MCV和MCH联合血红蛋白电泳筛查常见地中海贫血的研究

朱瑾，刘洁，黄建成

（1.福建医科大学附属闽东医院产前诊断实验室，福建 福安 355000；2.福建医科大学附属闽东医院检验科，福建 福安 355000）

近年来，地中海贫血逐渐受到临床关注，根据基因分类，可将患者分为α-地中海贫血和β-地中海贫血。两种贫血患者的贫血基因所在位置不同，α-地中海贫血患者的基因主要在16号染色体上，而β-地中海贫血患者的基因则在11号染色体上。临床数据显示[1]，超过90%的β-地中海贫血患者是由于点突变所导致的，α-地中海贫血主要的发生原因与等位基因的缺失密切相关。地中海贫血的出现，不仅会对患者造成较大的伤害，且易发生遗传，需针对孕期女性加强筛查诊断。从本质上分析，地中海贫血是一种遗传性慢性溶血性贫血病，重型地中海贫血是致死性疾病，目前在临床上还无有效的根治方案。通过产前诊断避免重型地中海贫血患儿的出生是优生方面的一个重要手段，而产前诊断的前提是发现和确诊夫妇双方为同型地中海贫血基因携带者。为有效降低地中海贫血的发生率，可在产前检查等方面加强筛查工作，研究发现[2]，可通过孕期检查查出地中海贫血，地中海贫血是一种隐性基因遗传病，大多数人群并未表现出地中海贫血的症状，更易使基因携带者忽视遗传筛查、孕期检查等工作。一旦检查不到位，很可能遗传给胎儿，影响胎儿的健康成长，因此，加强孕妇地中海贫血筛查工作非常重要。本研究通过MCV、MCH联合血红蛋白电泳筛查常见地中海贫血，分析多种检测方法对于常见地中海贫血筛查的应用效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性分析2017年1月至2018年12月于本院产前诊断机构进行地中海贫血筛查和诊断的4 136例为筛查对象，年龄18～45岁，平均年龄（30.6±2.1）岁。

1.2 方法 首先采集血液标本，采血过程中，选择观察对象体表浅静脉作为采血部位，以肘部静脉、手背静脉、内踝静脉作为首选。通常选择肘部静脉采血，但如果受检者的肘部静脉不明显，可选择其他部位静脉，采血过程中，注意避开患者有红肿、溃疡的部位。然后对患者进行常规采血，注意不可长时间使用止血带压迫（＜30 s），长时间压迫会影响实验结果。采血时尽量选择使用封闭式、真空的采血设备，避免血液样本污染。对于血常规指标MCV＜82 fl，MCH＜27 pg的标本，采取血红蛋白电泳检查方式，使用的仪器为CAPILLARYS 2电泳仪，对所有孕妇的血液样本进行电泳检查，检查过程中可根据HbA2数据判断患者的地中海贫血类型，若HbA2水平＜2.5%，属于α-地中海贫血，若HbA2水平≥3.5%即属于β-地中海贫血，可对患者所携带的地中海贫血基因进行初步判断。进行地中海贫血基因检测，进一步确定地中海贫血基因的情况，首先在α-地中海贫血患者中，有3种基因缺失的情况，一种是基因缺失SEA杂合子，二是基因缺失-α3.7，还有一种属于基因缺失-α4.2，均是α-地中海贫血的常见基因变化情况；另外还有非缺失型α-地中海贫血患者，主要是αCS，αQS以及αWS三种基因型，缺失型地中海贫血患者占α-地中海贫血总数的90%，非缺失型占10%左右；而针对β-地中海贫血患者中，由于主要的基因变化属于突变基因型，需要对CD41-42、CD31、CD27-28等17种点突变基因进行排查，确定具体的地中海贫血类型。地中海贫血筛查步骤一般先行血常规检测再做血红蛋白电泳，阳性者做基因诊断确诊，最后进行产前诊断。

1.3 筛查结果判断标准 患者MCV＞82 fl，MCH＞27 pg，2.5＜HbA2＜3.5，HbF正常，如出现其他HbG等出现异常血红蛋白区带，拟为异常HbH病；MCV＜82 fl，MCH＜27 pg，HbA2＜2.5%初步判断为ɑ-地中海贫血。MCH＜27 pg，HbA2≥3.5%，和/或HbF增高，属于β-地中海贫血。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，计数资料以[n（%）]表示，行χ2检验，计量资料以“x±s”表示，行t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 134例地中海贫血基因结果 基因检测阳性134例，其中β-地中海贫血56例，α-合并β-地中海贫血2例，α地中海贫血76例，基因检测结果，见表1。

表1 134例地中海贫血基因检查结果

2.2 地中海贫血患者MCV、MCH及血红蛋白水平与正常值比较 电泳4 135例，异常1 655例，基因检测阳性134例，筛查的敏感度较高，且常见地中海贫血患者的MCV、MCH及血红蛋白水平与正常值比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 地中海贫血患者MCV、MCH及血红蛋白水平与正常值比较（±s）

表2 地中海贫血患者MCV、MCH及血红蛋白水平与正常值比较（±s）

注：MCV，平均红细胞体积；MCH，平均红细胞血红蛋白；HbA2，血红蛋白水平

组别地中海贫血阳性患者正常值t值P值MCV 74.3±2.8 85.8±3.1 6.229 5＜0.05 MCH 30.8±2.1 24.5±1.9 7.674 8＜0.05 HbA2 2.88±0.46 3.91±0.72 6.304 6＜0.05

3 讨论

地中海贫血最早发现于地中海地区，而地中海贫血又分为α-地中海贫血和β-地中海贫血。α-地中海贫血静止型的患者无明显的临床症状，甚至无贫血的现象，患者的红细胞形态也较为正常，而发展为标准型的患者，会有轻度贫血的情况，这类患者的红细胞渗透性也稍有降低；若患者表现为轻度或中度贫血的情况，会影响到其他脏器健康，并引起肝脾肿大、黄疸等现象，若妊娠期女性出现上述情况，会产生更大危害，导致胎儿水肿、死胎等，十分危险[3-4]。β-地中海贫血静止型患者症状不明显，也不会表现出明显的贫血现象，但可从患者的血片中观察到少量的靶形红细胞；轻度性贫血的患者HbA2增高，发展至中度时，患者的脾脏会表现出轻度肿大的情况，且网织红细胞可达到5%左右，患者的红细胞渗透脆性也明显降低[5]。轻症的地中海贫血，也就是杂合子/地中海贫血基因携带者，如–α/αα、--/αα等，一般情况下无生命危险，但这类群体的红细胞的携氧能力更差[6]。按照贫血严重程度，地中海贫血一般分为轻型、中间型和重型。轻型一般为地中海贫血携带者，两个等位基因中一个有问题，一般无明显临床特征或只有轻微贫血；中间型地中海贫血的机制比较复杂，如地中海贫血的基因均发生突变，但某个突变发生在启动子区域，因此，基因还保留部分活性。地中海贫血的发生，会对患者身体造成较大危害，做好相关诊断工作非常重要。

加强地中海贫血的产前筛查非常重要，超声检测胎儿大脑中动脉血流频谱也可及早发现“巴氏水肿胎”[7]。地中海贫血是一种隐性基因遗传病。多数人只是携带地中海贫血基因而不表现出任何贫血症状，地中海贫血只会遗传，不会传染[5]。假如父母中有一个人携带地中海贫血基因，子女就可能会遗传到地中海贫血基因。中间型地中海贫血是从临床症状的严重程度进行划分，按照贫血严重程度，地中海贫血一般分为轻型、中间型和重型。轻型一般为地中海贫血携带者，两个等位基因一个有问题，一般无临床特征或只有轻微贫血。中间型地中海贫血的机制较复杂。

本研究结果表明，地中海贫血患者的血常规（红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白等）检测结果与正常值比较差异有统计学意义（P＜0.05），可作为临床诊断地中海贫血的重要指标。对孕期女性进行地中海贫血的筛查工作是实现优生优育的重要步骤，目前国家对于孕检地中海贫血的筛查也非常重视，并对一些较为贫困的地区实施免费孕期地中海贫血筛查措施，孕妇在接受地中海筛查贫血时也需积极配合孕检要求，仔细检查孕期Hb、HbA2等的水平，一般女性在怀孕12周后即可进行地中海贫血筛查，通过抽取静脉血液检查基因状况，一旦确诊也不可过于紧张焦虑，及时进行治疗和病情控制，需注意，此病与缺铁性贫血有很大差异，不可随意补充铁元素，可适当调理膳食结构，多饮水与配合运动锻炼，保持良好的心情状态，可有效改善病情带来的影响。

综上所述，对地中海贫血患者使用MCV、MCH结合血红蛋白电泳进行筛查检验，可及时了解患者的血液情况，有助于提高地中海贫血的诊断准确率。利用MCV、MCH及血红蛋白电泳联合筛查可排除大部分的假阳性，减轻患者负担，筛查和诊断意义较大，是比较经济、简便、安全的一种检测手段。地中海贫血的产前筛查诊断工作，对于避免地中海贫血患儿的出生及产科急危重并发症的发生，优生优育有较高的价值。