趋化因子配体检测对新生儿B族链球菌早发型败血症的预测价值

夏家敏，温冬梅，马娟萍，张 蓉，于 英，倪 倩

（1甘肃省酒泉市人民医院儿科，甘肃酒泉 735000；2兰州大学第二医院儿童医院儿科，兰州 730000)

新生儿早发型败血症（early-onset sepsis，EOS）是出生后7 d 内发生的较严重的感染性全身性疾病，病死率较高[1]。B族链球菌（Group B streptococcus，GBS）是寄生在人下消化道、泌尿生殖道中的一种条件致病菌。数据显示，我国孕妇GBS 带菌率约10%～32%，而因妊娠特殊阴道环境，GBS 感染成为新生儿EOS 的常见、主要病因[2-3]。目前培养法是临床诊断新生儿GBS EOS 的“金标准”，尽管特异性高，但诊断周期长，不利于医师早期对病情评估，且无法满足当前“治未病”理念需求。趋化因子是由细胞分泌的一类信号蛋白或小细胞因子，具有诱导反应细胞定向趋化的能力，且其通过配体与受体结合可发挥促炎反应、损伤修复、控制细胞迁徙等多种生物活性，其中趋化因子CX3C配体3（CX3CL3）、趋化因子CXC 配体9（CXCL9）、趋化因子CXC 配体10（CXCL10）是近年在感染性疾病领域研究较多的趋化因子配体家族成员[4-5]。但有关上述趋化因子配体与新生儿GBS EOS间关系的研究报道较少，故本研究旨在探究CX3CL3、CXCL9、CXCL10对新生儿GBS EOS的预测价值，为临床完善相关诊疗机制提供参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年2月-2021年2月甘肃省酒泉市人民医院90例血培养阳性的GBS EOS 新生儿作为研究组，以1:1 配对原则选取孕母GBS 定植新生儿90 例作为对照Ⅰ组、正常新生儿90 例作为对照Ⅱ组。纳入标准：对照Ⅰ组母亲孕期确诊GBS 定植，出生后7 d 内新生儿未见感染症状；研究组、对照Ⅰ组孕35～37 周时GBS 筛查确诊GBS 定植；研究组出生后3 d 内出现嗜睡或烦躁不安，黄疸，进奶量降低或拒乳等症状，经外周血常规、细菌培养检查符合《新生儿败血症诊断及治疗专家共识（2019 年版）》[6]诊断标准；对照Ⅱ组母亲孕35～37周时GBS 筛查阴性，身体健康无感染性疾病，且新生儿健康状态良好；研究组、对照Ⅰ组均在产时静脉用青霉素G 预防性治疗；孕母、家属知情理解本研究，签署同意书。排除标准：存在其他病原体感染者；畸形儿；有代谢性遗传疾病者；孕母存在结缔组织病、肿瘤等严重疾病者。本研究经甘肃省酒泉市人民医院医学伦理委员会审核通过（审批文号：2018L-921）。

1.2 方法新生儿娩出断脐后即刻采用抗凝真空管采集脐动脉血3 mL，离心（转速4 000 r/min，时间15 min，半径10 cm），采集上层清液，分别采用上海超研生物科技有限公司酶联免疫吸附试验试剂盒测CX3CL3 水平；采用上海晶抗生物工程有限公司酶联免疫吸附试验试剂盒测CXCL9、CXCL10 水平。均由检验科资深检验技师参照试剂盒说明书操作。

1.3 观察指标（1）对比3组趋化因子配体水平。（2）对比研究组不同孕母状况及临床特征患儿脐动脉血指标水平。（3）分析趋化因子配体预测新生儿GBS EOS的价值。

1.4 统计学处理采用SPSS 25.0 软件处理数据，计数资料以n（%）描述，采用χ2检验，计量资料采用Bartlett 方差齐性检验与Kolmogorov－Smirnov 正态性检验，均确认具备方差齐性且近似服从正态分布，以（±s）描述，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两组间比较采用LSD-t检验；受试者工作特征曲线(ROC)分析预测价值。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 一般情况研究组男性52 例，女性38 例，胎龄28～41周，平均（38.06±1.15）周，孕母年龄23～34岁，平均（28.91±2.33）岁。对照Ⅰ组男性49 例，女性41例，胎龄29～41 周，平均（38.13±1.13）周，孕母年龄22～32 岁，平均（28.33±2.17）岁。对照Ⅱ组男性51例，女性39 例，胎龄30～41 周，平均（38.22±1.09）周，孕母年龄24～34岁，平均（28.29±2.17）岁。3组性别、胎龄、孕母年龄均衡可比（P>0.05）。

2.2 3 组趋化因子配体水平比较研究组脐动脉血CX3CL3、CXCL9、CXCL10水平高于对照Ⅰ组、对照Ⅱ组，差异有统计学意义；对照Ⅰ组脐动脉血CXCL9、CXCL10 水平高于对照Ⅱ组，差异有统计学意义（t=20.233，P<0.001；t=16.149，P<0.001）；对照Ⅰ组、对照Ⅱ组脐动脉血CX3CL3 水平对比，差异无统计学意义（t=1.162，P=0.246），见表1。

表1 3组趋化因子配体水平比较（±s）

表1 3组趋化因子配体水平比较（±s）

组别研究组对照Ⅰ组对照Ⅱ组FP例数90 90 90 CX3CL3/（pg/dL）130.56±23.73 101.55±21.63 97.85±18.36 63.327<0.001 CXCL9/（pg/mL）316.58±46.29 261.77±52.34 125.86±34.77 427.378<0.001 CXCL10/（pg/mL）115.52±32.79 98.29±25.86 36.79±14.63 236.210<0.001

2.3 研究组不同孕母状况及临床特征患儿脐动脉血指标水平比较研究组不同性别、胎龄、阿氏评分、体质量患儿脐动脉血CX3CL3、CXCL9、CXCL10 水平对比，差异无统计学意义（P>0.05）；不同病情程度、不同预后患儿及孕母是否胎膜早破、是否绒毛膜羊膜炎患儿脐动脉血CX3CL3、CXCL9、CXCL10 水平对比，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 研究组不同孕母状况及临床特征患儿脐动脉血指标水平对比（±s）

表2 研究组不同孕母状况及临床特征患儿脐动脉血指标水平对比（±s）

注：病情程度参考小儿危重病例评分表(PCIS)评价<71分极危重；71～80分危重；>80分非危重

临床特征性别男 女胎龄/周<37≥37阿氏评分/分<7≥7体质量/g<2 500≥2 500病情程度极危重危重非危重不同预后病死存活孕母状况胎膜早破是 否绒毛膜羊膜炎是 否n 52 38 31 59 65 25 27 63 21 46 23 23 67 19 71 21 69 CX3CL3/（pg/dL）128.66±16.73 133.16±17.22 133.58±18.86 128.97±15.37 131.29±18.50 128.74±17.31 134.26±15.63 128.97±17.29 140.86±11.23 130.57±16.82 121.14±15.37 143.25±10.22 126.20±14.89 139.65±10.35 128.13±11.28 141.25±9.65 127.31±12.38 t或F/P 1.245/0.217 1.249/0.215 0.596/0.553 1.368/0.175 9.080/<0.001 5.086/<0.001 4.019/<0.001 4.734/<0.001 CXCL9/（pg/mL）314.56±45.35 319.34±46.78 319.85±47.29 314.86±48.05 320.15±46.28 307.30±47.44 317.25±47.26 316.29±45.38 338.98±28.71 316.25±32.46 296.79±25.43 341.56±22.61 308.00±31.47 329.65±19.65 313.08±20.44 335.25±20.43 311.58±19.85 t或F/P 0.487/0.627 0.471/0.639 1.172/0.245 0.091/0.928 10.885/<0.001 4.707/<0.001 3.163/0.002 4.753/<0.001 CXCL10/（pg/mL）113.26±28.96 118.61±25.73 117.28±29.64 114.60±31.20 118.30±28.53 108.29±29.77 117.31±30.22 114.75±31.30 130.02±16.36 115.36±25.40 102.60±22.81 133.56±15.43 109.33±16.77 126.35±13.62 112.62±12.84 129.25±14.29 111.85±15.43 t或F/P 0.907/0.367 0.394/0.695 1.473/0.144 0.359/0.720 7.836/0.001 6.097/<0.001 4.088/<0.001 4.600/<0.001

2.4 趋化因子配体预测新生儿GBS EOS 的价值分析以研究组作为阳性数据，以对照Ⅰ组作为阴性数据，绘制脐动脉血CX3CL3、CXCL9、CXCL10 单独及联合预测新生儿GBS EOS 的ROC，结果显示，上述指标联合预测新生儿GBS EOS 的AUC 值0.899 大于单一指标预测（P<0.05），见图1、表3。

图1 ROC图

表3 趋化因子配体预测新生儿GBS EOS的价值分析

3 讨论

新生儿群体中GBS 感染所致EOS 发病率约1.6%～2.1%，但病死率可达20% 以上[7]。目前新生儿GBS EOS 尚无特效治疗方案，而如何加强早期监测，尽早干预是预防此疾病发生及确保新生儿生命安全的重要环节。

近年有关新生儿GBS EOS 的研究较多，主要集中在疾病诊断层面，尽管有研究提出，C-反应蛋白、降钙素原等脐血促炎性细胞因子可应用于新生儿早期感染的预测，但尚未形成有效的预警机制[8]。趋化因子配体是能调节趋化因子诱导反应细胞定向趋化的一类细胞因子，参与机体多种重要生理功能。临床广泛证实，趋化因子配体检测在感染性疾病诊断中具有重要参考价值[9-10]。CX3CL3、CXCL9、CXCL10是近年研究较多的趋化因子配体家族主要成员，本研究在规范病例选取标准后发现，孕母GBS 定植时上述指标在脐动脉血中含量异常，且发生EOS 的新生儿异常程度更显著。CX3CL3 是具趋化功能及黏附功能的细胞因子，其在炎症反应中发挥重要作用。李晓晓等[11]通过检测感染及健康新生儿脐动脉血CX3CL3 水平发现，二者并无差异，感染新生儿脑脊液CX3CL3 水平显著升高。本研究发现对照Ⅰ组、对照Ⅱ组脐动脉血CX3CL3 水平间无明显差异（P>0.05），与上述研究一致，但本研究发现EOS 的新生儿脐动脉血CX3CL3 水平高于对照Ⅰ组、对照Ⅱ组，尤其是孕妇发生胎膜早破及出现绒毛膜羊膜炎的患儿脐动脉血CX3CL3 水平升高更显著（P<0.05），分析可能是胎膜早破及出现绒毛膜羊膜炎均是诱发EOS 的危险因素，当二者单独或同时发生时可加重机体炎症反应并诱导血管内皮细胞表达CX3CL3，提示外周血CX3CL3 或可为临床评估新生儿GBS EOS 发生风险提供参考。

此外，CXCL9、CXCL10 是巨噬细胞极化过程所招募趋化因子配体成员，其主要作用是激活机体免疫系统，对抗病原体入侵[12-13]。林彦青等[14]在研究中提出，GBS 在宫内定植状态时，休眠状态的巨噬细胞M0 即向M1 极化并招募附近CXCL9、CXCL10 以激活免疫系统发挥抗感染、抗炎作用。由此推测新生儿脐动脉血CXCL9、CXCL10 水平或可为临床完善感染状态评价机制提供参考。本研究发现，研究组脐动脉血CXCL9、CXCL10 水平高于对照Ⅰ组、对照Ⅱ组，对照Ⅰ组高于对照Ⅱ组（P<0.05），提示脐动脉血CX⁃CL9、CXCL10 水平变化可能与新生儿GBS EOS 发生发展有关，且与CX3CL3 对比在鉴别GBS 感染中敏感性可能更佳。上述推测得到证实。结合现有研究分析可能是CXCL9、CXCL10 在宫内感染早期即可通过巨噬细胞极化过程异常表达，而CX3CL3 仅当血管内皮出现严重炎性损害时才急剧表达，同时不难发现三者在评价新生儿GBS EOS 发生发展中或可互为补充，为临床评估病情程度等提供参考[15-17]。本研究进一步ROC 分析显示，上述指标联合预测新生儿GBS EOS 的AUC 大于单一指标预测（P<0.05），客观说明CX3CL3、CXCL9、CXCL10 可为临床评估新生儿GBS EOS 发生风险提供参考，尤其是孕母存在胎膜早破、绒毛膜羊膜炎等高危因素时更需注重CX3CL3、CX⁃CL9、CXCL10 的检测以加强GBS EOS 发生风险防控。但新生儿GBS EOS 存在多种不同的临床表现，而本研究不足之处在于，未探明不同临床表现间脐动脉血CX3CL3、CXCL9、CXCL10 水平是否存在差异，需后期进一步探讨。

综上可知，CX3CL3、CXCL9、CXCL10可能参与新生儿GBS EOS 的发病，联合检测上述因子水平对新生儿GBS EOS 的发病风险有较高的预测价值，有助于临床及早制订防治措施。