血清维生素A、淀粉样蛋白A、EB病毒IgM联合检测对儿童呼吸道感染诊断价值

余先云， 冉彩萍， 何琛璐， 张晓慧， 张忠刚， 孙 劲， 周生元， 段令兄, 郭慧慧

1.青海省妇幼保健院 新生儿科，青海 西宁 810000；2.青海省妇女儿童医院 急诊科，青海 西宁 810000；3.联勤保障部队第九六七医院 妇产科，辽宁 大连 116000

呼吸系统感染是临床较常见的儿童多发性疾病，在儿科收治患者中约占3/4，严重影响患儿健康[1]。此外，呼吸系统感染复发性高，病程长，对患儿的学习和生活造成影响，也对其家庭造成严重的经济负担[2]。儿童呼吸道感染发病原因一方面与其自身的生理解剖特点有关，另一方面与患儿免疫功能缺陷或低下、营养不良或维生素缺乏有关。维生素A、D、E是儿童生长发育中不可缺少的微量营养素，可增强免疫抵抗力，维持人体生长发育与正常生理功能[3]。有研究表明，感染性疾病患者血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A，SAA)水平明显增加，增加时间早且迅速[4]。因此，该指标在感染性疾病中可能具有重要的诊断价值。机体免疫功能低下时，体内隐藏的EB病毒活化并引起机体一个甚至多个系统发生感染，其中，呼吸系统是最常见受累系统之一[5]。本研究旨在探讨血清维生素A、SAA、EB病毒IgM(EB-IgM)联合检测在儿童呼吸道感染诊断中的诊断价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取自2017年1月至2019年12月于青海省妇幼保健院确诊为呼吸道感染的100例患儿纳入B组。所有患儿均根据呼吸道感染诊断标准(卫生部制定)诊断确认[6]。排除标准：肝、肾等方面疾病及恶性肿瘤者；发病前服用免疫调节药或肾上腺皮质激素等药物者；患有其他肺部疾病者。另选取同期于我院接受健康体检的98例正常儿童纳入A组。A组中，男性44例，女性54例；平均年龄(6.17±1.23)岁。B组中，男性48例，女性52例；平均年龄(6.12±1.34)岁；上呼吸道感染58例，支气管肺炎22例，支气管炎16例，扁桃体炎4例。两组研究对象性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。所有研究对象家属均签署知情同意书。

1.2 研究方法 于清晨采集所有研究对象空腹10 ml静脉血，3 500 r/min离心15 min取上清。采用免疫比浊法检测C反应蛋白(C-reaction protein，CRP)；使用电阻抗法检测白细胞计数(white blood cell count，WBC)水平；使用胶体金法检测SAA；使用高效液相色谱检测维生素A、维生素E；使用化学发光免疫技术检测维生素D，试剂盒来自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司。EB-IgM、EB-IgG、EB-IgA检测：对分离的血清样品给予如下操作，包括温育、清洗、添加酶结合物进一步温育、清洗、底物温育、终止反应、比色等。待测样品吸光度/标准品吸光度之比≥1.1，则判断为阳性。EB-DNA检测：提取DNA、扩增、加UNG酶反应、酶活化、变性、退火、延伸(循环数：45)。当达到荧光强度阈值的循环数<39时，则判断为阳性。

2 结果

2.1 两组研究对象临床指标比较 B组EB-IgM、EB-IgG、EB-IgA、EB-DNA阳性率明显高于A组，CRP、WBC、SAA水平均显著高于A组，维生素A、维生素D、维生素E水平显著低于A组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组研究对象临床指标比较

2.2 多元Logistic回归分析 多元Logistic回归分析结果显示，血清维生素A、SAA、EB-IgM是儿童呼吸道感染发生的独立影响因素(P<0.05)。见表2。

表2 多元Logistic回归分析结果

2.3 EB-IgM、SAA、维生素A单独与联合检测儿童呼吸道感染诊断价值 EB-IgM+SAA+维生素A检测的ROC曲线下面积、敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值高于EB-IgM、SAA、维生素A单独检测，差异有统计学意义(P<0.05)。EB-IgM检测敏感度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值高于SAA及维生素A单独检测，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3、图1。

表3 EB-IgM、SAA、维生素A单独与联合检测儿童呼吸道感染ROC曲线分析

图1 ROC曲线分析

3 讨论

流行病学研究结果表明，儿童感染性疾病在小儿疾病中占据前列，而儿童呼吸道感染在其中具有重要位置，发病率高达40%[7]。上呼吸道感染未给予及时治疗，病情易进展为下呼吸道感染，甚至造成肾炎、心肌炎、败血症、风湿热等[8]。然而，病原学细菌培养检查周期长，且阳性诊断率低，临床诊断价值较低。因此，寻找更具准确性与特异性的检测指标对于疾病的早期精准有效治疗具有重要的临床意义。此外，早期诊断疾病对判断感染类型，避免抗菌药物滥用，减少耐药发生同样具有重要作用。

作为载脂蛋白族中高度异类蛋白质之一，SAA主要表达于泡沫细胞、肝细胞及脂肪细胞中，在体内生物学过程发挥着重要作用。当机体受到炎性刺激并发生急性炎症反应时，单核巨噬细胞活化并释放大量炎性因子，如肿瘤坏死因子、白细胞介素等，并进一步刺激肝细胞合成SAA。有研究表明，正常人体内血清中SAA水平很低，当患儿发生呼吸道感染时，机体发生急性相反应，此时肝内合成SAA蛋白明显增加，6 h后血清中含量可升高1 000倍[9]。本研究发现，相比于A组，B组血清中SAA水平明显增加。这提示，检测体内血清中SAA水平是否增加及其程度可为儿童呼吸道感染的诊断能提供重要的参考依据。

维生素A、D、E属于脂溶性的微量营养素，是人体物质代谢必不可少的维生素，在儿童生长发育、维持机体正常生理功能等过程中具有重要作用。维生素A是保持正常视觉功能并维持细胞生长、上皮完整性、免疫力和生殖功能的必需营养素。维生素D对保持骨骼的健康至关重要，在肌肉功能和免疫系统中发挥重要作用。维生素E作为主要的脂溶性抗氧化剂可保护细胞膜免受自由基的氧化损伤，预防与氧化应激相关的慢性疾病。维生素缺乏症是儿童发生呼吸道感染的重要因素之一。本研究结果显示，上述维生素中仅维生素A是儿童呼吸道感染发生的独立危险因素，B组患儿血清中维生素A水平较正常儿童低。维生素A具有抗感染作用。有研究发现，机体维生素A缺乏时，呼吸道纤毛柱状上皮细胞纤毛消失，导致其鳞状上皮发生化生，降低呼吸道黏膜密集性，进而降低呼吸道黏膜屏障功能，引起腺体细胞正常功能丧失，机体免疫功能降低，增加病原体入侵机体的可能性，最终导致呼吸道感染[10]。另有研究表明，血清中维生素A水平与免疫球蛋白、淋巴细胞转化率正相关[11]。

有研究表明，在90%的儿童血清中可检查出EB-IgG[12]。由于取材样品的局限性，早期检查结果EB-IgG假阳性结果较多。同时，由于EB-IgG被作为病毒感染的远期指标，其早期诊断意义远低于EB-IgM。EB-IgM含量与机体组织、器官损伤程度、疾病严重程度呈正相关，因此，临床上可以根据EB-IgM含量对患儿感染性疾病严重程度给予准确判断，准确给予药量，以达到最佳的治疗效果[13]。本研究中，检测EB-IgM诊断儿童呼吸道感染的敏感度、特异度、准确度分别为74.74%、78.34%、76.12%，高于维生素A、SAA单独检测；同时，B组EB-IgM阳性率明显高于A组，提示EB-IgM水平检测可为儿童呼吸道感染的诊断提供重要的参考和判断依据。

本研究结果表明，B组患儿EB-IgM阳性率、SAA均显著高于A组，而维生素A水平显著低于A组；多元回归分析结果显示，维生素A+SAA+EB-IgM联合检测的敏感度为96.09%、特异度为97.54%、准确度为95.02%，且此时ROC曲线下面积达到0.939。这提示，联合检测血清中维生素A、SAA、EB-IgM有利于临床上儿童呼吸道感染的诊断、治疗及预后判断。

综上所述，联合检测血清中维生素A、SAA、EB-IgM可明显提高儿童呼吸道感染诊断的准确度、敏感度及特异度，三者联合检测效能优于单独检测。