原发性干燥综合征自身抗体谱阳性率比较及ANA、Ro60、SSB、Ro52及唇腺活检联合检测的意义

陈晓丹，谢泽贤，李情操

干燥综合征（SS）是一类以淋巴细胞浸润外分泌腺为特征的慢性自身免疫性疾病，本病女性多见，男女比为1∶9～1∶20，在临床上可以分为原发性、继发性SS[1]。SS可累及血液系统、肺脏、肝脏等重要内脏系统，主要临床表现为口干眼干、龋齿、肾小管酸中毒、关节疼痛、腮腺肿大、皮疹及雷诺现象等[2-3]。SS发病机制比较复杂，目前认为主要是受基因易感性、环境刺激等影响引起机体细胞免疫及体液免疫发生异常反应[4]。本研究回顾性分析原发性SS的患者的临床资料，探讨ANA、各项自身抗体及唇腺活检在检测SS中的应用，拟为临床提供相关数据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集宁波市医疗中心李惠利医院2019年1月至2021年8月收治的原发性SS患者105例，均符合2002年SS国际分类（诊断）标准[5]。其中男10例，女95例；年龄29～86岁，平均（58.2±11.8）岁。同时选择同期健康体检者110例，其中男14例，女96例；年龄30～85岁，平均（52.1±12.4）岁。两组一般资料差异无统计学意义（＞0.05）。

1.2 方法 空腹采集两组肘静脉血2～3ml，3500r/min离心10min，分离血清，立即检测或－80℃保存。采用间接免疫荧光法（IIF）检测抗核抗体，使用德国欧蒙试剂盒，严格按照说明书进行操作，血清起始稀释度为1∶100，同时检测1∶320、1∶1 000、1∶3 200，使用欧蒙EUROStarIII增强型荧光显微镜进行观察，当血清稀释度达1∶320或者更高时判定为阳性。采用磁微粒化学发光法检测抗核抗体靶抗原，使用科斯迈SMART 6500全自动化学发光测定仪配合浩欧博试剂盒进行检测，严格按照说明书进行操作，大于参考范围0～20RU/ml即为阳性。由临床医生进行唇部小唾液腺采样，由擅长灶性淋巴细胞浸润和灶性指数计数的病理科医生依照Daniels等的方案进行评分，唇腺灶性淋巴细胞浸润，并且灶性指数≥1个灶/4 mm2即为阳性[6]。

1.3 统计方法 采用SPSS21.0统计学软件对数据进行分析，计数资料2检验。＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组ANA、自身抗体阳性率比较SS组ANA检出率高于健康组（＜0.05）。SS组自身抗体Ro60、SSB、Ro52、CENP-B、M2及nRNP/Sm的阳性率均高于健康组（均＜0.05），见表1。

表1 两组ANA、自身抗体阳性率比较 例（%）

2.2 ANA、自身抗体联合检测检出率比较 ANA+Ro60、ANA+SSB、ANA+Ro52、ANA+唇腺活检、ANA+Ro60+唇腺活检、ANA+Ro60+SSB+唇腺活检的阳性率分别为89.5%、84.8%、88.6%、93.3%、98.1%、100%。见表2。

表2 ANA、自身抗体联合检测阳性率比较

3 讨论

SS是一类好发于绝经期之后或30～40岁女性的自身免疫性疾病，其发病率为0.3～0.4%。除了表现为口、眼干燥外，还可以影响肾脏、肺脏、神经系统及消化系统等[7]。SS炎症的始动因素是上皮细胞，当维持上皮细胞极性的蛋白质结构或者位置发生改变时，炎症被启动[8-9]。原发性SS可能由于免疫功能紊乱和异常从而产生多种自身抗体，导致造血系统的功能受到影响，表现为血细胞分析参数红细胞（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）明显减少[10]。有研究表明，对于血液系统的变化，单系统受累比较多见，占13.56%～33.33%，两系或三系同时受累占6.78%～10.50%[11]。

间接免疫荧光法对ANA的检测有重要价值，对自身免疫性疾病有辅助诊断价值。ANA存在于细胞核、细胞浆、细胞骨架以及细胞分裂周期中，不同的自身免疫性疾病拥有不同的抗核抗体谱[12]。ANA是临床应用最多的自身免疫疾病标志物，当ANA滴度＞1∶320时，对多种自身免疫性疾病的诊断有着重要的意义[13]，因此本次研究将ANA阳性的界定标准定为滴度≥1∶320，将滴度为1∶100的患者界定为阴性。自身抗体谱成员众多，其中抗SSA、抗SSB被认为对SS诊断意义重大，同时在其他自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮，多肌炎、皮肌炎、硬皮病等也可出现[14]。SSA抗原是一个小核糖核蛋白.其中最重要的是52 kD（Ro52）和60 kD（Ro60）两种蛋白；SSB抗原则是一个分子质量为48 kD的磷酸化蛋白[13]。

本研究回顾性分析了105例原发性SS患者的ANA及各项自身抗体，与110例健康人群相比，SS患者ANA、Ro60、SSB、Ro-52、CENP-B、M2及nRNP/Sm的阳性率均高于健康人群（均＜0.05）；自身抗体谱以Ro-52、SSB及Ro60的阳性率最高，分别为65.71%、62.86%、28.57%。唇腺组织活检可以提高原发性SS的阳性率[15]。本研究唇腺活检阳性率为87.62%（92/105），高于ANA及自身抗体，与文献[16]吻合。但有文献报道由于唇腺增龄性改变与SS唇腺病理学变化相似、唇腺活检病理分级标准不一致以及患者自身情况，如糖皮质激素的使用改变唇腺病理表现等原因，造成唇腺活检的灵敏度不高[17]。本研究联合比较ANA+Ro60、ANA+SSB、ANA+Ro52、ANA+唇腺活检、ANA+Ro60+唇腺活检、ANA+Ro60+SSB+唇腺活检的阳性率，发现ANA+Ro60+SSB+唇腺活检的阳性率最高，达100%。

综上所述，自身抗体Ro60、SSB、Ro52在原发性SS患者中检出率较高，可与ANA联合作为原发性SS的普查方式，联合ANA+自身抗体+唇腺活检的方式，可以提高疾病检出率，减少漏诊。