银屑病患者外周血白细胞介素17、白细胞介素23 mRNA的表达及与病情相关性研究
2021-09-09冉灵芝曾凡杞胡鹏飞邹梦英
冉灵芝 曾凡杞 胡鹏飞 邹梦英
(中国科学院大学深圳医院(光明),广东深圳 518106)
银屑病是一种皮肤科较为常见的疾病,是一种免疫异常性的慢性炎症性、增生性皮肤病,屑病患者通常会出现皮肤红斑鳞屑,严重者会出现系统炎症的症状。导致银屑病患者发病的病因很多,且发病机制复杂,通过对近几年的研究资料进行了解后发现,患者多受到环境影响,在多遗传基因的控制下细胞功能出现异常,且细胞功能异常是导致银屑病的主要原因[1],细胞功能出现的异常与银屑病皮损的发生、发展和加重密切相关。现有的研究表明,T细胞的异常可能是导致银屑病主要的原因之一,尤其是调节性T细胞抑制功能的减弱导致效应T细胞增殖失控[2]。白细胞介素17由辅助性T细胞分泌[3-6]。本次研究旨在进一步研究银屑病的发病机制,通过对两组人员血清中IL-17 mRNA和IL-23的表达量以及临床相关性进行观察研究,为银屑病患者的治疗提供更多的参考依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本次研究从2020年1月至2021年2月开展,研究对象为在我院进行治疗的银屑病患者30例作为观察组,另外选取30名健康者作为对照组,其中,观察组男性患者17例,女性患者13例,年龄30~55周岁,平均年龄为(42.00±6.23)周岁;对照组男性15例,女性患者15例,年龄28~53周岁,平均年龄(43.00±5.74)周岁。观察组受试者均符合《中国临床皮肤病学》银屑病临床诊断标准;本次研究均在患者及家属知情且同意的情况下进行,并将本次研究的方法与具体细节详细的告知了患者及家属。纳入标准:18周岁及以上患者;所有患者均经医院检查后确诊为寻常型斑块状银屑病的患者;对研究中所使用药物无过敏史。排除标准:患有其他类型皮肤病以及慢性疾病患者;对本次研究不配合或中途自愿退出的。
1.2 方法 抽取两组研究对象2 mL的静脉血液,血液样本经抗凝处理后保存在零下80 ℃环境下,将1 mL血液样本解冻后放入离心管中,之后加入灭菌蒸馏水进行摇匀静置20~30 min,采用2 000转/分速离心30 min后加入磷酸盐缓冲液再进行2 000/分转速的离心,离心过程完成后再加入2 mL的RNA提取试剂静置10 min;之后加入氯仿摇匀后室温放置5 min后再放入离心管中,进行15 min 2 000转/分的分离;离心管最上层为RNA溶液,将其放入新的离心管内,加入异丙醇摇匀后静置10 min(加快RNA沉淀);之后将离心管再次放入2 000转/分离心10 min,加入预冷的75%乙醇后摇匀,在2 000转/分离心5 min后弃上清液,在空气中干燥5 min,加入DEPC灭菌蒸馏水溶解RNA,恒温水浴70 ℃加热10 min以破坏mRNA二级结构,提取RNA分装在3个EP管内,保存在-80 ℃环境内,应用实时荧光定量方法对两组受试者外周血单核细胞IL-17和IL-23 mRNA表达量进行观察。
1.3 观察指标 对两组患者治疗后4周以及8周后IL-17、IL-23mRNA表达量。
1.4 统计学方法 此次研究的所有数据均采用PSSS22.0统计学软件进行分析,计数资料通过χ2值检验后,采用[n(%)]来表示;计量资料经t检验后采用()表示,差异具有统计学意义(P<0.05)。
2 结果
2.1 两组血清IL-17mRNA和IL-23mRNA对比 结果显示,观察组患者血清中IL-17mRNA和IL-23mRNA表达明显高于对照组。见表1。
表1 两组血清IL-17 mRNA和IL-23 mRNA数据对比()
表1 两组血清IL-17 mRNA和IL-23 mRNA数据对比()
2.2 患者血清IL-17和IL-23的表达与PASI的相关性分析 患者外周血 IL-17和IL-23mRNA的表达水平与PASI均呈正相关(r值分为0.61、0.52,P<0.05),与患者年龄病程无关。见表2。
表2 临床相关情况与患者血清 IL-17和IL-23表达相关性分析
3 讨论
银屑病是皮肤科中较为常见且治疗难度较高的一种皮肤疾病,由于该疾病的患病以及发病因素非常广,所以该疾病还未有长期有效的治疗方法[7-8]。该疾病的主要发病人群以青壮年人为主,该疾病的治疗难度较高,治疗周期也较长,且治疗效果由于人群不同也存在着一定的差异,这就导致了患者生活质量的下降,使患者家属在经济及思想上的负担加重[8-10]。有研究资料表明,我国银屑病的患病人数在近几年不断增加,环境恶化因素导致的细胞异常皮肤病的治疗,现已成为我国皮肤病治疗领域的重点研究方向,银屑病的治疗以及预防得到了更多人的关注[11-12]。
通过对比两组在治疗前的检查结果发现,观察组患者血清中IL-17mRNA和IL-23mRNA表达明显高出对照组。观察组患者经治疗后血清中IL-17、IL-23mRNA的数值明显降低,患者外周血IL-17和IL-23mRNA的表达水平与PASI呈正相关(r值分别为0.61、0.52,P<0.05)。
综上所述,IL-17、IL-23 mRNA的表达与患者年龄、性别无明显关系,通过检查结果发现IL-17、IL-23 mRNA与银屑病的发病存在着相关联系,可能是导致患者发病的一项重要因素之一,IL-17、IL-23 mRNA与患者病情严重程度可能也存在着直接关系。