天津市东丽区HIV抗体筛查与确证检测现状分析

崔欲晓

天津市东丽区疾病预防控制中心微生物检验科 300300

获得性免疫缺陷综合征（又称艾滋病）是感染人类免疫缺陷病毒（HIV）后，以人体CD4+T淋巴细胞减少为特征的免疫功能缺陷，临床上表现为多种机会感染、恶性肿瘤和中枢神经系统病变的综合性疾患［1-2］。HIV属于单链RNA病毒，基因变异较快，研制其特异性疫苗仍面临着技术上的挑战，HIV感染对人类健康造成了严重的威胁［3-4］。2019年，全球约有3 790万HIV感染患者，新发感染人数约170万，相当于每天有500例新发感染患者。近年来，HIV感染者数量逐年增加，感染人群越来越广，艾滋病的预防与控制也随之面临新的挑战。我们需要通过扩大检测来更加全面掌握HIV感染者的情况［5］。目前，HIV抗体检测是判断受检者是否感染HIV病毒的主要依据，能早期发现HIV感染，对控制HIV在人群传播具有重大意义。HIV抗体检测方法包括初筛和确证检测。化学发光法、酶联免疫吸附法（ELISA）和胶体金法等主要用于HIV抗体初筛［6］。确证检测采用免疫印迹法（Western blot）。为提高检测准确性，需对初筛检测阳性标本进行复检和确证检测。本文通过对近几年HIV抗体初筛和确证试验结果进行分析，了解本辖区HIV感染现况及HIV抗体阳性条带分布特点，为今后艾滋病防治及诊断工作提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 样本来源 2016年1月1日至2020年12月31日天津市东丽区辖区内HIV初筛实验室（包括1所三甲医院，2所二甲医院及1所检测机构）送检的初筛有反应的标本，共计256份。

1.2 方法 对256份初筛有反应的标本进行复检和确证检测，方法分别为ELISA和Western blot。复检时标本进行双孔平行检测。试验方法和结果判断完全依据试剂说明书操作。

1.3 试剂与仪器 ELISA采用北京金豪生产的HIV抗体及抗原P24检测试剂盒。用Western blot进行HIV确证试验采用MP生物有限公司生产的HIV抗体检测试剂盒。使用仪器为Tecan酶标仪及洗板机，Protiblot 48全自动蛋白印迹仪。

1.4 统计学方法 试验结果运用SPSS 16.0统计软件整理分析，计数资料采用例（%）表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 复检及确证结果 如表1所示，2016年至2019年度初筛结果的复检符合率均＞93%，2020年复检符合率有所降低，为87.18%（34/39），各年度比较差异无统计学意义（χ2=1.636，P=0.651）；确证试验阳性率为88.67%（227/256），低于初筛复检阳性率94.92%（243/256）；确证结果为不确定的标本占6.64%（17/256），确证结果为阴性的标本占4.69%（12/256）。

表1 2016年至2020年天津市东丽区HIV抗体复检及确证结果[份（%）]

2.2 确证阳性样本基本情况 HIV抗体阳性样本男女性别比为16.07∶1，差异有统计学意义（χ2=3.105，P＜0.05）；HIV抗体阳性样本年龄分布广泛，最大75岁，最小17岁，主要集中在17～39岁年龄段。17～39岁占比78.13%，40～59岁占比15.63%，60岁以上占比6.24%。

2.3 确证试验带型分布情况 根据试剂说明书所示，确证结果的判定需要结合9个条带的出现情况；9个条带包括ENV条带（gp160、gp120、gp41）、pol条带（p66、p51、p31）和gag条带（p55、p24、p17）；确证阳性标本中，ENV条带出现频次最多，gp160和gp120占比100.00%，gp41占比97.36%，gag条带中p24占比100.00%；确证结果为不确定样本中，gp160和p24出现频次最多，分别为82.35%和52.94%。见表2。

表2 2016年至2018年天津市东丽区HIV抗体确证试验条带分析（%）

3 讨 论

辖区人口较多，HIV扩大检测策略的实施有利于及时发现和掌握HIV感染者的人群分布，更利于早期及时的干预。筛查人数的增加，检测方法的改变及检测设备的更新可能导致筛查的假阳性。复检双孔均为阳性时，复检和确证试验的阳性符合率较高。但当复检样品检测试剂测量值/阳性判定值之比（S/CO）值接近临界值，或出现一阴一阳的情况时，确证试验结果多为不确定或阴性，可能是由于患者位于感染早期或窗口期［7］。对于结果为不确定的样本还需要进行随访或核酸检测［8-9］。辖区送的初筛有反应标本复检符合率在90%以上，2020年度符合率偏低，主要由于送样本的机构中，公立医院送样量下降，检测机构送样占比增加。因此检测机构的检测质量还需要加强督导。

确证阳性样本中，以17～39岁男性为主，统计结果显示HIV感染以青壮年为主，与肖韶英等［10］研究一致。阳性病例中，60岁以上占6.24%，提示老年男性也是HIV感染人群中不可忽视的群体。辖区内送的初筛阳性样本复检符合率接近95%，由于不同厂家的试剂敏感性和特异性存在一定差异，ELISA检测存在假阴性和假阳性问题［11-12］。因此选择Western blot进行确证试验，排除假阳性。确证试验阳性率低于复检阳性率，也与确证试验窗口期晚于初筛试验有关。从确证条带分布情况看，抗ENV基因编码蛋白阳性率最高，gp160和gp120条带一般同时出现。gag条带最重要的p24与gp160都是HIV感染早期能检测到的条带。确证试验结果为不确定的标本虽然出现特异性条带，但还不足以被判定为阳性。不确定样本通常位于感染早期，初筛试验为弱阳性，条带分布以ENV条带和gag条带为主。对于不确定样本可以进一步随访或进行核酸检测，有助于更早期发现感染者，缩短检测窗口期。

综上所述，HIV确证结果可以在一定程度上评价初筛试验结果质量。通过对初筛和确证结果分析，可以精准早期发现HIV感染人群，有效控制HIV感染蔓延。同时应加快核酸试剂研发，进一步提高HIV检测的敏感性。

利益冲突：作者已申明文章无相关利益冲突。