抗瓜氨酸化α 烯醇化酶多肽1 抗体在初治类风湿关节炎患者中的表达及其临床价值研究

贾浩楠，王丽茹，张辰蔚，董霞，彭静，许兴路

1.黑龙江省医院风湿免疫科，黑龙江哈尔滨 150036；2.黑龙江省医院放射免疫特检科，黑龙江哈尔滨 150036

类风湿关节炎（RA）是一种慢性、炎症性自身免疫病，以滑膜炎为病理特征，主要累及双侧对称小关节，RA 患者如未早期发现、早期诊治，会导致关节畸形和功能丧失[1-2]。因此，在疾病发作时，早期识别预后不良标志物有助于临床医生预测病情，从而进行周密的随访与有效及时的治疗。自身抗体的研究，有助于RA 患者早期诊断，进而早期干预，延缓疾病进展，改善预后。多个研究表明，RA 患者体内自身抗体的产生早于患者出现临床表现的时间[3-4]。目前，抗环瓜氨酸蛋白（cCCP）抗体和类风湿因子（RF）广泛应用于临床[5-6]。由于RA是一种复杂的疾病，异质性强，CCP 是人工合成的瓜氨酸化多肽，不是自身抗原，并且其来源聚丝蛋白在RA关节中无表达，无法解释RA 病因，因此发现一种新的特异性较强的自身抗体有着重要作用[7]。近年来研究人员发现，抗瓜氨酸化α 烯醇化酶多肽1（CEP-1）抗体对于RA 的联合诊断或在血清学阴性RA 的辅助诊断中具有较好意义[8]。该研究回顾性收集2019 年4 月—2020 年5 月院内50 例病例进行分析，通过对初治RA患者血清中抗CEP-1 抗体水平的检测，进一步探讨其在RA 诊断、判断病情活动及预后中的临床价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析于该院行相关检查的50 例初治RA 患者，30 名健康体检者临床资料，将RA 患者纳入RA组，将健康体检者纳入健康对照组。根据抗CEP-1 抗体阳性与否将初治RA 患者分为阳性组33 例和阴性组17 例。RA 组女43 例，男7 例；年龄为20～55 岁，平均（32.25±5.67）岁；病程为2 个月～3 年，平均（1.86±0.34）年。诊断均符合2010 年的RA 分类诊断标准[9]，且所有RA 患者在入选前均未接受过激素、免疫抑制剂或生物制剂等药物治疗。对照组女20 名，男10 名；年龄22～58岁，平均（35.68±6.14）岁；均为同期来自该院体检中心的健康体检人员，无自身免疫性疾病、无关节痛病史。两组一般资料对比差异无统计学意义（P>0.05）。该研究经该院医学伦理委员会批准，且所有受试者均签署知情同意书。

1.2 方法

采集禁食水8 h 以上的空腹外周静脉血3～4 mL，离心后取上层血清，置于-20℃冰箱保存，以备统一进行抗CEP-1 抗体检测。采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）测定抗CEP-1 抗体，检测具体步骤严格按照说明书进行操作，抗CEP-1 抗体以20 RU/mL 为阳性临界值。

1.3 观察指标

记录各组观察对象抗CEP-1 抗体表达情况。记录两组RA 患者DAS28、改良Sharp 评分，采用Spearman相关性分析法分析初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达与DAS28、改良Sharp 评分的相关性，采用Logistic 多元回归分析法分析初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达独立风险因素。

1.4 评估标准

28 个关节疾病活动度评分（DAS28）用于评估患者疾病活动度[10]，分值越高表示疾病活动度越高。改良Sharp 评分用于评估患者骨侵蚀、破坏程度[11]，主要从其手部X 线片变化入手，对关节侵蚀、间隙狭窄情况进行评判，分值越高表示其结构性病变程度越严重。

1.5 统计方法

采用SPSS 21.0 统计学软件进行数据分析，计量资料的表达方式为（），采用t 检验进行组间比较，计数资料的表达方式为[n（%）]，采用χ2检验进行组间比较，相关性分析采用Spearman 相关模型，独立危险因素采用Logistic 多元回归分析评估，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CEP-1 抗体表达情况比较

RA 组抗CEP-1 抗体阳性率为66%（33/50），显著高于健康对照组的0%（0/30），差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 两组DAS28、改良Sharp 评分比较

初治RA 患者中，阳性组DAS28、改良Sharp 评分显著高于阴性组，差异有统计学意义（t=6.548、6.008，P＜0.05），见表1。

表1 两组DAS28、改良Sharp 评分比较[（），分]

表1 两组DAS28、改良Sharp 评分比较[（），分]

2.3 初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达与DAS28、改良Sharp 评分的相关性分析

Spearman 相关分析结果表明，初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达与DAS28、改良Sharp 评分呈正相关（P＜0.05），见表2。

表2 初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达与DAS28、改良Sharp 评分的相关性分析

2.4 初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达的多因素分析

经Logistic 多元回归分析法分析得出，DAS28、改良Sharp 评分均可受到初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达的独立影响（P＜0.05），见表3。

表3 初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达的Logistic 多因素分析

3 讨论

RA 属于一类慢性免疫系统疾病，患者常见的病理学特征为滑膜炎，发病后可对称性地侵袭身体不同关节[12]，若此类患未得到有效的早期诊断、治疗，其关节可能出现不可逆畸形，使其正常功能发生障碍或完全丧失。目前临床研究认为，该病发生发展与诸多自身抗体表达有关，主要包括RF、抗CEP-1 抗体及ACPA 抗体等。

α-烯醇化酶（α-ENO）作为一类糖酵解酶，其与RA患者慢性炎症、丙酮酸合成均存在密切关联，属于类型较新的一种表面蛋白，虽无法进行表面转运，但可经某种未知途径进行细胞表面运输，并以纤溶酶原受体的形式在诸多上皮细胞、内皮细胞、造血干细胞表面存活，可与机体纤溶系统及血管内部发挥一定作用。近年来，有关α-ENO 报道指出，其以自身抗原的形式在诸多侵袭性、系统性的免疫疾病中活跃表达，尤其当RA患者机体出现感染、炎症时表现更为活跃[13]。而亦有研究指出，抗CEP-1 抗体阳性表达与否与患者关节内抗原表达水平具有显著相关性[14]，前者阳性表达伴随患者较为严重的炎症反应，进一步印证α-ENO 在RA 患者炎症反应诱发中的作用[15]。该次研究中，RA 患者抗CEP-1 抗体阳性表达率明显高于其他对照组，与相关研究背景符合，而RA 患者中抗CEP-1 抗体阳性组DAS28 较阴性组更高，且其表达与DAS28 呈正相关，均提示RA患者抗CEP-1 抗体阳性表达后关节疾病活动度可显著上升，猜测其原因在于抗CEP-1 抗体阳性表达与患者慢性炎症反应发生后α-ENO 水平的上升有关，而随着炎症反应的进展，患者疾病活动度可进一步受到影响，使其DAS28 明显升高。Logistic 回归分析得出，DAS28可受到初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达的独立影响，原因在于抗CEP-1 抗体表达的阳性与否直接关系到患者炎症发生情况，对其疾病活动度的影响亦极为显著，其可借助p38 丝裂原作用将蛋白激酶（MAPK）活化，并通过对单核巨噬细胞的刺激增加促炎介质的分泌产生，亦可刺激α-ENO 在关节组织的表达[16]，使RA 患者炎症效应期中参与的炎性介质水平更高，影响到关节活动度，这与杨梦溪等[16]研究结果中关于炎症机制解释部分较为相似，且该文中RA 患者抗CEP-1 抗体阳性率为66%，与其研究结果64.3%较为相近。

骨破坏作为RA 患者关节病变的重要表现，因其具有不可逆性，临床应对措施以早诊断、早预防为主，对RA 患者的治疗不仅需纳入对其具体症状的考虑，还需以关节影像检查为重要观察点。该次研究中，RA 患者中抗CEP-1 抗体阳性组改良Sharp 评分较阴性组更高，且该抗体表达与改良Sharp 评分具有正相关性，而在罗采南等[17]研究中，发现此类患者抗CEP-1 抗体表达与骨破坏存在显著相关性（r=0.673，P＜0.05），均提示抗CEP-1 抗体阳性RA 患者骨破坏程度更严重，其原因在于此类患者炎症反应程度较重，长期持续可因炎性物质侵袭加重患者骨破坏程度，导致其改良Sharp 评分明显升高。而经Logistic 回归分析可发现，改良Sharp 评分可受到初治RA 患者抗CEP-1 抗体表达的独立影响，其亦证实了此类患者发生骨破坏与其自身炎症有关。

综上所述，RA 患者大多表现为抗CEP-1 抗体阳性，其表达与其疾病活动度、骨破坏程度关系密切，可为临床早期诊疗提供一定作用。