循环肿瘤细胞的检验诊断

循环肿瘤细胞是指进入人体外周血的肿瘤细胞，此类肿瘤细胞一般是因自发因素或诊疗操作因素自原病灶、转移灶处脱落，后进入外周血，随血液循环又转移至人体其他组织、器官处。一般情况下，循环肿瘤细胞在进入外周血后即会凋亡或被吞噬。因此在患者病情得到有效控制或无肿瘤转移现象时，患者外周血内的循环肿瘤细胞检测值会相对较低。通过外周血循环肿瘤细胞的检测，可有效评估受检者肿瘤病变情况，评估其肿瘤转移情况，由于肿瘤转移会对患者机体内其他正常组织、器官造成严重损伤，加重患者病情，因此通过对此指标数据的检验，即可有效评估受检者具体病情。

采集受检者血液样本，对其行液体活检技术检查诊断，可达较高的确诊率。在刘俊等[7]的研究中就有提及，对接受放疗治疗的非小细胞肺癌患者进行循环肿瘤细胞检测，通过对比患者放疗前后的循环肿瘤细胞阳性率可知，接受放疗治疗后，若患者循环肿瘤细胞检测阳性率下降，则基本可以取得较好的近期疗效。即利用液体活检技术对接受放疗治疗的肺癌患者进行诊疗前后的循环肿瘤细胞检测，可评估患者近期疗效，同时医师可根据检测结果适当调整患者的诊疗方案，及时改善诊疗效果不佳的诊疗方式，有效提升其整体的诊疗效果，使患者病情能得到及时控制，避免患者有病情恶化等不良事件发生。

2.2 循环肿瘤DNA 的检验诊断

循环肿瘤DNA 是指当肿瘤细胞体细胞DNA 脱落或当细胞凋亡后自动释放进入人体自身循环系统，一般此物质主要存在于血液、脑脊液等体液中，即医师通过采集受检者血液即可进行液体活检，整体检验方式更简便、有效。由于人体内细胞都有一定生存周期，无论是肿瘤细胞还是正常红细胞等，在人体内存活一段时间后，必定有自行凋亡现象，因此若受检者患肿瘤疾病，则其血液或脑脊液内循环肿瘤DNA 检测值必定会更高。同时由于循环肿瘤DNA半衰期短，虽人体自身循环、代谢在不断清除此类杂物，但肿瘤细胞也处于不断凋亡、繁殖的循环过程，因此通过此物质水平、形态等多方面的检验，也可及时反馈出受检者肿瘤发展情况。

利用液体活检技术进行循环肿瘤DNA 检验诊断，可有效检测出受检者机体内循环肿瘤DNA 存在状态，可作为诊断、预测受检者肿瘤病情的重要依据。在黎扬斯等[8]的研究中可知，21 例确诊为有脑膜转移的癌症患者，经循环肿瘤DNA液体活检技术检验诊断，可捕捉、确诊20 例患者有异常循环肿瘤DNA 检测迹象，此检验诊断方式敏感性高达95.20%，确诊率较高。即对肺癌患者行循环肿瘤DNA 液体活检技术检验诊断，可有效预测、评估患者是否患肺癌病症，可应用在早期肺癌检验诊断中。由于部分肺癌患者无明显临床症状，而X 线等影像学或内镜检查诊断方式，也易受肿瘤大小、位置、患者肺部是否伴有其他病症等多种因素影响，易影响医师的检查诊断效果。而在循环肿瘤DNA 液体活检技术检验诊断中，一旦患者有肿瘤疾病，肿瘤细胞开始有较规律的凋亡、繁殖，则患者机体内循环肿瘤DNA 检测值必定会处于较稳定的上升阶段，在任意时间段对患者行循环肿瘤DNA 液体活检技术检验诊断，其检测值多会超出正常范围。

2.3 微小核糖核酸的检验诊断

微小核糖核酸能通过进入线粒体待控制相应的基因表达，同时可通过mRNA 相结合以阻断蛋白编码基因的表达，因此微小核糖核酸是人体内重要的基因表达调控物质。由于肿瘤细胞主要是因基因表达有误，致细胞生长、发育出现异常现象，若受检者机体内有肿瘤，则其微小核糖核酸检查结果必定同正常检测结果相异，其微小核糖核酸表达必定有异常现象。

在尤冬山等[9]的研究中可知，对非小细胞肺癌患者进行微小核糖核酸检验，同Ⅰ期、Ⅱ期肺癌患者相比，Ⅲ期肺癌患者的微小核糖核酸基因表达检测值更高，且病变处微小核糖核酸检测值相比于病症周围的微小核糖核酸检测值更高。由此可知，若对肺癌患者行微小核糖核酸液体活检检验诊断，除可有效评估受检者具体病情外，还可通过人体血液、脑脊液等不同体液的微小核糖核酸检测值，诊断其机体各部位是否有肿瘤转移情况，即各组织、器官相应的病变情况。

2.4 外泌体的检验诊断

外泌体是指含复杂RNA、蛋白质的小膜泡，一般情况下，人体体液包括血液、尿液甚至乳汁等液体均可含外泌体，则液体活检技术可采集的样本种类较多[10-11]。外泌体的主要作用为通过其自身携带的蛋白质、核酸等物质来调节受体细胞的生物学活性，同时此物质可促进新生血管的生成，若受检者机体内有肿瘤病变情况，则肿瘤细胞可通过此类新生血管进行转移，进而致患者病情加重，对患者生命安全造成严重威胁。因此可通过液体活检技术对受检者进行外泌体检验，以评估、预测受检者病情发展情况，对新生血管生成快的患者，可及时进行肿瘤细胞转移方面的预防干预治疗，或通过抑制新生血管生成的治疗方式，控制患者病情，降低肿瘤细胞转移几率，保障患者的诊疗效果。

3 液体活检技术在肺癌辅助诊断中的临床应用

液体活检技术多用在肺癌辅助诊断中，即通过此检查诊断结果，可使医师对患者病情有进一步了解，以确定具体的诊疗方案，保障患者的诊疗效果。下面对液体活检技术在肺癌辅助诊断中的临床应用情况进行叙述。

3.1 早期筛查与检验诊断

目前较常见的肺癌临床检验诊断方式有X 线检查、支气管镜检查、ETC 检查等，一般通过此类检查方式即可对受检者是否患肿瘤疾病或其具体病情进行诊断评估。但在患者肺部出现肿瘤病变前，此类检查方式不可有效评估、预测其患者肺癌风险，因此可在肺癌早期筛查中加入液体活检技术，通过血液、尿液等样本的采集即可对受检者进行肺癌发生几率的评估、预测[12-13]。相比于传统活检方式，此检查方式属非侵入式，更简单、便捷，且有较高确诊率。虽健康人体中也会存在一定量的癌细胞，但若患者肺部病变处已有癌变现象，则其机体内肿瘤细胞数量必定会有所增加，而肿瘤细胞凋亡数量也会有所增加，因此通过液体活检技术对循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA 等指标进行检验，可有效评估受检者患肺癌风险，使其能得到更及时有效的救治，以降低肺癌患病风险。同时经X线等常规检验诊断后，还可对患者行液体活检技术检验诊断，对其机体内肿瘤细胞生长发育状态、转移情况、新生血管生成情况等进行评估诊断，以进一步确诊患者具体病情，同时可使医师对患者机体进行多方面的了解认识，除其肺部病变情况外，还可结合其新生血管生成情况等，进行诊疗方案的调节，做好相关预防诊疗措施，使患者病情能得到有效控制。

3.2 疗效检测

由于肺癌患者本就患肿瘤疾病，其机体恢复力、免疫力较差，而X 线等检查诊断方式具有一定的辐射性，因此需控制其接受X 线等方式的检查诊断次数，避免因辐射而对患者机体造成过多干扰、损伤。而液体活检技术具有非侵入式、可反复检测的优势，因此在患者日常诊疗过程中，可加入液体活检技术，通过采集患者血液、尿液等方式，对其各阶段的诊疗效果进行实时监测。并可建立液体活检检测档案，详细记录患者各诊疗阶段或接受不同诊疗方式后的病情变化，若其有循环肿瘤细胞检测值增加，病情恶化现象，则医师需及时调整诊疗计划，以提升患者临床疗效，延长患者总生存周期。同时由于患者接受有效诊疗后，其机体内循环肿瘤细胞等指标状态必定会有所变化，因此同影像学等较宏观的检查诊断方式相比，虽液体活检不能直接观察到患者肺部肿瘤大小、位置等方面的变化，但通过循环肿瘤细胞等指标可在患者接受诊疗后，及时反馈出相应诊疗效果，可有效评估患者早期对治疗的反应，能更及时地反馈出患者病情发展进程[14-15]。

3.3 指导临床靶向用药

由于部分肺癌患者在接受靶向治疗后会产生耐药性，而X 线等检测诊断方式多是通过患者肺部肿瘤大小的宏观变化，来诊断其具体诊疗情况，因此当患者出现耐药性后，医师不能及时发现，进而易耽误患者诊疗进程，致其出现病情恶化现象。若在患者接受靶向治疗后，在治疗前后，或定期对其进行液体活检技术检查诊断，则可通过循环肿瘤细胞等指标数据的变化，及时发现接受靶向治疗的患者是否出现耐药情况及其耐药程度，使医师可根据其检测结果及时调整靶向治疗方式。

3.4 评估预测诊疗效果及复发监测

肿瘤病症多有复发现象，因此患者经临床诊疗后，可利用液体活检技术进行复发监测。如上述所提及，对肺癌患者进行放疗前后液体活检微小核糖核酸检验，可通过放疗前的检测结果预测患者放疗诊疗情况，使医师在放疗前，即可根据检测结果适当地为患者调整诊疗方式。患者经诊疗出院后，可让患者定期入院进行液体活检技术检测诊断，同早期筛查类似，若受检者机体内循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA 等指标检测值有异常现象，则其多有肿瘤复发迹象，医师可根据相应检测结果及患者身体状态，对其进行预防治疗，以降低肺癌复发几率，提升患者整体的诊疗效果，延长患者5 年生存几率。

4 结论

综上所述，肺癌是较常见的恶性肿瘤疾病，随现代医疗技术的发展，除常规的X 线、支气管镜等检查诊断方式外，还可对肺癌患者行液体活检检查诊断方式。通过液体活检技术可对受检者的血液、尿液、脑脊液等液体进行循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA、微小核糖核酸、外泌体等指标数据的检查，使患者在非侵入情况下，接受多次检测，且不易对患者机体造成负面影响。由于循环肿瘤细胞是指自行或因诊疗操作致其脱落后进入外周血的肿瘤细胞，循环肿瘤DNA 则为肿瘤细胞体细胞DNA 脱落或当细胞凋亡后自动释放进入人体自身循环系统，微小核糖核酸对人体基因表达有重要调节作用，且若人体出现肿瘤病症，则微小核糖核酸的表达必定会出现异常，外泌体则可通过促进新生血管的生成，来促进肿瘤细胞的转移。因此利用液体活检技术对这几项指标数据进行检验，可有效评估受检者具体病情。在液体活检技术的辅助诊断应用中，此技术可早期筛查受检者患肺癌风险，同时可作为辅助检查，使医师进一步了解受检者具体病情。在诊疗方面，液体活检技术有非侵入式、可反复操作检验的优势，同X 线等检查方式相比，不易对免疫力较弱的肺癌患者造成负面影响，可实时检查患者各阶段或接受不同诊疗方式后的治疗疗效。同时可指导医师适当调整靶向治疗，使患者能得到更有效的救治，同时在接受放疗前也可根据此检测结果预测患者诊疗情况，使医师在放疗前能及时调整患者诊疗方案，以提升其放疗效果。患者出院后也可让患者定期接受液体活检检查诊断，以评估、预测其肿瘤复发几率，使其能得到及时的预防干预治疗。