氯已定、次氯酸钠及双氧水根管冲洗对牙髓炎根管中基质金属蛋白酶MMP-8及MMP-2水平的影响

张绍芳,谷达玮,童琳（湖南省郴州市第一人民医院,湖南 郴州 423000）

基质金属蛋白酶（MMPs）与口腔的多种疾病具有密切的关系，其属于内切蛋白水解酶家族，且对锌离子有高度的依赖性，可降解细胞外基质的多种蛋白质及基底膜[1]。临床上大量研究表明，炎症因子对牙髓细胞进行刺激，能合成的MMPs包括MMP-28、MMP-20、MT1-MMP、MMP-9、MMP-8、MMP-3及MMP-2等[2]。牙髓组织处于炎症状态时，MMPs的水平会出现上升趋势，国外研究中发现，慢性牙髓炎组织中的MMP-1、MMP-13及MMP-8水平高于正常牙髓组织，其研究结果提示，MMPs与牙髓的发展及炎症过程中细胞外基质的破坏具有密切联系[3]。本研究通过探讨分析临床上三种较为常用的根管冲洗液，对基质金属蛋白酶MMP-8及MMP-2水平的影响主要包括双氧水、氯已定、次氯酸钠。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2019年1月-2020年6月于本院收治的240例拟行根管治疗的牙髓炎患者，选用的牙齿均为单根管恒前牙或恒前磨牙，依据随机数表法将患者分为A、B、C、D4组，4组患者各60例且各组间一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。纳入标准：①所有患者近3个月内均未使用抗生素及免疫制剂；②无系统性疾病，牙周袋在3mm以下；③患者及患者家属均签署知情同意书，且能配合完成根管治疗。

1.2 实验方法 A组患者行氯已定治疗，2%氯已定溶液在根管冲洗备用；B组患者行次氯酸钠进行治疗，1%次氯酸钠溶液在根管冲洗备用；C组患者采用双氧水治疗，3%双氧水溶液在根管冲洗备用；D组患者采用生理盐水，0.9%生理盐水溶液在根管冲洗备用。去除患牙上腐质并去除牙髓，再将患牙根管扩通至35#通过K锉扩通，吸潮纸捻取样。常规机用镍钛挫扩挫，根管冲洗液冲洗，干燥后再次吸潮纸捻取样。最后提取根管渗出液，在根管内放入35#吸潮纸尖，放置片刻，立刻放回消毒EP管内，重复进行3次操作。样品在-70℃下保存。

1.3 样本处理 根据酶联免疫吸附法检测MMP-8及MMP-2水平，具体操作根据试剂盒说明书进行样品检测，最后绘制标准曲线，并求出MMP-8及MMP-2浓度水平。

1.4 统计学方法 采用SPSS23.0统计软件进行数据处理。计量资料以（±s）表示，采用独立样本t检验；计数资料以n（%）表示，行χ2检验。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 MMP-8水平比较 A组及C组治疗后MMP-8水平低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05），B组及D组虽治疗后MMP-8水平低于治疗前，但差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 各组治疗前后MMP-8水平比较（±s,ng/mL）

表1 各组治疗前后MMP-8水平比较（±s,ng/mL）

组别 A组（n=60） B组（n=60） C组（n=60） D组（n=60）治疗前 0.27±0.03 0.22±0.06 0.25±0.04 0.26±0.03治疗后 0.21±0.02 0.21±0.03 0.19±0.02 0.25±0.02 t 7.442 0.667 6.000 1.240 P＜0.001 0.509 ＜0.001 0.215

2.2 MMP-2水平比较 A组治疗后MMP-2水平低于治疗前（P＜0.05），B、C、D三组治疗后MMP-2水平差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 各组治疗前后MMP-2水平比较（±s,ng/mL）

表2 各组治疗前后MMP-2水平比较（±s,ng/mL）

组别 A组（n=60） B组（n=60） C组（n=60） D组（n=60）治疗前 0.50±0.11 0.42±0.04 0.41±0.08 0.56±0.45治疗后 0.42±0.05 0.39±0.07 0.39±0.04 0.47±0.01 t 2.961 1.664 1.000 0.894 P 0.005 0.096 0.324 0.377

3 讨论

牙髓炎是指发生在牙髓上的炎症性病变，大部分是由龋齿发展而来，是口腔中多发的口腔疾病，临床表现为牙痛，严重者会导致头痛、脸痛。引起牙髓炎的病因有很多，如细菌感染，物理和化学刺激等病因，其中细菌感染为主要病因。在牙髓炎的发展中，MMP家族蛋白在其炎症的发展过程中有着重要作用，其既能破坏牙髓组织，又能继发参与机体免疫反应及防护功能。相关研究报道，炎症因子及其内毒素感染牙髓组织，对中性粒细胞脱颗粒产生刺激作用，从而促进炎症因子的释放，进一步对MMPs的活化产生诱导作用[4]。有国外研究学者通过明胶酶谱法及酶联免疫吸附法对正常的牙髓组织及炎症牙髓组织中的MMP-2、MMP-9、MPO水平及活性进行检测，检测结果提示，MMP-2、MMP-9、MPO水平在炎症牙髓组织中高于正常的牙髓组织，且只有在炎症组织中能检测到活化MMPs[5]。对牙髓的脓肿组织根管渗出液进行检测，结果发现基质金属蛋白酶8具有较高水平表达。在本研究中，各组患者对牙根管进行治疗后MMP-2及MMP-8水平均较治疗前降低，可提示为根管冲洗明显抑制MMP-2及MMP-8表达，表现出根管治疗过程中能有效降低基质金属蛋白酶8水平。临床上评估牙髓炎的病情程度，是临床上对治疗成功情况预测的必要条件[5]。若单纯的通过临床症状进行评估，存在一定的局限性。生化分子水平作为一种临床检测方法，是临床上有效的鉴别不可逆或可逆牙髓炎的辅助方法，对于提高保髓治疗的成功率有重要意义。在本研究数据中发现氯已定能显著降低MMP-8及MMP-2水平，数据提示氯已定对基质金属蛋白酶的抑制作用更为显著。氯已定是一种双胍类抗菌药物，临床上常用的氯已定制剂包括醋酸氯已定、盐酸氯已定及葡萄糖酸氯已定三种。氯已定是目前临床上常用的非特异性MMPs抑制剂[6]。国外研究均已证明其对于MMP-8及MMP-2水平有显著的抑制作用，并认为氯已定可能成为一种新型的抗菌剂[7]。氯已定能有效的抑制菌斑数量，降低牙龈出血情况，其具有副作用小，安全性高，常在日常生活中添加漱口水作为口腔抗菌药物，治疗牙周炎症、窝洞消毒及根管冲洗。

氯已定抑制MMPs的机制主要是通过螯合作用结合锌、钙离子，从而能有效抑制MMPs催化区域的活性。研究报道，氯已定对于牙本质来源的半胱氨酸组织蛋白酶的蛋白水解活性具有显著抑制作用，提示为氯已定可作为本质牙髓复合体中半胱氨酸组织蛋白水解酶的抑制剂，其在抑制半胱氨酸组织蛋白酶的过程中可控制炎症的进展[8]。氯已定是MMPs的一种非特异性抑制剂，也是一种阳离子表面活性剂，具有很强的广谱抑菌、杀菌作用，对革兰氏阳性菌和阴性菌的抗菌作用都比较强。它能结合阳离子生成金属螯合物，抑制MMPs的活性，高浓度时会呈现出杀菌作用，而且在血清以及血液存在时仍然对细菌有效，在牙本质粘结过程中，能缓解胶原纤维降解速度，使混合层稳定，以提高粘结耐久性。本研究结果提示氯已定能对于MMP-8及MMP-2水平有显著的抑制作用。在临床上对于根管冲洗液选择，应综合考虑到治疗的各个步骤。

综上所述，氯已定能显著抑制牙髓炎症组织中的MMPs，还能提高牙质粘结度，能提高牙髓病治疗及修复率，临床上值得推广。